林先明，郭曉亮，郭 杰，游景茂，陳 蓉　(.湖北省農業(yè)科學院中藥材研究所/湖北省農業(yè)科技創(chuàng)新中心中藥材研究分中心，湖北恩施 445000；.恩施九州通中藥發(fā)展有限公司，湖北恩施 445000)

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獨活種子質量標準研究

林先明1，郭曉亮1，郭 杰1，游景茂1，陳 蓉2(1.湖北省農業(yè)科學院中藥材研究所/湖北省農業(yè)科技創(chuàng)新中心中藥材研究分中心，湖北恩施 445000；2.恩施九州通中藥發(fā)展有限公司，湖北恩施 445000)

摘要[目的]制定獨活種子質量分級標準。[方法]以湖北、四川、甘肅、陜西、寧夏等不同產地征集的15份獨活種子為研究材料，在測定種子發(fā)芽率、千粒重、凈度和含水量等質量指標的基礎上，采用聚類分析劃分種子等級，對不同來源的獨活種子含水量、千粒重、生活力、發(fā)芽率進行比較研究。[結果]獨活種子可以分為3個等級：一級種子發(fā)芽率≥29%、千粒重≥3.80 g、凈度≥93%、含水量≤12.5%；二級種子發(fā)芽率為22%～29%，千粒重為3.10～3.80 g，凈度為90%～93%，含水量≤12.5%；三級種子為不合格種子。[結論]該方法劃分的種子等級可以作為獨活種子質量控制的參考標準。

關鍵詞獨活；種子質量；分級標準

Study on the Quality Standard ofRadixAngelicaePubescentisSeeds

LIN Xian-ming, GUO Xiao-liang, GUO Jie et al(Institute of Chinese Herbal Medicines, Hubei Academy of Agricultural Sciences/Sub-center of Chinese Herbal Medicines, Hubei Agricultural Science and Technology Innovation Center, Enshi, Hubei 445000)

Abstract[Objective] The research aimed to develop the seed quality grading standard ofRadixAngelicaePubescentis.[Method]With Hubei,Sichuan,Gansu,Shaanxi,Ningxia and other 15 seeds ofRadixAngelicaePubescentisfor the different origin as the research material,we detected 4 quality index, including the germination rate,thousand kernel weight,neatness and water content,and we used clustering analysis to classes division of the quality of the seeds.The water content,thousand kernel weight,viability and germination rate of different sourcesRadixAngelicaePubescentisseeds were comparative study.[Result]Seeds ofRadixAngelicaePubescentiswere divided into 3 grades：Seeds of class A, seed germination rate≥29%, thousand kernel weight≥3.80 g, seed purity≥93%, water content≤12.5%；Seeds of class B, seed germination rate was between 22% and 29%,thousand kernel weight was between 3.10 and 3.80 g, seed purity was between 90% and 93%,water content≤12.5%；Seeds of class C was not qualified.[Conclusion]This seed grading standard can be used as a reference standard for seed quality control ofRadixAngelicaePubescentis.

Key wordsRadixAngelicaePubescentis; Seed quality; Grading standard

獨活(RadixAngelicaePubescentis)為傘形科植物重齒毛當歸(AngelicapubescensMaxim.f.biserrataShan et Yuan)的干燥根，被收載于《中國藥典》2010年版[1]，已有300多年的栽培歷史。但時至今日，獨活種子仍多為農戶自己采收，質量參差不齊，沒有質量相關標準，市場十分混亂，影響了獨活種苗生產的規(guī)范性和科學性，與“用標準化保障中藥質量”的理念不符，同時還影響了獨活藥材的產量和質量，也成為獨活產業(yè)鏈發(fā)展的關鍵性障礙[2]?；诖爽F(xiàn)狀，筆者開展了獨活種子質量的分級研究，制定獨活種子質量標準。

1材料與方法

1.1試驗材料以湖北、四川、甘肅、陜西、寧夏等不同獨活產地征集的15份獨活種子為研究材料，種子收集地區(qū)情況如表1所示。

1.2獨活種子質量指標測定方法參照《農作物種子檢驗規(guī)程》[3]進行檢驗。

1.2.1凈度測定。采用“四分法”，從每個試驗樣品分離出一部分，其重量至少為20 g，在凈度分析臺上將試驗分離成干凈種子、其他植物種子及雜質3種成分。將分離后的各種成分分別稱重，計算凈種子占供試樣品重量的百分率。

1.2.2含水量測定。采用低溫烘干法。取試樣2份，每份4.5～5.0 g，將試樣放入預先烘干和稱重過的樣品盒內，再稱重(精確至0.001 g)，使烘箱通電預熱至110～115 ℃時，將樣品攤平放入烘箱內的上層，迅速關閉烘箱門，待箱溫回升至101～105 ℃時開始計時，烘干10 h后，取出放入干燥器內冷卻45 min再稱重，計算含水量。

表1　獨活種子來源情況

1.2.3千粒重測定。采用千粒法，從試驗樣品中隨機抽取2個重復，用手數(shù)1 000粒，各重復分別稱重，小數(shù)位數(shù)保留2位。2份重復的差數(shù)與平均數(shù)之間不應超過5%，若超過應再分析第3份重復，直至達到要求，取差距小的2份計算測定結果。

1.2.4發(fā)芽率測定。依據(jù)王康才等[4]的研究結果，設定獨活種子發(fā)芽條件，即清水浸泡24 h，選擇濾紙作為發(fā)芽床，每個發(fā)芽床植入100粒獨活種子，3次重復，放入20 ℃恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。每日檢查，保持發(fā)芽床濕潤，以發(fā)芽開始后連續(xù)5 d沒有新種子發(fā)芽為發(fā)芽結束，計算發(fā)芽率。

2結果與分析

2.1獨活種子質量指標測定結果對15份獨活種子進行測定，結果發(fā)現(xiàn)(表2)，獨活種子凈度為89.2%～97.7%，含水量為10.7%～12.5%，千粒重為2.71～4.90 g，發(fā)芽率為11.7%～41.3%，可見種子各項指標差異明顯。

表2　獨活種子樣品檢驗指標測定結果

2.2獨活種子質量指標聚類分析

2.2.1檢測指標相關性分析。對獨活種子的4項檢測指標進行相關性分析，以確定分級指標的優(yōu)先級別。對2項指標進行相關分析(表3)發(fā)現(xiàn)，凈度與千粒重、含水量與千粒重均顯著相關，發(fā)芽率與其他3項指標間相關關系不顯著。因此可以發(fā)芽率、千粒重作為主要參考指標。

表3　獨活種子4項分級指標相關性分析結果

注：*、**分別表示在0.05、0.01水平(雙側)上顯著相關。

2.2.2系統(tǒng)聚類分析。采用SPSS 21軟件進行系統(tǒng)聚類分析。從圖1可以看出，可將種子分為4類，第11號樣品為一類，第10號樣品為一類，第4、5、7、9、13、14、15號樣品為一類，第1、2、3、6、8、12號樣品為一類。

2.2.3K-聚類分析。采用SPSS 21軟件進行K聚類分析，將15份種子分為4類：第10號樣品為第1類，第1、2、3、6、8、12號樣品為第2類，第4、5、7、9、13、14、15號樣品為第3類，第11號樣品為第4類；各類的最終聚類中心如表4所示。

表4　獨活種子樣品檢驗指標的最終聚類中心

根據(jù)類間距離(表5)分析，第2類和第3類中心距離最小，第1類和第2類中心距離次之，第2類與第4類中心距離更大，第1類與第4類中心距離最大。因11號樣品的發(fā)芽率極低，可以將11號樣品劃為不合格種子；因第1類種子發(fā)芽率極高，但樣品數(shù)僅有1個，所以將其并入第2類中；因第4類發(fā)芽率極低，可劃為不合格種子。綜合考慮，可以將獨活種子分為3級：一級為優(yōu)質種子(包含第1、2類)、二級為合格種子(第3類)、三級為不合格種子(第4類)。

2.2.4獨活種子質量等級內各質量指標總體參數(shù)置信區(qū)間估計。采用SPSS 21軟件進行獨活種子質量等級內各質量指標總體參數(shù)置信區(qū)間估計，分析了一級、二級種子各質量指標的置信區(qū)間。由表6可見，一級種子凈度為90.6%～97.6%，千粒重為3.55～4.65 g，含水量為11.7%～12.4%，發(fā)芽率為28.7%～32.3%；二級種子凈度為90.4%～92.4%，千粒重為3.10～4.13 g，含水量為11.3%～12.4%，發(fā)芽率為22.4%～26.3%。

表6　獨活種子質量等級內各質量指標總體參數(shù)置信區(qū)間

2.3獨活種子質量分級標準根據(jù)最終聚類中心值(表4)和各等級種子質量指標參數(shù)置信區(qū)間(表6)，結合獨活種子的生產實際，劃分出獨活種子質量分級標準。從表7可看出，一級種子發(fā)芽率≥29%、千粒重≥3.80 g、凈度≥93%、含水量≤12.5%；二級種子發(fā)芽率為22%～29%，千粒重為3.10～3.80 g，凈度為90%～93%，含水量≤12.5%；不合格種子發(fā)芽率≤22%、千粒重≤3.10 g、凈度≤90%、含水量≤12.5%。

表7　獨活種子質量分級標準

3討論

開展中藥材種子質量分級研究，制定中藥材種子質量分

級標準，是推進中藥材規(guī)范化栽培的一項重要任務[5]。獨活種子目前還沒有國家、地方質量標準，該研究選擇湖北、四川、甘肅、陜西等產區(qū)的獨活種子，參照《農作物種子檢驗規(guī)程》及有關種子分級方法，檢測了凈度、含水量、千粒重、發(fā)芽率等4個指標，初步確定了獨活種子質量分級標準，對促進獨活規(guī)范化種植具有重大推動作用。

不同產地的獨活種子質量差異較大，特別是千粒重和發(fā)芽率相差懸殊。獨活種子千粒重為2.71～4.90 g，絕大部分為3.10～4.40 g；獨活發(fā)芽率為11.7%～41.3%，絕大部分為22%～33%。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中國藥典：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010:246.

[2] 郭曉亮，林先明，郭杰，等.獨活研究現(xiàn)狀與展望[J].安徽農業(yè)科學，2014，42(83)：11673-11674.

[3] 全國農作物種子標準化技術委員會.農作物種子檢驗規(guī)程：GB/T3543-1995[S].北京：中國標準出版社，1996.

[4] 王康才，陳暄，唐曉清，等.獨活種子發(fā)芽特性研究[J].中草藥，2005，36(4):595-597.

[5] 任德全，周榮漢.中藥材生產質量管理規(guī)范(GAP)實施指南[M].北京:中國農業(yè)出版社，2003:26.

收稿日期2015-10-23

作者簡介林先明(1965-)，男，湖北武漢人，正高職農藝師，碩士，從事藥用植物栽培與育種研究。

基金項目工業(yè)和信息化部2014年度中藥材生產基地建設扶持項目“道地藥材巴東獨活規(guī)范化生產基地建設”。

中圖分類號S 567

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2015)33-184-02