劉公言 孫超然 尚隨民 吳振宇 王春陽 李福昌

(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，泰安 271018)

維生素B6又稱吡哆素，是一種水溶性維生素，包括吡哆醇(PN)、吡哆醛(PL)、吡哆胺(PM)以及相應(yīng)磷酸酯的形式，在動物體內(nèi)主要以磷酸吡哆醛(PLP)形式參與多種營養(yǎng)物質(zhì)代謝反應(yīng)，尤其是蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝。動物缺乏維生素B6會造成機體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝異常，使機體對蛋白質(zhì)的吸收和利用發(fā)生障礙，嚴(yán)重干擾體內(nèi)氨基酸的正常代謝，使動物出現(xiàn)厭食、生長遲緩、神經(jīng)失調(diào)以及貧血等癥狀。Martinez等［1］用同位素標(biāo)記法探討維生素B6對蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)代謝的影響時發(fā)現(xiàn)，攝入維生素B6不足會導(dǎo)致白鼠肝臟中S-腺苷甲硫氨酸含量減少，絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶活性降低，機體蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)速度降低。植物和許多微生物能夠利用小分子代謝物從頭合成PLP以供機體需要，然而哺乳動物不能從頭合成PLP，需要通過吸收外源維生素B6來滿足機體生理需要。在現(xiàn)代規(guī)模化家兔生產(chǎn)方式下，由于飼糧中的營養(yǎng)水平提高以及加工過程中原料中維生素的破壞，再加上家兔體內(nèi)蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)率的提高，維持體內(nèi)PLP濃度的動態(tài)平衡在家兔生產(chǎn)中尤為重要。Easter等［2］發(fā)現(xiàn)，在妊娠青年母豬玉米-豆粕型飼糧中添加1 mg/kg維生素B6時，窩產(chǎn)仔數(shù)和斷奶仔豬數(shù)增加，提高維生素B6水平顯著影響斷奶仔豬的生長性能，可以改善斷奶仔豬的日增重和采食量。Weiss等［3］發(fā)現(xiàn)，種雞缺乏維生素 B6會立即出現(xiàn)食欲減退，接著孵化率下降，產(chǎn)蛋率下降。Chen等［4］指出，鮑魚飼糧中添加維生素B6可以提高增重。劉坤［5］在研究水溶性維生素對鯰魚生長的必要性時表明，維生素B6明顯地影響鯰魚的生長、存活率。在對蝦飼料中添加維生素B6，攝食的蛋白質(zhì)能有效地在體內(nèi)沉積［6］，當(dāng)大西洋鮭飼料中添加較高水平的PN時，體內(nèi)能夠合成更多的蛋白質(zhì)［7］。馮秀妮［8］指出，飼糧中添加維生素 B6能夠加速皺紋盤鮑氨基酸的代謝和生成，促進機體蛋白質(zhì)的合成。胡凱等［9］研究表明，維生素B6缺乏時幼建鯉肝胰臟消化酶活性顯著下降。朱偉［10］發(fā)現(xiàn)，在皺紋盤鮑幼鮑飼料中添加PN能顯著提高內(nèi)臟團和肌肉中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的活性。Jain等［11］在培養(yǎng)液中添加PM 和PL可提高鼠色素細(xì)胞抑制氧自由基產(chǎn)生的能力，能夠防止脂質(zhì)的過氧化。

目前，國內(nèi)外對維生素B6在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面的研究較多，但在獺兔上的研究基本處于空白。本課題組前期飼養(yǎng)試驗結(jié)果表明，飼糧添加維生素B6能夠促進生長獺兔生長，提高皮張質(zhì)量，改善兔肉品質(zhì)［12］。現(xiàn)在通過研究飼糧中添加不同水平維生素B6對3～5月齡生長獺兔氮平衡、氨基酸表觀消化率、消化酶活性、血清生化以及抗氧化指標(biāo)的影響，探討3～5月齡生長獺兔飼糧適宜的維生素B6添加水平，為我國獺兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供合理的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼糧

基礎(chǔ)飼糧參考 NRC(1977)［13］和 De Blas等［14］的生長兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制而成，其組成及營養(yǎng)水平見表1。以98%鹽酸吡哆醇(購自江西泰森藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號為140504)為維生素B6源，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加 0、5、10、20和 40 mg/kg的維生素B6，制成5種試驗飼糧，并用制粒機將飼糧壓制成直徑為4～6 mm的顆粒飼料，5種試驗飼糧維生素 B6實測水平分別為 4.51、9.66、14.64、24.32 和 44.81 mg/kg，在通風(fēng)干燥避光處儲存?zhèn)溆谩?/p>

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.2 試驗動物分組與飼養(yǎng)管理

選取平均體重為(1 682±40)g的3月齡健康狀況良好的獺兔200只(公母各占1/2)，按性別和體重分為5組，每組40個重復(fù)，每個重復(fù)1只試兔。試兔采用單籠飼養(yǎng)，試驗期間每天飼喂2次。采用常規(guī)飼養(yǎng)管理和免疫程序，自然采光和通風(fēng)，自由采食和飲水。飼養(yǎng)時間為2014年10月4日至2014年12月4日，預(yù)試期7 d，正試期54 d。

1.3 樣品采集與制備

飼養(yǎng)試驗結(jié)束前7天，每組隨機抽取8只試兔，轉(zhuǎn)移到經(jīng)消毒處理的代謝籠內(nèi)，同樣進行單籠飼養(yǎng)，并飼喂相應(yīng)的試驗飼糧。在代謝籠中經(jīng)3 d調(diào)整適應(yīng)后連續(xù)4 d收集每只試兔全天的糞樣和尿樣，同時記錄每只試兔每天的采食量、排糞量和排尿量。鮮糞稱重后，一部分加10%的硫酸固氮，-20℃保存，用于糞中氮含量測定。另一部分直接放在烘箱中65℃連續(xù)烘72 h后置于室溫回潮24 h，稱重即為糞樣的風(fēng)干重量，最后將4 d的風(fēng)干糞樣混合粉碎用于氨基酸含量測定。尿樣量取體積后，取一定比例放入250 m L塑料瓶中，同時加入5 m L濃硫酸固氮，最后將4 d尿樣混勻4℃保存，用于尿中氮含量檢測。

試驗結(jié)束當(dāng)天清晨空腹，每組隨機抽取8只試兔，心臟采血10m L，置于采血管中，室溫避光靜置15 m in后，3 000 r/m in離心10 m in，分離所得血清分裝于Eppendorf管中，置于-20℃下冷凍保存用于血清生化及抗氧化指標(biāo)測定。試兔采血后屠宰，采集胰腺用凍存管液氮保存，用于胰腺消化酶活性檢測。

1.4 測定指標(biāo)和方法

1.4.1 氮平衡指標(biāo)的測定

利用凱氏定氮原理對飼糧、糞樣和尿樣中氮含量進行測定，測定方法參考《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》［15］，各指標(biāo)計算公式如下:

可消化氮(digestible nitrogen，DN，g/d)=

食入氮(nitrogen intake，IN)-糞氮(fecal nitrogen，F(xiàn)N);沉積氮(nitrogen retention，RN，g/d)=IN-FN-

尿氮(urinary nitrogen，UN);

氮表觀消化率(nitrogen apparent digestibility，

NAD，%)=100×DN/IN;

氮利用率(nitrogen utilization rate，NUR，%)=

100×RN/IN;

氮生物學(xué)效價(nitrogen biological value，

NBV，%)=100×RN/DN。

1.4.2 氨基酸表觀消化率的測定

飼糧和糞樣中氨基酸利用酸水解成游離氨基酸，再經(jīng)離子交換色譜法分離并以茚三酮做柱后衍生，在L-8900 Basic氨基酸分析儀上測定含量，并根據(jù)以下公式計算某氨基酸表觀消化率。

某氨基酸表觀消化率(%)=100×

(食入該氨基酸總量-糞中該氨基酸總量)/

食入該氨基酸總量。

1.4.3 胰腺消化酶活性的測定

胰蛋白酶能催化水解底物精氨酸乙酯的酯鏈，使其在253 nm處吸光度值升高，根據(jù)吸光度的變化可以計算出酶活性;糜蛋白酶可以水解酪蛋白產(chǎn)生含酚的氨基酸，而酚試劑可被含酚的氨基酸還原成藍色物質(zhì)，通過比色可測定酶活性。胰腺胰蛋白酶和糜蛋白酶活性采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的胰蛋白酶測試盒和糜蛋白酶測試盒測定。

1.4.4 血清生化指標(biāo)的測定

血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量以及ALT和AST活性均采用日本和光純藥工業(yè)株式會社提供的試劑盒測定，按說明書操作，并在日立7020型全自動分析儀上進行測定。

1.4.5 血清抗氧化指標(biāo)的測定

血清總抗氧化能力(T-AOC)，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量采用南京建成生物工程研究所相應(yīng)試劑盒，在UV-2450型紫外可見分光光度計上測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SAS 9.1.3統(tǒng)計軟件中的GLM進行方差分析，用Duncan氏法進行多重比較，結(jié)果以平均值和均方根誤差(R-MSE)表示，P＜0.05和P＜0.01分別為差異顯著和極顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔氮平衡的影響

由表2可知，飼糧維生素B6添加水平極顯著影響IN(P=0.004 5)，隨著飼糧維生素B6添加水平的升高，IN先升高后降低，10和20 mg/kg組極顯著高于其他組(P＜0.01);飼糧維生素B6添加水平顯著影響 DN(P=0.034 4)和 NAD(P=0.043 6)，隨著飼糧維生素B6添加水平的升高，DN和NAD先升高后降低，并均在10 mg/kg組達到最大值，但與20 mg/kg組差異不顯著(P＞0.05);飼糧維生素 B6添加水平對 FN、UN、RN、NUR及NBV均無顯著影響(P＞0.05)。

表2 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔氮平衡的影響Table 2 Effects of dietary vitam in B6 supplemental level on nitrogen balance of 3 to 5-month old grow ing Rex rabbits(n=8)

2.2 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔氨基酸表觀消化率的影響

由表3可知，飼糧維生素B6添加水平對蛋氨酸的表觀消化率有極顯著影響(P=0.006 8)，其中20 mg/kg組極顯著高于0、5和10 mg/kg組(P＜0.01);飼糧維生素B6添加水平對半胱氨酸(P=0.011 3)、谷氨酸(P=0.022 6)和絲氨酸的表觀消化率(P=0.047 8)有顯著影響，隨著飼糧維生素B6添加水平的升高，半胱氨酸、谷氨酸和絲氨酸的表觀消化率先升高后降低，并均在20 mg/kg組達到最大值。飼糧維生素B6添加水平對除上述氨基酸外的大多數(shù)必需氨基酸和非必需氨基酸的表觀消化率均無顯著影響(P＞0.05)。

2.3 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔胰腺消化酶活性的影響

由表4可知，飼糧維生素B6添加水平顯著影響胰腺胰蛋白酶(P=0.035 4)和糜蛋白酶活性(P=0.043 2)，隨著飼糧維生素B6添加水平的升高，胰腺胰蛋白酶和糜蛋白酶活性均先升高后趨于穩(wěn)定，且均在20 mg/kg組達到最高值。

2.4 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知，飼糧維生素B6添加水平對血清TP含量有顯著影響(P=0.014 3)，隨著維生素B6添加水平的升高，TP含量先升高后趨于穩(wěn)定，在添加水平為20 mg/kg時達到最高;飼糧維生素B6添加水平顯著影響血清UN含量(P=0.035 8)，其中10、20和40 mg/kg組顯著低于0 mg/kg組(P＜0.05);隨著維生素B6添加水平的升高，血清ALB含量有先升高后降低的趨勢，但組間差異不顯著(P＞0.05);飼糧維生素B6添加水平對血清ALT、AST活性及TG、TCH、HDL和VDL含量均無顯著影響(P＞0.05)。

2.5 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，飼糧維生素B6添加水平極顯著影響血清 T-AOC(P=0.006 9)，顯著影響血清GSH-Px(P=0.044 2)和 T-SOD 活 性 (P=0.048 1)，隨著維生素B6添加水平的升高，T-AOC及GSH-Px、T-SOD活性均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，并在20 mg/kg組達到最高值。隨著維生素B6添加水平的升高，血清MDA含量有先降低后升高趨勢，在20 mg/kg組達到最低，但組間差異不顯 著(P＞0.05)。

表3 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔氨基酸表觀消化率的影響Table 3 Effects of dietary vitam in B6 supplemental level on am ino acid apparent digestibility of 3 to 5-month old grow ing Rex rabbits(n=8) %

表4 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔胰腺消化酶活性的影響Table 4 Effects of dietary vitam in B6 supplemental level on digestive enzyme activities in pancreas of 3 to 5-month old grow ing Rex rabbits(n=8) U/mg

3 討論

3.1 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔氮平衡的影響

動物采食飼糧后，飼糧中的含氮物質(zhì)經(jīng)過消化吸收，一部分隨糞便和尿液排出，另一部分被直接利用合成自機體蛋白質(zhì)。氮在動物體內(nèi)消化、吸收以及排出體外的過程即為氮代謝［16］。動物機體蛋白質(zhì)的代謝是機體一切生命活動的基礎(chǔ)，維生素B6以PLP形式參與蛋白質(zhì)的代謝反應(yīng)。徐志昌等［17］研究發(fā)現(xiàn)，中國對蝦的蛋白質(zhì)消化率達到最高時，飼料中維生素B6的含量為1.4 mg/kg。邢浩春［18］報道，飼料中添加45～60 mg/kg的維生素B6對史氏鱘幼魚魚體消化率和蛋白質(zhì)積累有顯著提高作用。王錦林［19］研究表明，飼料中添加維生素B6能顯著提高異育銀鯽的特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化效率和蛋白質(zhì)效率，并在13.3 mg/kg組達到最高。本試驗研究表明，飼糧維生素B6添加水平顯著或極顯著影響3～5月齡生長獺兔的IN、DN和NAD，在添加水平為10 mg/kg時達到最大，但對RN、NUR和NBV無顯著影響，其原因可能是由于飼糧維生素B6添加水平能夠影響生產(chǎn)性能［12］，而生產(chǎn)性能提高需要吸收大量蛋白質(zhì)所致。

表5 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary vitam in B6 supplemental level on serum biochem ical indices of 3 to 5-month old grow ing Rex rabbits(n=8)

表6 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 6 Effects of dietary vitam in B6 supplemental level on serum antioxidant indices of 3 to 5-month old grow ing Rex rabbits(n=8)

3.2 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔氨基酸表觀消化率的影響

維生素B6與動物機體氨基酸的代謝密切相關(guān)，因此被稱為“蛋白質(zhì)維生素”。維生素B6以PLP的形式參與氨基酸的轉(zhuǎn)氨、脫羧和脫硫等代謝過程，促進含硫氨基酸和酪氨酸的代謝，從而增加氨基酸的吸收率和吸收速度［20］。維生素B6缺乏會導(dǎo)致氨基酸代謝異常，家蠶體液中賴氨酸、脯氨酸、精氨酸、蛋氨酸和谷氨酸的分解代謝亢進含量減少，亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸等支鏈氨基酸的分解代謝受阻含量增加［21-22］。動物機體氨基酸代謝異常，進而影響蛋白質(zhì)合成。Merrill等［23］發(fā)現(xiàn)，維生素B6缺乏后賴氨酸氧化酶(PLP依賴酶)活性下降，影響膠原蛋白和彈性蛋白的形成。在本試驗中，升高飼糧維生素B6添加水平能夠提高部分氨基酸的表觀消化率，這說明維生素B6為動物體內(nèi)氨基酸代謝所必需，而蛋白質(zhì)合成原料為氨基酸，氨基酸表觀消化率提高可能是由于氨基酸代謝加強，PLP依賴酶活性升高，蛋白質(zhì)合成增加所致。

3.3 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔胰腺消化酶活性的影響

蛋白質(zhì)是生長發(fā)育的前提和基礎(chǔ)，而動物對飼糧中蛋白質(zhì)的利用包括消化、吸收、轉(zhuǎn)運、代謝和排出，此過程受到體內(nèi)酶、激素和基因的調(diào)控，其中消化酶在蛋白質(zhì)消化吸收過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。一般說來，動物機體蛋白質(zhì)消化酶活性越高，對蛋白質(zhì)的消化、吸收和利用的能力越強，動物生長發(fā)育的速度越快。許實榮等［24］報道，對蝦體內(nèi)類胰蛋白水解酶的活性隨飼料中維生素B6添加水平的升高而升高，其中維生素B6添加水平為0.6 mg/kg試驗組的肝胰淀粉酶活性最高，是對照組的1.7倍，是維生素B6添加水平為1.2 mg/kg試驗組的3.0倍。本試驗結(jié)果表明，3～5月齡生長獺兔飼糧維生素B6添加水平顯著影響胰腺胰蛋白酶和糜蛋白酶活性，其中添加水平為20 mg/kg的組胰腺胰蛋白酶和糜蛋白酶活性最高，表明該組飼糧蛋白質(zhì)的利用效率最高。

3.4 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔血清生化指標(biāo)的影響

血清成分的變化可反映健康動物的營養(yǎng)代謝情況，其中血清TP含量不僅能夠反映飼糧中蛋白質(zhì)的營養(yǎng)水平，而且是蛋白質(zhì)吸收狀態(tài)的重要標(biāo)志［25］。本試驗發(fā)現(xiàn)，3～5月齡生長獺兔飼糧維生素B6添加水平為20 mg/kg時能顯著提高血清TP的含量，這可能是由于維生素B6能夠提高飼糧蛋白質(zhì)的消化吸收所導(dǎo)致，DN和NAD的提高也證實了這一點。血清UN含量受飼糧蛋白質(zhì)以及氨基酸數(shù)量和質(zhì)量的影響，是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的最終產(chǎn)物。Malmolf［26］認(rèn)為血清 UN含量可以較準(zhǔn)確地反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸平衡情況，當(dāng)體內(nèi)氨基酸平衡良好時，血清UN含量下降。在本試驗中，飼糧維生素B6添加水平顯著影響3～5月齡生長獺兔血清UN的含量，維生素B6添加水平為20 mg/kg時血清UN含量最低，這可能是由于PLP在動物機體氨基酸代謝中發(fā)揮重大平衡作用所致。動物機體所有氨基酸轉(zhuǎn)氨酶的輔酶均是PLP［27］，轉(zhuǎn)氨酶在機體生長代謝中發(fā)揮著極其重要的作用，而在飼糧中添加維生素B6能夠提高血清中ALT和AST的活性。TC和TG是血液脂肪的組成部分，其含量的高低反映了脂類的吸收和代謝狀況。劉瑋等［28］報道，維生素B6能夠相應(yīng)增加團頭魴血清HDL和ALB含量，顯著降低血清TC和TG含量。何志交［29］研究發(fā)現(xiàn)，在凡納濱對蝦飼料中添加 76.8～181.0 mg/kg維生素 B6對血清TP含量及ALT和AST活性無顯著影響，但能顯著降低血清TC和TG含量。本試驗結(jié)果表明，3～5月齡生長獺兔飼糧中維生素B6添加水平對血清 TG、TC、HDL、VDL含量以及 ALT和AST活性均無顯著影響，與上述研究結(jié)果相似但也存在一定差異，有待進一步研究。

3.5 飼糧維生素B6添加水平對3～5月齡生長獺兔血清抗氧化指標(biāo)的影響

抗氧化自由基簡稱抗氧化，T-AOC、GSH-Px、T-SOD是抗氧化體系中的重要組成成分，其活性與機體清除自由基的能力成正比，而脂質(zhì)過氧化反應(yīng)鏈?zhǔn)浇K止階段產(chǎn)生MDA，其含量可以間接反映機體組織細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化程度和自由基的產(chǎn)生情況。T-AOC是由酶促和非酶促抗氧化體系組成，它的大小能夠反映機體自由基代謝的狀態(tài)，對機體抗氧化性能的綜合評判具有重要意義［30］。動物體內(nèi)廣泛存在一種能催化過氧化氫分解的酶——GSH-Px，它能夠阻止機體過氧化物水解產(chǎn)生有害物質(zhì)MDA。趙會軍等［31］發(fā)現(xiàn)，在大鼠實驗性肝癌形成早期，維生素B6可提高血清中GSHPx活性，降低MDA含量。谷胱甘肽(GSH)是機體最重要的內(nèi)源性抗氧化劑，維生素B6作為半胱氨酸合成的輔助因子，能影響半胱氨酸的生物合成，而半胱氨酸恰是GSH生物合成的限制性底物［32］。蔭士安等［33］用缺乏維生素 B6的飼糧喂養(yǎng)大鼠3周，再補充維生素B6后發(fā)現(xiàn)補充維生素B6試驗組的心肌和骨骼肌中GSH含量均顯著高于未補充維生素B6的對照組。本試驗證實，飼糧中添加適宜水平的維生素B6可顯著提高3～5月齡生長獺兔血清T-AOC及GSH-Px、T-SOD活性，有降低MDA含量的趨勢，與上述研究結(jié)果相似。

4 結(jié)論

①飼糧維生素B6添加水平為10 mg/kg時，3～5月齡生長獺兔氮的表觀消化率達到最高。

②飼糧維生素B6添加水平為20 mg/kg時，3～5月齡生長獺兔部分氨基酸的表觀消化率最大，蛋白質(zhì)消化酶活性最高。

③飼糧維生素B6添加水平為20 mg/kg時，3～5月齡生長獺兔血清TP含量最高，UN含量最低，T-AOC及GSH-Px、T-SOD活性最高，MDA含量最低。

④綜合本試驗測定指標(biāo)，3～5月齡生長獺兔飼糧適宜的維生素B6添加水平為10～20 mg/kg。

［1］ MARTINEZ M，CUSKELLY G J，W ILLIAMSON J，et al.Vitam in B6deficiency in rats reduces hepatic serine hydroxymethyltransferase and cystathionineβ-synthase activities and rates of in vivo protein turn over，homocysteine remethylation and transsulfuration［J］.The Journal of Nutrition，2000，130(5):1115-1123.

［2］ EASTER R A，ANDERSON PA，M ICHEL E J，et al.Response of gestating gilts and starter，grower and finisher sw ine to biotin，pyridoxine，folacin and thiam ine additions to a corn soybean meal diets［J］.Nutrition Reproduction Interferon，1983，28:945-953.

［3］ WEISS FG，SCOTT M L.Influence of vitam in B6upon reproduction and upon plasma and egg cholesterol in chickens［J］.The Journal of Nutrition，1979，109(6):1010-1017.

［4］ CHEN H，MAIK S，ZHANGW B，etal.Effects of dietary pyridoxine on immune responses in abalone，Haliotis discus hannai Ino［J］.Fish ＆ Shellfish Immunology，2005，19(3):241-252.

［5］ 劉坤.水溶性維生素對鯰魚生長的必要性［J］.農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2008，28(2):66-67.

［6］ GIRI IN A，TESHIMA S I，KANAZAWA A，et al.Effects of dietary pyridoxine and protein levels on grow th，vitam in B6content，and free am ino acid profile of juvenile Penaeus japonicus［J］.Aquaculture，1997，157(3/4):263-275.

［7］ ALBEKTSEN S，WAABGO R，SANDNES K.Tissue vitam in B6concentration and aspartate am inotransferase(AspT)activity in Atlantic salmon(Salmo salar)fed by graded dietary levels of vitam in B6［J］.Fiskeri Direktoratets Skrifter:Serie Ern?ring，1993，6:21-34.

［8］ 馮秀妮.維生素C和B6對皺紋盤鮑(Haliotis discus hannai Ino)代謝反應(yīng)和貝殼生物礦化影響的研究［D］.碩士學(xué)位論文.青島:中國海洋大學(xué)，2005:20-45.

［9］ 胡凱，何偉，劉揚，等.幼建鯉維生素B6缺乏的病理組織學(xué)觀察及消化和免疫指標(biāo)變化［J］.中國獸醫(yī)科學(xué)，2008，38(12):1080-1085.

［10］ 朱偉.皺紋盤鮑(Haliotis discus hannai)B族維生素營養(yǎng)生理及營養(yǎng)需求的研究［D］.博士學(xué)位論文.青島:青島海洋大學(xué)，2001:117-138.

［11］ JAIN SK，LIM G.Pyridoxine and pyridoxam ine inhibits superoxide radicals and prevents lipid peroxidation，protein glycosylation，and(Na++K+)-ATPase activity reduction on in high glucose-treated human erythrocytes［J］.Free Radical Biology ＆ Medicine，2001，30(3):232-237.

［12］ 劉公言，趙楠，朱巖麗，等.飼糧維生素B6添加水平對生長獺兔生長性能及維生素B6代謝的影響［J］.動物營養(yǎng)學(xué)報，2015，27(7):2292-2299.

［13］ NRC.Nutrient requirements of rabbits［S］.2nd ed.Washington，D.C.:National Academy Press，1977.

［14］ DE BLAS C，W ISEMAN J.The nutrition of the rabbit［M］.New York:CABIPublishing，1998:297-308.

［15］ 張麗英.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)［M］.2版.北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2002:49-53.

［16］ AHMED B M，ASHOUR A M.Protein quality and am ino acid requirementof Baladi rabbits［J］.World Review of Animal Production，1984，55:58-60.

［17］ 徐志昌，劉鐵斌，李愛杰.中國對蝦對維生素B2、B5、B6營養(yǎng)需要的研究［J］.水產(chǎn)學(xué)報，1995，19(2):97-104.

［18］ 邢浩春.維生素B6對史氏鱘幼魚攝食生長及能量收支的影響［D］.碩士學(xué)位論文.石家莊:河北師范大學(xué)，2005:27-35.

［19］ 王錦林.異育銀鯽對維生素B2、維生素B6和煙酸的需求量的研究［D］.碩士學(xué)位論文.武漢:中國科學(xué)院研究生院，2007:28-39.

［20］ ALBREKTSEN S，HAGVE T A，LIE ?.The effect of dietary vitam in B6on tissue fat contents and lipid composition in livers and gills of A tlantic salmon(Salmo salar)［J］.Com parative Biochem istry and Physiology Part A:Physiology ，1994，109(2):403-411.

［21］ HORIE Y，WATANABE K.Effects of dietary pyridoxine on larval grow th，free am ino acid pattern in haemolymph and uric acid excretion in the silkworm，Bombyx mori［J］.Insect Biochem istry，1983，13(2):205-212.

［22］ 張劍韻，黃龍全.家蠶體內(nèi)因缺乏維生素B6而引起的若干代謝變動［J］.昆蟲學(xué)報，2003，46(4):436-440.

［23］ MERRILL A H，BURNHAM F S.Vitam in B6［C］//BROWN M L.Present know ledge in nutrition.Washington，D.C.:International Life Sciences Institute.Nutrition Foundation Inc，1990:155-162.

［24］ 許實榮，孫鳳，婁康后.中國對蝦營養(yǎng)研究——B族維生素(B1、B6)對對蝦蛋白酶和淀粉酶活力的影響［J］.海洋科學(xué)，1987(4):34-37.

［25］ 張巧娥，楊庫，張成蓮，等.有機鉻在反芻動物營養(yǎng)中的應(yīng)用［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2003(7):54-55.

［26］ MALMOLF K.Am ino acid in farm animal nutrition metabolism，partition and consequences of imbalance［J］.Swedish Journal of Agricultural Research，1988，18(4):191-193.

［27］ MCDOWELL L R.Vitam ins in animal nutrition:comparative aspects to human nutrition［M］.San Diego:Academ ic Press，Inc.，1989:236-255.

［28］ 劉瑋，戴年華，任本根.維生素B6對團頭鯨血清生化成分的影響［J］.江西科學(xué)，1997，15(2):96-100.

［29］ 何志交.凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)對維生素B1和維生素B6的需要量的研究［D］.碩士學(xué)位論文.廣州:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009:31-60.

［30］ 趙吉偉，張穎，盧彤巖，等.不同硒源對虹鱒生長性能及抗氧化能力的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)雜志，2005，18(2):28-34.

［31］ 趙會軍，張乃哲，張敬一，等.維生素B6對實驗室肝癌大鼠脂質(zhì)過氧化的影響［J］.腫瘤研究與臨床，2000，12(1):11-13.

［32］ GRIMBLE R F.Mdoification of inflammatory aspects of immune function by nutrients［J］.Nutrition Research，1998，18(7):1297-1317.

［33］ 蔭士安，靳雅笙，山口賢次.維生素B6對硒的生物利用率影響的研究:Ⅴ.大鼠硒利用率與維生素B6劑量的依賴關(guān)系［J］.衛(wèi)生研究，1996，25(6):371-374.