王娜 劉曉龍

止咳清咽緩釋顆粒提取工藝研究

王娜 劉曉龍

目的優(yōu)選止咳清咽緩釋顆粒最佳提取工藝。方法以木犀草素的提取率為評價指標(biāo),以提取時間﹑液料比﹑乙醇濃度為考察因素, 采用響應(yīng)面法優(yōu)選提取工藝。結(jié)果最佳提取工藝條件為提取時間為1.1 h, 液料比為8, 乙醇濃度為89%。結(jié)論所優(yōu)選工藝合理﹑可行, 可用于止咳清咽緩釋顆粒的提取。

止咳清咽緩釋顆粒；響應(yīng)面法；提取工藝；木犀草素

止咳清咽緩釋顆粒系是本院國醫(yī)堂在《醫(yī)學(xué)心語》中 “止咳散”的基礎(chǔ)上［1-5］, 根據(jù)中醫(yī)辨證施治原則, 加入羌活﹑獨(dú)活﹑柴胡﹑前胡﹑茯苓﹑枳殼﹑川芎﹑黨參等, 用于治療外感風(fēng)寒癥, 具有散寒祛風(fēng)除濕﹑益氣解表﹑止咳之功效。為了提高產(chǎn)品質(zhì)量, 穩(wěn)定制備工藝, 需要對提取工藝進(jìn)行合理優(yōu)化［6］, 根據(jù)方中藥味所含有效成分及其藥性, 實(shí)驗(yàn)以桔梗中木犀草素的提取率為指標(biāo), 采用響應(yīng)面法優(yōu)選止咳清咽緩釋顆粒的提取工藝, 為后續(xù)的劑型開發(fā)和工業(yè)化生產(chǎn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 試藥 止咳清咽緩釋顆粒的處方藥材(其中桔梗中木犀草素含量為240 μg/g)﹑木犀草素對照品。

1.2 儀器 色譜純試劑Waters液相色譜儀﹑超聲波提取器﹑萬分之一電子天平。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 木犀草素標(biāo)準(zhǔn)曲線 課題研究中, 木犀草素對照品為5.6 mg/ml, 標(biāo)準(zhǔn)線性方程為A=7884.1C-5140.3, R=0.9996,線性范圍為11.20～67.20 μg/ml。

1.2.2 色譜條件 色譜柱：AlltimaC18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流動相：乙腈-0.5%磷酸(35：65)；柱溫340 nm；流速1.0 ml/min；檢測波長340 nm。

1.2.3 提取方法 以處方量的藥材提取, 選擇提取時間﹑液料比﹑乙醇濃度作為考察因素, 按照表2安排試驗(yàn)。以生產(chǎn)中的設(shè)備為基礎(chǔ), 提取2次?？疾煲蛩氐膮?shù)范圍見表1。

表1 考察因素的參數(shù)范圍

1.2.4 供試品制備 取提取液20 ml置容量瓶中, 加入甲醇,精密定容至50 ml。高速離心(4000 r/min)30 min, 取上清液5 ml, 甲醇定容至10 ml, 作為供試品, 冷藏﹑備用。

1.2.5 提取率 將1.2.4項(xiàng)中供試品中木犀草素的含量, 與藥材中木犀草素的總含量比較, 進(jìn)而計算木犀草素的提取率。

C：供試品中木犀草素濃度；V：提取液的體積；M：藥材中木犀草素的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果與分析 采用響應(yīng)面D-optimal設(shè)計方

法, 根據(jù)3個因素的參數(shù)范圍進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計, 設(shè)計方案及結(jié)果。見表2, 圖1。

表2 止咳清咽緩釋顆粒提取率

圖1 止咳清咽緩釋顆粒提取率3D圖

利用Design-Expert8軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸, 得到響應(yīng)回歸方程為：

式中, 方程系數(shù)可知影響因素為X2＞X1＞X3, 且均為正相關(guān), 其中X1和X2與X3均存在較強(qiáng)的交互作用, 呈正相關(guān)性,而且交互作用的影響度要大于單個因素。R2表明模型對提取率的實(shí)際值與預(yù)測值有很好的擬合度, 可以對提取工藝參數(shù)進(jìn)行較好的分析和預(yù)測。利用軟件分析所得最優(yōu)工藝參數(shù)為：提取時間為1.1 h, 液料比為8, 乙醇濃度為89%。

2.2 最優(yōu)工藝驗(yàn)證 依據(jù)求解所得工藝參數(shù), 進(jìn)行3次平行試驗(yàn)驗(yàn)證, 計算RSD值。見表3。

表3 3次平行試驗(yàn)提取率(%)

結(jié)果表明, 響應(yīng)面分析法優(yōu)化得到的工藝參數(shù)可信度高,具有較強(qiáng)重現(xiàn)性。

3 小結(jié)

響應(yīng)面法在提取工藝中, 能較好的預(yù)測試驗(yàn)結(jié)果, 較正交試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)更加突出, 試驗(yàn)次數(shù)少﹑周期短, 能在整個區(qū)域上查找明確工藝參數(shù), 求得高精度的表達(dá)式等［7-12］。通過試驗(yàn)所得工藝參數(shù)較之前正交試驗(yàn), 有效成分提取率提高, 在工藝條件上更加精確, 具有很強(qiáng)的實(shí)用價值。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.22.216

2015-07-20］

河南省中醫(yī)管理局立項(xiàng)課題(項(xiàng)目編號：2013ZY02084)

450000 鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院