魏志江 賈圓圓 張維

ICAM-1、CD82的表達(dá)差異對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移影響的臨床研究

魏志江 賈圓圓 張維

目的對細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)、CD82的表達(dá)差異對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響進(jìn)行相關(guān)研究。方法行外科手術(shù)治療結(jié)直腸癌患者68例, 以自身癌旁正常黏膜組織為對照組, 以自身癌組織黏膜組織為研究組, 對比觀察CD82和ICAM-1蛋白在癌組織的表達(dá)情況；對比分析兩組CD82及ICAM-1蛋白的表達(dá)差異對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響及兩組的相互關(guān)系。結(jié)果68例結(jié)直腸癌患者的癌組織中ICAM-1表達(dá)明顯高于癌旁組織(P＜0.05), 但在正常大腸黏膜組織中無表達(dá)；CD82在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)則明顯低于癌旁組織(P＜0.05)。同時, ICAM-1、CD82的表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床Dukes分期及轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有密切關(guān)系(P＜0.05)。結(jié)論可將ICAM-1的表達(dá)作為腫瘤發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移的重要判斷因子, ICAM-1和CD82聯(lián)合檢測對有效判定腫瘤的惡性程度以及轉(zhuǎn)移情況等均具有臨床指導(dǎo)作用。

細(xì)胞間粘附分子-1；CD82；結(jié)直腸癌；肝轉(zhuǎn)移

結(jié)直腸癌屬臨床常見、多發(fā)惡性腫瘤之一, 近年來, 該疾病發(fā)病率、死亡率均呈大幅攀升態(tài)勢, 研究表明, 細(xì)胞粘附因子可能參與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移過程。為探討ICAM-1、CD82的表達(dá)差異對結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響作用, 本研究對大腸癌組織標(biāo)本中 ICAM-1、CD82的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)研究, 現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2009年6月～2013年7月住院行外科手術(shù)治療的結(jié)直腸癌患者68例, 且均經(jīng)病理學(xué)診斷證實。其中男30例, 女38例；年齡24～79歲, 平均年齡(59.2±3.7)歲。腫瘤部位：36例結(jié)腸,32例直腸；浸潤深度：40例浸潤未達(dá)漿膜,28例浸潤達(dá)漿膜層(外)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：32例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,36例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；TNM分期：10例Ⅰ期,20例Ⅱ期,20例Ⅲ期,18例Ⅳ期。68例患者均為肝轉(zhuǎn)移；且病理類型均為腺癌；分化程度：18例高分化,38例中分化,12例低分化。將采集結(jié)直腸癌患者腫瘤原發(fā)灶癌組織為研究組；以自身癌旁正常黏膜組織作為對照組。

1.2 方法 本文采用鏈霉菌素-生物素免疫組化技術(shù)。其中, ICAM-1單克隆抗體及SP免疫組化試劑均為福州邁新生物技術(shù)工程公司出品。操作方法：①常規(guī)石蠟切片、脫蠟。②用EDTA稀釋后置于微波爐中予以抗原修復(fù)。③冷卻后用PBS沖洗3次,3 min/次。每張切片加入50 μl過氧化酶以有效阻斷內(nèi)源性過氧化物酶；并置于室溫孵育10 min。④用PBS沖洗3次(3 min/次)。每張切片再加入50 μl的1：50鼠抗人ICAM-1作為一抗, 并置于4℃冷藏箱。第2天再用 PBS沖洗3次(3 min/次)。每張切片加50 μl生物素標(biāo)記作為第二抗體, 并置于室溫孵育10 min；PBS沖洗3次(3 min/次)。⑤每張切片加50 μl鏈酶素-過氧化酶, 置于室溫孵育3 min。每張切片加100 μl新鮮DAB溶液, 并于顯微鏡下觀察8 min左右。⑥自來水沖洗, 中性樹膠封固。實驗時, 用 PBS代替一抗作陰性對照, 將已知陽性切片作為對照片。

1.3 染色結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) CD82蛋白主要定位于細(xì)胞膜, 棕色染為免疫組化陽性。ICAM-1染色結(jié)果的判定方法與CD82相同。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

68例結(jié)直腸癌組織中ICAM-1表達(dá)明顯高于癌旁組織(P＜0.05), 但在正常大腸黏膜組織中無表達(dá)；CD82在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)則明顯高于癌旁組織(P＜0.05)。同時, ICAM-1、CD82的表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床Dukes分期及轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)有密切關(guān)系(P＜0.05)。見表1～4。

表1 結(jié)直腸癌患者的ICAM-1蛋白表達(dá)(n, %)

表2 肝轉(zhuǎn)移與無肝轉(zhuǎn)移患者的ICAM-1蛋白表達(dá)(n, %)

表3 結(jié)直腸癌患者的CD82蛋白表達(dá)(n, %)

表4 肝轉(zhuǎn)移與無肝轉(zhuǎn)移患者的CD82蛋白表達(dá)(n, %)

3 討論

結(jié)直腸癌屬臨床常見、多發(fā)惡性腫瘤之一, 近年來, 該疾病發(fā)病率、死亡率均呈大幅攀升態(tài)勢；受診療技術(shù)限制以及人們對結(jié)直腸癌的重視程度不足, 導(dǎo)致結(jié)直腸癌患者就診時多為中晚期, 這也進(jìn)一步造成臨床治療效果不理想, 預(yù)后相對較差[1]。隨著對結(jié)直腸癌的不斷深入研究發(fā)現(xiàn), 細(xì)胞粘附因子可能參與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移過程。ICAM-1是目前研究較多的粘附分子, 當(dāng)癌細(xì)胞到達(dá)轉(zhuǎn)移部位時, 則會出現(xiàn)相應(yīng)的ICAM-1表達(dá)；同時, 也會隨之成為轉(zhuǎn)移灶粘附、生長的立足點。研究表明[2], KAI1基因及其表達(dá)產(chǎn)物CD82對大腸癌轉(zhuǎn)移的預(yù)測、預(yù)后判斷等均具有重要價值。

本文結(jié)果提示,68例結(jié)直腸癌組織中ICAM-1表達(dá)明顯高于癌旁組織(P＜0.05), 但在正常大腸黏膜組織中無表達(dá)；CD82在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)則明顯高于癌旁組織(P＜0.05)。這也進(jìn)一步說明CD82、ICAM-1蛋白在結(jié)直腸癌進(jìn)展以及轉(zhuǎn)移過程中均發(fā)揮了極為重要的作用, ICAM-1表達(dá)越高CD82表達(dá)越低時, 患者發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的幾率也相對越大, 臨床預(yù)后也隨之越差[3]。

通過對結(jié)直腸癌患者CD82、ICAM-1表達(dá)檢測結(jié)果, 并客觀結(jié)合結(jié)直腸癌患者其他臨床病理特征, 則可以有助于臨床及早發(fā)現(xiàn)、判斷結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生情況。臨床及時采取有效的、科學(xué)的治療, 可最大程度地降低結(jié)直腸癌患者的復(fù)發(fā)以及肝轉(zhuǎn)移情況的發(fā)生；進(jìn)而全面提升結(jié)直腸癌患者的生存率。

綜上所述, ICAM-1的表達(dá)可作為腫瘤發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移的重要判斷因子, ICAM-1和CD82聯(lián)合檢測對有效判定腫瘤的惡性程度以及轉(zhuǎn)移情況等均具有臨床指導(dǎo)作用。

[1]李建國, 宋海彬, 常得豐. 大腸癌組織中CD82和Ki-67表達(dá)相關(guān)性研究.中國傷殘醫(yī)學(xué),2013,21(2):209-210.

[2]王平, 毛新, 李永武, 等. LYVE-1和CD82在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及與腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究.昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009,30(5):15-19.

[3]李建國, 馬國章, 楊志偉, 等. CD82和Ki-67在大腸癌組織中的表達(dá)和相關(guān)性研究.中國誤診學(xué)雜志,2004,4(1):22-24.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.08.019

2015-01-05]

061000 河北省滄州市中心醫(yī)院