劉麗娜

乳腺癌VEGF-C和VEGFR-3表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系

劉麗娜

目的分析乳腺癌血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)、血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR-3)表達和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)聯(lián)性。方法手術(shù)切除乳腺纖維瘤標本23例作為對照組, 選取同期切除乳腺浸潤性導管癌標本48例作為觀察組, 通過免疫組化法對兩組標本VEGF-C及VEGFR-3進行檢測。結(jié)果觀察組VEGF-C表達陽性率、VEGFR-3表達陽性率均明顯比對照組高(P＜0.05)。經(jīng)統(tǒng)計, 發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本的VEGFR-3表達陽性率及VEGF-C陽性率均顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本(P＜0.05)。結(jié)論與良性病變相比, 乳腺癌患者VEGF-C及VEGFR-3表達顯著增加, 且發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本VEGFR-3表達陽性率、VEGF-C陽性率明顯高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本, 說明VEGF-C及VEGFR-3表達對乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯的促進作用。

乳腺癌；血管內(nèi)皮生長因子C；血管內(nèi)皮生長因子受體3；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

惡性腫瘤最重要生物學特性即為轉(zhuǎn)移, 不同器官轉(zhuǎn)移是大多數(shù)惡性腫瘤患者死亡的重要原因[1], 其中最為常見的轉(zhuǎn)移方式為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌細胞生長與增殖的重要載體, 有研究顯示VEGF-C與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定聯(lián)系[2], 然而VEGF-C促進淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機制還不清楚, 且目前不同研究人員在VEGFR-3與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性方面仍有一定爭議。本次研究通過對乳腺浸潤性導管癌標本與乳腺纖維瘤標本中VEGF-C及VEGFR-3表達情況進行分析,探討VEGFR-3及VEGF-C表達和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的關(guān)系, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2012年6月～2014年8月手術(shù)切除乳腺纖維瘤標本23例作為對照組, 選取同期切除乳腺浸潤性導管癌標本48例作為觀察組, 所有標本均來源于女性患者, 年齡39～58歲, 平均年齡(46.3±3.5)歲；觀察組腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例, 無腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例；腫塊長徑為5 cm以上5例,2～5 cm28例,2 cm以下15例；根據(jù)國際病理學分級標準, Ⅰ級16例, Ⅱ級17例, Ⅲ級15例。兩組標本取樣后檢驗時間、取樣量等方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 方法 對所有標本采用免疫組化染色SP法進行檢測,采用美國Santa Cruz公司生產(chǎn)的兔抗人VEGF-C及VEGFR -3多克隆抗體與DAB試劑盒與免疫組化染色SP試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)進行檢測：將標本利用石蠟進行包埋后將其切片, 每片厚度為4 μm, 以試劑盒說明書為依據(jù)進行相應(yīng)操作, 行微波抗原修復, 其中一抗工作濃度為1：100。陰性對照用PBS緩沖液而非一抗, 設(shè)置已知陽性的結(jié)腸癌組織切片作陽性對照。

1.3 診斷標準 按照Shimizu法擬定診斷標準[3]：在顯微鏡下觀察為棕黃色為陽性, 按照著色強度與范圍加以處理,陽性細胞在視野內(nèi)全部細胞中占據(jù)的比例為著色范圍。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組標本中VEGF-C表達情況分析 VEGF-C主要在乳腺癌細胞胞質(zhì)內(nèi)表達且為棕黃色或淡黃色顆粒, 細胞核、細胞膜中無染色。觀察組48例乳腺癌標本中35例(72.9%) VEGF-C表達為陽性, 而對照組23例標本中3例(13.0%) VEGF-C表達為陽性, 觀察組VEGF-C表達陽性率顯著高于對照組(P＜0.05)。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本VEGF-C陽性率為54.5%, 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本VEGF-C陽性率為88.5%, 經(jīng)對比可知有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本VEGF-C陽性率明顯比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本高(P＜0.05)。見表1。

2.2 兩組標本中VEGFR-3表達情況分析 經(jīng)檢驗VEGFR-3在乳腺癌癌巢周圍間質(zhì)細胞內(nèi)表達且為大片棕黃色或淡黃色, 細胞質(zhì)中無染色。觀察組48例乳腺癌標本中33例(68.8%)VEGFR-3表達為陽性, 對照組23例標本中2例(8.7%) VEGFR-3表達為陽性, 觀察組VEGFR-3表達陽性率顯著高于對照組(P＜0.05)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本VEGFR-3陽性率顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本(P＜0.05)。見表1。

表1 48例乳腺癌標本淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與VEGF-C、VEGFR-3表達情況分析[n(%)]

3 討論

在過去很長一段時間中, 人們更關(guān)注于血管形成對實體腫瘤形成及進展的重要推動作用, 忽視了腫瘤進展中淋巴管形成的重要意義。近年來有研究顯示, 淋巴管因自身結(jié)構(gòu)及功能的相應(yīng)特征可參與到腫瘤生長維持之中, 同時也是諸多惡性腫瘤細胞擴散的重要方法, 特別是在具有豐富淋巴管的器官中, 這一現(xiàn)象更為明顯[4]。在這一背景下, VEGF-C與VEGFR-3逐漸成為了研究熱點。

VEGF-C屬于血管內(nèi)皮生長因子重要成員, 為人類首個發(fā)現(xiàn)的促淋巴管生成因子。而VEGFR-3是VEGFR家族的一員, 屬于內(nèi)皮受體型酪氨酸蛋白激酶中的一種。國內(nèi)有研究[5]顯示, 腫瘤細胞能夠合成VEGF-C, VEGF-C經(jīng)絲氨酸蛋白纖溶酶作用可發(fā)生水解, 生成具有活性的物質(zhì), 而該物質(zhì)和表達于淋巴管內(nèi)皮細胞的VEGFR-3親和力較高, 據(jù)統(tǒng)計二者的親和力是VEGF-C與VEGFR-3親和力的400倍以上。當該活性物質(zhì)和VEGFR-3結(jié)合之后可快速進行磷酸化,能夠誘導下游信號傳導過程, 如對VEGFR-3所致ERK1、ERK2活化及Shc磷酸化加以激活, 可促進淋巴管內(nèi)皮細胞的增生, 使之發(fā)生擴張或增生, 從而促使腫瘤發(fā)生淋巴管轉(zhuǎn)移的風險大幅增加。本次研究通過對本院收集的手術(shù)切除的23例乳腺纖維瘤標本(對照組)與48例乳腺浸潤性導管癌標本(觀察組)VEGF-C及VEGFR-3表達情況展開免疫組化法檢測, 發(fā)現(xiàn)觀察組VEGF-C表達陽性率、VEGFR-3表達陽性率均明顯比對照組高, 且VEGF-C表達位置主要為乳腺癌細胞胞質(zhì)內(nèi), VEGFR-3在乳腺癌癌巢周圍間質(zhì)細胞內(nèi)表達。經(jīng)對48例乳腺浸潤性導管癌標本展開進一步分析, 發(fā)現(xiàn)26例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本中VEGFR-3表達陽性率、VEGF-C陽性率均明顯比22例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標本高, 由此可見VEGF-C及VEGFR-3可促進淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生。

綜上所述, 與良性病變相比, 乳腺癌患者VEGF-C及VEGFR-3表達明顯增多, VEGF-C及VEGFR-3表達對乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯的促進作用。

[1]杜宏道, 盛薇, 高希濤, 等. vegf-c、cxcr4在乳腺浸潤性導管癌組織中的表達及意義.西安交通大學學報(醫(yī)學版),2012,33(1):75-79.

[2]李凌, 陳立章.老年乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床特征分析.第三軍醫(yī)大學學報,2010,3(14):1503,1511.

[3]張陽, 汪春紅, 王英麗. VEGF-C和FLT-4在乳腺癌中的表達及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性.中國婦幼保健,2011,26(15):2351-2352.

[4]王若珺, 初明, 岑羽捷, 等.新生淋巴管與乳腺癌淋巴管轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究進展.生理科學進展,2014,45(1):49-54.

[5]何靜, 劉安文, 蔡婧, 等.姜黃素對乳腺癌細胞VEGF-C表達及增殖、侵襲性的影響.腫瘤防治研究,2011,38(10):1109-1112.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.08.018

2014-10-29]

473000 河南省南陽市第二人民醫(yī)院腫瘤一病區(qū)