羅朝兵 鞠丹 劉中帥 張凌云

(省部共建森林培育與保護(hù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(北京林業(yè)大學(xué))，北京，100083)

責(zé)任編輯:潘 華。

親環(huán)素是一類能與環(huán)孢霉素特異結(jié)合的蛋白家族，廣泛存在于生物體中，具有肽基脯氨酸順?lè)串悩?gòu)酶活性，參與蛋白的修飾、折疊等過(guò)程［1］。早在1984年，親環(huán)素A 就已經(jīng)在生物體中發(fā)現(xiàn)并純化［2］，且已證明其在動(dòng)物體內(nèi)病毒感染進(jìn)程起到重要的調(diào)節(jié)作用［3］。近年來(lái)在植物體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)親環(huán)素的存在。植物體親環(huán)素基因具有一般親環(huán)素的功能外，還參與植物生長(zhǎng)發(fā)育、光合作用及脅迫應(yīng)答等過(guò)程。例如，有研究表明擬南芥CYP38 在光系統(tǒng)II(PSII)復(fù)合體的裝配過(guò)程和維持其穩(wěn)定性起到重要的作用，突變體植株矮小且對(duì)高光超敏，植物因PSII受損而無(wú)法正常合成光和產(chǎn)物，進(jìn)而影響植株的生長(zhǎng)發(fā)育［4］;擬南芥CYP71 則通過(guò)與組蛋白H3 互作，且參與H3K27 的甲基化進(jìn)程，cyp71 突變植株發(fā)育不正常，出現(xiàn)頂端分生組織發(fā)育受阻，根系生長(zhǎng)減緩等［5］;擬南芥CYP59 是具有多結(jié)構(gòu)域的親環(huán)蛋白，能與RNA 聚合酶II 最大亞基的C 端互作，進(jìn)而參與轉(zhuǎn)錄的進(jìn)程［6］。目前，Trivedi［7］等鑒定了35 個(gè)擬南芥親環(huán)素基因，28 個(gè)水稻親環(huán)素基因，并發(fā)現(xiàn)其在多種逆境條件下響應(yīng)。越來(lái)越多的證據(jù)表明親環(huán)素蛋白在植物的生長(zhǎng)發(fā)育及形態(tài)建成、逆境生理、mRNA 進(jìn)程、蛋白降解與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起到重要作用，但人們對(duì)親環(huán)素的功能依然知之甚少，且目前研究材料僅限于模式植物和部分作物，關(guān)于木本植物中親環(huán)素特性及功能尚未見報(bào)道。

青杄(Picea wilsonii.Mast)屬于松科(Pinaceae)云杉屬(Picea)植物，是一種耐寒冷、耐旱的多年生木本針葉植物，廣泛分布于亞熱帶和溫帶地區(qū)，是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)林植物［8］。本研究從青杄中克隆得到一個(gè)CYP 基因(命名為PwCYP1)，通過(guò)RACE PCR 得到其全長(zhǎng)cDNA 序列。利用qRT-PCR 等技術(shù)分析了其在不同組織及發(fā)育時(shí)期的表達(dá)量及對(duì)各種逆境的響應(yīng)。本研究將對(duì)CYP 基因家族的功能研究、特別是其生殖生長(zhǎng)的機(jī)制研究提供理論基礎(chǔ)，也為篩選優(yōu)質(zhì)林木抗性基因提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試材與試劑

多年生青杄(Picea wilsonii)種子和花粉均采集于中國(guó)科學(xué)院北京植物園，組織特異性表達(dá)試驗(yàn)使用3a 苗齡青杄幼苗。青杄cDNA 文庫(kù)由英濰捷基公司利用Gateway 技術(shù)構(gòu)建完成［9-10］。激素和逆境處理試驗(yàn)使用8 周苗齡青杄幼苗。青杄幼苗培養(yǎng)于25 ℃室溫，空氣濕度50%，光周期為16 h 光照，8 h黑暗的溫室，培養(yǎng)基質(zhì)為V(營(yíng)養(yǎng)土)∶ V(蛭石)=1∶1 混合，每周使用自來(lái)水充分澆灌1 次。植物材料經(jīng)處理后液氮速凍于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

青杄cDNA 文庫(kù)載體為pDONR222，由Invitrogen 公司提供?？寺≥d體為pEASY- T1，購(gòu)買自Transgene 公司。RNA 提取試劑盒(TRI pure Reagent)購(gòu)買于AidLab 公司，PCR Taq Mix、DNA Maker(DL2000，DL15000)、熒光定量PCR 試劑盒(SYBR Green SuperReal Premix)購(gòu)買于天根公司，反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Revert AidTM First Strand cDNA Synthesis Kit)購(gòu)買于Fermentas 公司。所用激素購(gòu)買于Sigma 公司。其他試劑購(gòu)買于AMRESCO 公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 RACE PCR 獲取目的基因PwCYP1 的全長(zhǎng)

利用青杄cDNA 文庫(kù)為模板，根據(jù)PwCYP1 的EST 序列與pDONR222 載體的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行RACE PCR。使用引物5-race-F 與5-race-R擴(kuò)增5’方向序列，使用3-race-F 與3-race-R擴(kuò)增出3’方向的序列。PCR 產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠回收、連接pEASY-T1、測(cè)序后獲得PwCYP1 的末端序列，與EST 序列拼接后獲得PwCYP1 的全長(zhǎng)cDNA 序列。設(shè)計(jì)引物CYP-F 與CYP-R，經(jīng)過(guò)PCR后得到開放閱讀框完整的核酸序列，連接到pEASY-T1 上，獲得PwCYP1 單克隆。所用到的引物見表1。

表1 PwCYP1 克隆及組織表達(dá)分析所需要的引物

1.2.2 生物信息學(xué)分析

根據(jù)PwCYP1 的全長(zhǎng)序列，利用DNAMAN 推導(dǎo)出PwCYP1 的編碼框確定其蛋白氨基酸的序列，蛋白多序列比對(duì)運(yùn)用clustalx 軟件和Espript(http://espript.ibcp.fr/ESPript/ESPript/)，系統(tǒng)樹的構(gòu)建利用MEGA5 軟件，構(gòu)樹方法為鄰位相連法(Neighbor-joining)，bootstap 檢測(cè)為1 000 次。利用Expasy(www.expasy.org)中的Compute pI/Mw 工具來(lái)計(jì)算蛋白的理論等電點(diǎn)與分子量;利用ProtScale 工具(http://web.expasy.org/protscale/)進(jìn)行疏水性分析;利用ScanProsite(http://prosite.expasy.org/)對(duì)目的基因的結(jié)構(gòu)域進(jìn)行預(yù)測(cè);利用GOR4(http://npsa-pbil.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=npsa_gor4.html)進(jìn)行蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè);利用SWISS-MODLE(http://swissmodel.expasy.org/)進(jìn)行蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)。

1.2.3 組織特異表達(dá)試驗(yàn)

用于試驗(yàn)的3年生青杄的根、莖、針葉及青杄種子及花粉總RNA 的提取利用AidLab 公司的植物RNA 提取試劑盒。RNA 提取后經(jīng)過(guò)電泳和分光光度法檢測(cè)均達(dá)到要求，運(yùn)用Fermentas 公司的反轉(zhuǎn)錄試劑盒。均一化濃度之后在StepOnePlus Real Time RT-PCR 儀器上進(jìn)行qRT-PCR 來(lái)檢測(cè)基因在不同組織的相對(duì)表達(dá)量，所用特異引物為CYP-RT-F 與CYP-RT-R，內(nèi)參基因?yàn)榍鄸e延伸因子蛋白EF-1α［11］，引物為EF-1α-F 與EF-1α-R(表1)。試驗(yàn)進(jìn)行3 次重復(fù)。

1.2.4 逆境與激素響應(yīng)試驗(yàn)

逆境與激素響應(yīng)試驗(yàn)參考［12-13］方法，并將處理的激素處理時(shí)間和濃度加以調(diào)整。具體處理方法如下:將8 周苗齡的青杄幼苗根浸入激素溶液分別處理3、6 和12 h，以水為對(duì)照。試驗(yàn)中使用的激素包括ABA、吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid，IAA)、GA、MeJA、水楊酸(Salicylic Acid，SA)和油菜素內(nèi)酯(brassinolide，BR)，濃度均為100 nmol·L-1。干旱試驗(yàn)中，將8 周苗齡的青杄幼苗置于溫室中無(wú)水培養(yǎng)4周，對(duì)照組正常培養(yǎng);鹽脅迫試驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組每天分別噴施5 mL 2%、4%、6%的NaCl 溶液，處理4 周，對(duì)照組用清水處理。將8 周苗齡的青杄幼苗放于清水中，分別放置于45、4 ℃環(huán)境中，對(duì)照組置于室溫條件，分別處理0、0.5、1、3、6、12 h 后，取樣后液氮速凍置于-80 ℃?zhèn)溆谩C(jī)械損傷響應(yīng)試驗(yàn)中，用鑷子將8 周苗齡青杄幼苗的葉片損傷后，分別于0，0.5，1，2，3 h 取樣，對(duì)照組正常培養(yǎng)。過(guò)氧化氫(H2O2)響應(yīng)試驗(yàn)中，將8周苗齡青杄幼苗放置于5% H2O2溶液中，分別于0，1，3，6 和12 h 取樣。分別提取青杄幼苗和各組織總RNA 后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄、qRT-PCR 等試驗(yàn)檢測(cè)各組織PwCYP1 的表達(dá)量變化。試驗(yàn)進(jìn)行3 次重復(fù)。

1.2.5 種子萌發(fā)試驗(yàn)

種子萌發(fā)試驗(yàn)采用水培法［14］。將吸水濾紙鋪在培養(yǎng)皿中，將春化1 個(gè)月的青杄種子分散放入濕潤(rùn)的濾紙上培養(yǎng)，保持濾紙濕潤(rùn)，在室溫條件(25℃)下進(jìn)行萌發(fā)試驗(yàn)。將培養(yǎng)皿置于25 ℃光照培養(yǎng)箱中，光周期為16 h 光照/8 h 黑暗，培養(yǎng)12 d，分別在培養(yǎng)0、2、4、6、8、10、12 d 時(shí)采樣，液氮速凍后置于-80 ℃保存，用于PwCYP1 基因在種子不同萌發(fā)時(shí)期表達(dá)量分析。所有試驗(yàn)進(jìn)行3 次重復(fù)。

1.2.6 花粉萌發(fā)試驗(yàn)

花粉萌發(fā)試驗(yàn)參照［11］方法:將保存于-80 ℃的青杄花粉取出，放在-20 ℃中24 h，再放于4 ℃中2 h 以復(fù)蘇其活力后進(jìn)行萌發(fā)試驗(yàn)?；ǚ鄣囊后w培養(yǎng)基由12%蔗糖、0.01%硼酸、0.03%硝酸鈣與5 mmol·L-1檸檬酸-磷酸緩沖液組成(pH=5.8)。取花粉置于培養(yǎng)基中200 r/min，28 ℃搖床中培養(yǎng)，分別在培養(yǎng)0、2、6、12、18、24、30、36 h 后取樣，液氮速凍置于-80 ℃保存，用于檢測(cè)PwCYP1 表達(dá)量。進(jìn)行3 次重復(fù)試驗(yàn)。

1.2.7 缺素處理試驗(yàn)

將正常生長(zhǎng)條件下的3年生青杄幼苗移至不含有機(jī)物料的土壤中，正常澆水4 周，直到青杄幼苗嚴(yán)重枯萎，頂芽不能繼續(xù)生長(zhǎng)。對(duì)照植株正常培養(yǎng)。提取RNA，檢測(cè)PwCYP1 表達(dá)量。進(jìn)行3 次重復(fù)試驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 PwCYP1 的cDNA 克隆

利用青杄cDNA 文庫(kù)為模板，根據(jù)PwCYP1(登錄號(hào)為KT210442)的EST 序列與pDONR222 載體的序列設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行RACE PCR。PwCYP1 全長(zhǎng)cDNA 為962 bp，編碼框?yàn)?16 bp 組成，編碼一個(gè)171氨基酸的多肽，Protparam 工具預(yù)測(cè)蛋白的分子量約為17.98 kDa，理論等點(diǎn)為8.34。分子式為C799H1248N216O238S9，甘氨酸(Gly)量最多為15.8%，纈氨酸(Val)為11.1%，賴氨酸量為7.6%。蛋白不穩(wěn)定指數(shù)為15.71，表明蛋白比較穩(wěn)定。

2.2 多序列比對(duì)及系統(tǒng)發(fā)育樹分析

運(yùn)用NCBI 的BLAST 工具檢索PwCYP1 的同源基因，發(fā)現(xiàn)綠豆(Vigna radiate)、陸地棉(Gossypium hirsutum)、火炬松(Pinus taeda)、蓖麻(Ricinus communis)和擬南芥(Arabidopsis thaliana)等物種中的同源基因，利用ClustalX 軟件對(duì)PwCYP1 及其同源基因進(jìn)行多序列比對(duì)，結(jié)合軟件Mega5.0 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果發(fā)現(xiàn):火炬松(Pinus taeda)的一個(gè)基因(登錄號(hào)EF532602)與PwCYP1 高度同源，被歸為一簇(圖1)。多序列比對(duì)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CYP 蛋白在不同物種間有非常高的相似性(圖2)。

圖1 青杄PwCYP1 進(jìn)化樹分析

圖2 不同物種CYP 蛋白多序列比對(duì)

2.3 二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)

運(yùn)用GOR4 工具預(yù)測(cè)PwCYP1 的二級(jí)結(jié)構(gòu)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蛋白主要有α-螺旋(6.43%)、延伸鏈結(jié)構(gòu)(33.33%)與無(wú)規(guī)則卷曲(60.23%)組成。運(yùn)用SWISS-MODEL 工具預(yù)測(cè)蛋白的三級(jí)結(jié)構(gòu)，結(jié)果如圖3，可以預(yù)測(cè)為球狀蛋白，疏水位點(diǎn)與親水位點(diǎn)在蛋白表面均勻分布。

圖3 PwCYP1 二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)

2.4 PwCYP1 的表達(dá)分析

2.4.1 PwCYP1 的組織表達(dá)特異性分析

通過(guò)半定量RT-PCR 與qRT-PCR 試驗(yàn)檢測(cè)PwCYP1 在青杄各組織的表達(dá)模式，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PwCYP1 在青杄的各組織中均有表達(dá)，但在花粉中表達(dá)量最高(表2)。

表2 PwCYP1 在青杄各組中的相對(duì)表達(dá)量

2.4.2 PwCYP1 在青杄種子萌發(fā)過(guò)程中的表達(dá)

通過(guò)qRT-PCR 檢測(cè)PwCYP1 在青杄種子萌發(fā)過(guò)程中表達(dá)模式，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PwCYP1 在青杄種子萌發(fā)過(guò)程中表達(dá)量呈下降趨勢(shì)，在第4 天的時(shí)候降到最低值后表達(dá)量略有上升，并在第6 天之后表達(dá)量維持在相對(duì)穩(wěn)定數(shù)值(表3)。

表3 PwCYP1 在種子萌發(fā)不同時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量

2.4.3 PwCYP1 花粉不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)分析

在組織特異表達(dá)試驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)PwCYP1 在花粉中的表達(dá)量最高，因此利用qRT-PCR 方法檢測(cè)在花粉萌發(fā)后不同時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)青杄花粉在萌發(fā)的0～24 h 階段PwCYP1 表達(dá)量逐漸減低，在24 h 達(dá)到最低值后被上調(diào)至相對(duì)穩(wěn)定值(表4)。

2.4.4 PwCYP1 對(duì)逆境的響應(yīng)

分別提取干旱處理4 周后青杄幼苗的根、莖、針葉RNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA 進(jìn)行qRT-PCR，結(jié)果表明，經(jīng)過(guò)干旱處理后根中PwCYP1 的表達(dá)量較對(duì)照上升4 倍左右，莖中PwCYP1 的表達(dá)量上升2.5 倍，針葉中表達(dá)量變化不明顯(表5);經(jīng)過(guò)2% NaCl 處理后根中PwCYP1 的表達(dá)量上升70 倍左右，莖中PwCYP1 的表達(dá)量上升100 倍，針葉中表達(dá)量上升7 倍左右，但隨著NaCl 濃度的上升，PwCYP1 的表達(dá)量呈下降趨勢(shì)(表5);經(jīng)過(guò)45 ℃處理后PwCYP1 的表達(dá)量在0.5～1 h 內(nèi)先上升后下降，1～3 h 內(nèi)又上升，3～12 h 呈逐漸下降的趨勢(shì)(表6);機(jī)械損傷處理后PwCYP1 的表達(dá)量先上升，1 h 上升至2.5 倍達(dá)到最大值后表達(dá)量被下調(diào)至一穩(wěn)定值(表7);H2O2處理后，PwCYP1 的表達(dá)量在0～1 h 內(nèi)上升，1～12 h 內(nèi)下降，但變化不明顯(表8);冷(4 ℃)處理后3 h，PwCYP1 的表達(dá)量被抑制降低到0.4 倍，3 h 后表達(dá)量被上調(diào)(表9)。

表4 PwCYP1 在花粉不同時(shí)期的相對(duì)表達(dá)量

表5 PwCYP1 在鹽、干旱處理下的表達(dá)模式

表6 PwCYP1 在熱激(45 ℃)處理下的表達(dá)模式

表7 PwCYP1 在機(jī)械損傷處理下的表達(dá)模式

表8 PwCYP1 在H2O2 處理下的表達(dá)模式

表9 PwCYP1 在冷(4 ℃)處理下的表達(dá)模式

2.4.5 PwCYP1 對(duì)缺素以及不同外源激素處理的響應(yīng)

經(jīng)過(guò)缺素處理4 周后的3年生青杄幼苗，分別提取根、莖、葉RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA 進(jìn)行qRT-PCR。結(jié)果表明缺素處理后PwCYP1 在根、莖、針葉中的表達(dá)量均下降，且在根中表達(dá)量下降7 倍左右，莖和針葉中均下降2 倍(表10)。不同外源激素處理結(jié)果顯示，ABA，IAA，MeJA，SA 處理3 h 后PwCYP1 的表達(dá)量上升到最大值，而在3～12 h 內(nèi)，PwCYP1 的表達(dá)量被抑制;GA 處理后前期PwCYP1 的表達(dá)量變化不明顯，到12 h 時(shí)大幅度提高;BR 處理后6 h 后PwCYP1 的表達(dá)量升高，到12 h 時(shí)PwCYP1 的表達(dá)量重新下調(diào)(表11)。

表10 PwCYP1 在缺素處理下的表達(dá)模式

表11 PwCYP1 在激素處理下的表達(dá)模式

3 結(jié)論與討論

本研究從青杄的cDNA 文庫(kù)中克隆得到親環(huán)素基因PwCYP1，經(jīng)過(guò)生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)PwCYP1編碼了一個(gè)包含171 個(gè)氨基酸的蛋白，分子量約為17.98 KDa，包含多個(gè)α-螺旋。多序列比對(duì)以及構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果顯示PwCYP1 和PtCYP1 聚為一簇。由于青杄(Picea wilsonii)和火炬松(Pinus taeda)都屬于松科，親緣關(guān)系相對(duì)比較近，且兩者在形態(tài)學(xué)上也具有非常高的相似性，推測(cè)兩物種在進(jìn)化上有相同的祖先。

以為的研究中證實(shí)植物類親環(huán)素在植物生物學(xué)、脅迫應(yīng)答等過(guò)程發(fā)揮作用。例如，Sekhar［15］等在木豆中分離得到一個(gè)親環(huán)素基因CcCYP，轉(zhuǎn)基因過(guò)表達(dá)于擬南芥中發(fā)現(xiàn)能增強(qiáng)多種逆境脅迫的抵御能力;Kim［16］等研究發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)水稻親環(huán)素基因OsCYP20-2 于擬南芥和煙草中增強(qiáng)了轉(zhuǎn)基因植株抵抗非生物逆境脅迫的能力。本研究中，PwCYP1在干旱和NaCl 處理后，根和莖中表達(dá)量均大幅度升高，尤其是2%的NaCl 處理后，PwCYP1 在根和莖表達(dá)量分別上升70 倍和100 倍。顯示PwCYP1 參與了青杄干旱和鹽脅迫應(yīng)答。不同激素處理后PwCYP1 表達(dá)量也表現(xiàn)出不同程度的上調(diào)。其中，ABA和MeJA 處理3 h 后PwCYP1 的表達(dá)量達(dá)到最高，機(jī)械損傷1 h 后表達(dá)量達(dá)到最大值，表明PwCYP1 能響應(yīng)ABA 并參與了MeJA 誘導(dǎo)的機(jī)械損傷應(yīng)答。Berardini 等發(fā)現(xiàn)擬南芥CYP40 不但對(duì)的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)有重要的調(diào)控作用［17］，同時(shí)能與熱激蛋白HSP90互作［18］。在本試驗(yàn)中，我們對(duì)青杄幼苗進(jìn)行45 ℃處理后，PwCYP1 表達(dá)量發(fā)生明顯變化，預(yù)示著Pw-CYP1 可能也參與了熱激反應(yīng)。

已有研究表明親環(huán)素蛋白在植物各個(gè)器官都有表達(dá)，并發(fā)揮著重要的作用。Lippuner［20］等在擬南芥中發(fā)現(xiàn)ROC1 與ROC4 編碼兩個(gè)親環(huán)素蛋白，其中ROC1 在擬南芥各個(gè)器官都有表達(dá)，而ROC4 只在能進(jìn)行光和作用器官表達(dá);Romano［21］等在2004年在擬南芥中已發(fā)現(xiàn)29 種親環(huán)素蛋白，普遍在各個(gè)組織和器官中表達(dá)，參與了光合作用［22］、生物脅迫響應(yīng)［23］、花粉萌發(fā)［24］等一系列生理過(guò)程。Saito［25］等發(fā)現(xiàn)AtCYP1 主要在維管束與花中表達(dá)，AtCYP2主要在幼葉中表達(dá)，顯示了CYP 基因家族功能上的多樣性。本研究中，在青杄組織特異表達(dá)實(shí)驗(yàn)中，PwCYP1 在各個(gè)組織均有表達(dá)，但在成熟花粉中表達(dá)量最高，進(jìn)一步試驗(yàn)證實(shí)在花粉萌發(fā)過(guò)程中PwCYP1 的表達(dá)量逐步下降，在花粉管生長(zhǎng)后期其表達(dá)量維持在一定水平。相對(duì)于花粉中，雖然種子中表達(dá)量不高，但在種子萌發(fā)過(guò)程中PwCYP1 表達(dá)量呈現(xiàn)同花粉萌發(fā)過(guò)程中相似的變化趨勢(shì)，這些結(jié)果表明PwCYP1 參與了青杄花粉管生長(zhǎng)和種子萌發(fā)過(guò)程，隨著花粉和種子萌發(fā)其表達(dá)量下降。

綜上所述，青杄PwCYP1 可能參與了青杄種子萌發(fā)、花粉萌發(fā)等多種生理過(guò)程，并參與ABA，Me-JA，IAA 等激素應(yīng)答途徑，是一個(gè)具有抗旱、抗鹽、抗熱等潛在能力的抗逆基因。今后可以將該基因轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥或其他經(jīng)濟(jì)植物，進(jìn)一步研究其抗逆功能，并探索其在植物中的抗逆機(jī)制。本研究將為植物親環(huán)素蛋白的進(jìn)一步功能研究奠定基礎(chǔ)，也為未來(lái)篩選優(yōu)良林木基因提供理論依據(jù)。

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