張書卿,張緒良,黃丹青

(黃石市中心醫(yī)院腫瘤外科，湖北 黃石 435000)

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Ki-67和p53在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義

張書卿,張緒良※,黃丹青

(黃石市中心醫(yī)院腫瘤外科，湖北 黃石 435000)

摘要：目的探討Ki-67和p53在乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中的表達(dá)及其與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。方法選取2010年3月至2014年3月就診于黃石市中心醫(yī)院的乳腺癌患者100例,另外選取行乳腺良性腫瘤切除后的患者20例，采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)100例乳腺癌組織及20例正常乳腺組織中Ki-67和p53的表達(dá)，比較兩者在兩種不同組織中的表達(dá)情況。結(jié)果Ki-67在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為76.0%(76/100)，正常乳腺組織中為15.0%(3/20)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；p53在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.0%(82/100)，正常乳腺組織為20.0%(4/20)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，p53與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期無(wú)明顯關(guān)系。結(jié)論Ki-67和p53與乳腺癌的發(fā)生相關(guān)，Ki-67與乳腺癌患者的預(yù)后密切相關(guān)，通過檢測(cè)Ki-67的表達(dá)水平可預(yù)測(cè)乳腺癌患者的惡性程度，為臨床上治療乳腺癌提供一定的理論根據(jù)，同時(shí)通過檢測(cè)p53可以為臨床上診斷乳腺癌提供一定的參考。

關(guān)鍵詞：乳腺癌；正常乳腺組織；Ki-67；p53

乳腺癌為人類常見的惡性腫瘤，也是女性常見的惡性腫瘤之一，極大危害人類的健康，目前對(duì)于乳腺癌的治療方法包括手術(shù)、化療、放療，但仍有大量的乳腺癌患者治療后的生存率不高，主要原因是乳腺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移或臨床分期較晚[1-2]。研究表明，Ki-67和p53與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)[3]。本研究通過檢測(cè)乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中Ki-67及p53表達(dá)情況，探討它們與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料選取2010年3月至2014年3月就診于黃石市中心醫(yī)院的乳腺癌患者100例，患者術(shù)后均經(jīng)病理證實(shí)，均為女性，年齡42～70歲，平均(62±2)歲。根據(jù)選取患者的病理結(jié)果，腫瘤大小:腫瘤直徑<2 cm的10例，2～5 cm的58例，>5 cm的32例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：N062例，N118例，N216例，N34例；臨床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期35例，Ⅲ期46例。另外選擇20例行乳腺良性腫瘤切除后的患者作為對(duì)照，并且經(jīng)病理檢查提示為正常乳腺組織，排除癌前病變等相關(guān)病變,均為女性，年齡41～63歲，平均(62±2)歲。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑Ki-67鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自北京中山生物制品有限公司(批號(hào)：Ki679801),p53鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自北京中山生物制品有限公司(批號(hào):68723),S-P試劑盒購(gòu)自福州市邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司(批號(hào)：SP30232),二氨基聯(lián)苯胺顯色試劑盒購(gòu)自福州市邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司(批號(hào):Z98036),其余免疫組織所需要的試劑由本院中心實(shí)驗(yàn)室提供。

1.3實(shí)驗(yàn)方法將所有手術(shù)后采集的標(biāo)本固定于4%甲醛中，24 h內(nèi)脫蠟，并編號(hào)，切片，然后依次采用烤片、脫蠟、水化、沖洗、抗原修復(fù)、4 ℃冰箱過夜、磷酸緩沖液、二氨基聯(lián)苯胺顯色、封片、閱片。陽(yáng)性對(duì)照采用乳腺切片，陰性對(duì)照采用磷酸緩沖液。結(jié)果判斷：Ki-67定位于細(xì)胞質(zhì)中，p53定位于細(xì)胞核中，少量位于細(xì)胞質(zhì)中。結(jié)果的判斷由2名副主任醫(yī)師以上病理科醫(yī)師綜合判斷，若結(jié)果不統(tǒng)一時(shí)，由第 3位病理科醫(yī)師判斷。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1Ki-67在乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中的表達(dá)情況Ki-67在顯微鏡下主要表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)中棕黃色染色物質(zhì)，見圖1；Ki-67在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為76.0%(76/100),明顯高于正常乳腺組織的15.0%(3/20)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=27.572，P<0.01)。

2.2Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)情況及與臨床病理特征的關(guān)系Ki-67在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率與乳腺癌的腫瘤的大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)(P<0.05)，見表1。

圖1　Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)(SP×200)

表1　Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)情況及

2.3p53在乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中的表達(dá)情況p53在顯微鏡下主要表現(xiàn)為細(xì)胞核中棕黃色染色物質(zhì)，見圖2。p53在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為82.0%(82/100),顯著高于正常乳腺組織的20.0%(4/20)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=31.551，P<0.01﹚。

圖2　p53在乳腺癌組織中的表達(dá)　(SP×200)

2.4p53在乳腺癌組織中的表達(dá)情況及與臨床病理特征的關(guān)系p53在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率與乳腺癌的腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期無(wú)關(guān)(P>0.05)，見表2。

表2　p53在乳腺癌組織中的表達(dá)情況及與臨床病理特征的關(guān)系

3討論

目前大量研究表明，Ki-67和p53與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，Ki-67為增殖細(xì)胞核抗原，存在于細(xì)胞周期中除G0期外的所有階段，Ki-67在細(xì)胞的生理及病理性死亡的過程中占有非常重要的地位，因?yàn)楫?dāng)其作用被抑制時(shí)就會(huì)促進(jìn)腫瘤的產(chǎn)生或加速腫瘤的發(fā)生[4-6]。本研究結(jié)果表明，Ki-67在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常乳腺組織，這是因?yàn)樵谌橄侔┙M織中Ki-67作為正常的凋亡因子發(fā)揮其應(yīng)有的作用，但是當(dāng)其作用受到抑制時(shí)，將會(huì)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，因此在乳腺癌組織中其陽(yáng)性表達(dá)率高，這與Montemurro等[7]的研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果還顯示，隨著乳腺腫瘤的直徑增加、臨床轉(zhuǎn)移站數(shù)的增加、臨床分期越晚，其陽(yáng)性表達(dá)率也越來(lái)越高，因此Ki-67的表達(dá)可以為乳腺癌患者的預(yù)后提供一定的參考，從而指導(dǎo)臨床醫(yī)師進(jìn)行診治。

p53為發(fā)現(xiàn)較早的促進(jìn)細(xì)胞凋亡的因子，即所謂的野生型p53，也就是細(xì)胞生長(zhǎng)的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，可以監(jiān)視細(xì)胞的癌變發(fā)生，當(dāng)細(xì)胞基因DNA發(fā)生突變時(shí)，其可以促進(jìn)修復(fù)，從而達(dá)到防治癌變的目的。因此當(dāng)p53發(fā)生突變時(shí)，其監(jiān)視腫瘤的作用將退變，因此將會(huì)間接促進(jìn)腫瘤的發(fā)生，也就是由抑癌基因變成了癌基因，從而促進(jìn)正常細(xì)胞的轉(zhuǎn)化或加速已經(jīng)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞進(jìn)一步惡化[8]。大量研究表明，在乳腺癌、直腸癌、乳腺癌等惡性腫瘤中均發(fā)現(xiàn)了突變型p53基因的表達(dá)[9-11]。本研究結(jié)果顯示，p53在乳腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率高于正常乳腺組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，這與相關(guān)報(bào)道的p53抑癌基因在腫瘤細(xì)胞的激活過表達(dá)相關(guān)[8]。本研究結(jié)果還顯示，p53在乳腺癌組織中的表達(dá)與乳腺癌的腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期無(wú)關(guān)。

綜上所述，p53與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān)，但是與預(yù)后無(wú)明顯關(guān)系，可以認(rèn)為Ki-67和p53與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可為臨床上治療乳腺癌提供一定的理論依據(jù)。

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Ki-67 and p53 Expression and Clinical Significance in Breast CancerZHANGShu-qing,ZHANGXu-liang,HUANGDan-qing.(DepartmentofGeneralSurgery,HuangshiCentralHospital,Huangshi435000,China)

Abstract:ObjectiveTo detect expression of Ki-67 and p53 in breast cancer tissue and normal breast tissue,and the relationship with the occurrence and development of breast cancer.MethodsA total of 100 cases with breast cancer admitted to Huangshi Central Hospital from Mar. 2010 to Mar. 2014 were included in the study,and another 20 cases with benign breast tumor after resection were also included,and immunohistochemistry SP method was adopted to test the Ki-67 and p53 expression of both groups and then compared.ResultsThe positive expression rate of Ki-67 of breast cancer tissue was 76.0%(76/100),of normal breast tissue tissue was 15.0%(3/20),the difference was significant (P<0.01).The positive expression rate of p53 of breast cancer positive was 82.0%(82/100),of normal breast tissue was 20.0%(4/20),the difference was statistically significant(P<0.01).Ki-67 expression level was closely associated with tumor size,clinical stage,lymph node metastasis,while there was no obvious correlation between p53 and tumor size,clinical stage,or lymph node metastasis.ConclusionKi-67 and p53 are associated with the onset of breast cancer,Ki-67 is closely associated with the prognosis of patients with breast cancer,by detecting the expression level of Ki-67 can predict the malignancy degree of breast cancer,and provide a theoretical basis for the clinical treatment of breast cancer,and p53 detection can provide a reference for the clinical diagnosis of breast cancer.

Key words:Breast cancer; Normal breast tissue; Ki-67; p53

收稿日期：2014-10-13修回日期：2015-02-07編輯：伊姍

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.18.051

中圖分類號(hào)：R73-37

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)18-3400-03