鄧偉(塔里木大學(xué)體育工作部，新疆阿拉爾　843300)

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中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)與葡萄籽原花青素對(duì)高脂飲食大鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成干預(yù)作用及其機(jī)制探討

鄧偉
(塔里木大學(xué)體育工作部，新疆阿拉爾843300)

摘要:目的:探討GSP或/聯(lián)合中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)抗高脂飲食大鼠動(dòng)脈粥樣硬化(AS)形成作用及其機(jī)制.方法:成年雄性SD大鼠60只，隨機(jī)分為普通飲食對(duì)照組(C組)與高脂飲食對(duì)照組(H 組)、高脂飲食安慰劑組(Hp組)、高脂飲食GSP組(Hg組)、高脂飲食運(yùn)動(dòng)組(Hm組)、高脂飲食運(yùn)動(dòng)聯(lián)合GSP組(Hmg組).除C組外，其余各組采用高脂飲食喂養(yǎng)15周、同時(shí)進(jìn)行GSP或/聯(lián)合中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)進(jìn)行干預(yù);觀察各組大鼠有無AS病變并計(jì)算AS斑塊面積百分比，比較血清TC、TG、LDL-C、HDL-C及SOD、MDA與ox-LDL指標(biāo)變化.結(jié)果:高脂飲食大鼠血清TC、TG、LDL-C濃度升高及HDL-C濃度下降，動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)升高;同時(shí)血SOD活性下降、MDA含量及ox-LDL濃度升高，蘇丹Ⅳ染色及HE染色下的主動(dòng)脈表現(xiàn)出AS樣形態(tài)學(xué)病變.但比起H組，Hg組、Hm組、Hmg組上述異常變化程度明顯得到連鎖樣緩解.結(jié)論: GSP及中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)均可改善高脂飲食大鼠血脂代謝異常，提高血SOD活性、增強(qiáng)清除活性氧的能力，最終通過控制ox-LDL的生成發(fā)揮抗AS形成作用;且二者恰當(dāng)結(jié)合具有協(xié)同效應(yīng).

關(guān)鍵詞:中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng);葡萄籽原花青素;動(dòng)脈粥樣硬化;氧化型低密度脂蛋白膽固醇

中圖類分號(hào): G804.2

引用格式:鄧偉.中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)與葡萄籽原花青素對(duì)高脂飲食大鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成干預(yù)作用及其機(jī)制探討［J］.安徽師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2015，38(2) :192－198.

近年來，隨著人們飲食習(xí)慣及生活方式的改變，動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)及由其引發(fā)的缺血性心肌病嚴(yán)重困擾著人類健康;因此，關(guān)于AS防治從來都是一個(gè)研究熱點(diǎn)，血脂異常是AS病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素［1-2］.至于AS的發(fā)病機(jī)制，醫(yī)學(xué)界也進(jìn)行了一系列的研究探討: Steinberg［3］于1983年提出了氧化學(xué)說，認(rèn)為低密度脂蛋白(Low density lipoprotein，LDL)經(jīng)氧化修飾產(chǎn)生氧化型低密度脂蛋白(Oxidative low density lipoprotein，ox-LDL)是發(fā)生AS病變的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，這對(duì)AS防治工作起到重要指導(dǎo)意義.自此以后，對(duì)于AS過程中的ox-LDL的研究持續(xù)不斷，進(jìn)一步確定了ox-LDL是AS病變中心環(huán)節(jié)的這一觀點(diǎn)［4-5］;目前，Ox-LDL已成為診斷及預(yù)測(cè)冠心病的公認(rèn)有效指標(biāo)［6］.因此，抑制動(dòng)脈ox-LDL的生成對(duì)預(yù)防AS具有重要意義;雖然關(guān)于AS的防治已有大量文獻(xiàn)報(bào)道，然而探尋AS的高效、安全、經(jīng)濟(jì)防治方法仍較為迫切.

葡萄籽原花青素(Grape seed proanthocyanidin，GSP)是從天然葡萄籽中提取出的有效活性成分.現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，GSP具有抗氧化、抗炎、抗?jié)?、抗過敏、抗誘變、抗腫瘤、抗病毒、抗微生物等功效，具有保護(hù)心血管和預(yù)防高血壓、保護(hù)肝腎功能、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等作用.GSP最主要的藥理作用是抗氧化，是國(guó)際上公認(rèn)的一種高效抗氧化劑和自由基清除劑;此外，最近幾年對(duì)GSP藥理活性的研究，還發(fā)現(xiàn)GSP具有調(diào)節(jié)血脂作用［7］.由于血脂異常是AS形成的高危因素，抗氧化能力下降及活性氧水平升高是AS形成過程中的重要病理表現(xiàn);因此，在AS的防治方面，GSP可能具有重要的應(yīng)用前景.除GSP等藥物外，規(guī)律運(yùn)動(dòng)也具有改善血脂代謝及提高機(jī)體抗氧化能力的效應(yīng);現(xiàn)今，規(guī)律耐力運(yùn)動(dòng)抗AS的作用越來越受到醫(yī)學(xué)界的重視.然而，關(guān)于GSP聯(lián)合運(yùn)動(dòng)抗AS形成作用的文獻(xiàn)報(bào)道，目前較為缺乏.本研究試圖觀察GSP與系統(tǒng)中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)在抗AS形成作用中是否具協(xié)同效應(yīng)，并以ox-LDL為切入點(diǎn)對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討.本研究以期豐富AS的防治理論，為AS的防治提供參考.

1　材料與方法

1.1材料

成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，SPF級(jí)(合格證號(hào): SCXK桂2009－0002)，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供.大鼠自購(gòu)回后在標(biāo)準(zhǔn)嚙齒目動(dòng)物飼養(yǎng)籠以普通飲食適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，飼養(yǎng)過程中接受自然光照，保證良好的通風(fēng)，并將控制室溫27℃左右.大鼠食用的普通飼料由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，高脂飼料(普通飼料85.5%，豬油7%，膽固醇2%，膽酸鹽0.5%，白糖5%)由南京安立默科技有限公司配制.實(shí)驗(yàn)所需GSP(紅棕色粉末，純度95%)由天津市尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司提供，使用時(shí)采用0.9% NaCl將GSP配制成10mg/mL的溶液;本研究中受試鼠用藥劑量為90mg/d·kg，此劑量是參考Preuss［8］與Vinson［9］劑量標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合實(shí)際所制定.

1.2方法

1.2.1動(dòng)物分組與處理方式將60只大鼠隨機(jī)分為普通飲食對(duì)照組(C組，n =10)與高脂飲食對(duì)照組(H組，n =10)、高脂飲食安慰劑組(Hp組，n =10)、高脂飲食GSP組(Hg組，n =10)、高脂飲食運(yùn)動(dòng)組(Hm組，n =10)及高脂飲食運(yùn)動(dòng)聯(lián)合GSP組(Hmg組，n =10).根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)分組，相應(yīng)給予正常飼料、高脂飼料喂養(yǎng)15周，均自由攝水.同時(shí)，Hp組、Hg組每日清晨分別進(jìn)行一次性同等劑量的安慰劑(0.9% NaCl)、GSP灌胃; Hm組根據(jù)Bedford等［10］制定的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)，在小動(dòng)物跑臺(tái)(DSPT 202型，杭州立泰)上進(jìn)行中等強(qiáng)度(5°坡度、16 m/min速度，約65% VO2max強(qiáng)度)耐力跑運(yùn)動(dòng)，30min/d、6d/周、周日休息; Hmg組既接受Hg組的藥物干預(yù)、又接受Hm組的運(yùn)動(dòng)干預(yù).

1.2.2血清樣本制備及指標(biāo)測(cè)試受試鼠在末次干預(yù)實(shí)驗(yàn)后禁食24h，后行腹腔麻醉(2%戊巴比妥納)，立即股動(dòng)脈取血10ml，離心(3000rpm/min，15min)取血清，4℃保存待測(cè).血清總膽固醇(Total cholesterol，TC)、甘油三酯(Triglyceride，TG)濃度采用酶法測(cè)定，低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)及高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol，HDL-C)濃度采用選擇性沉淀法測(cè)定;計(jì)算動(dòng)脈硬化指數(shù)即(TC－HDL -C) /HDL -C.血脂4項(xiàng)上機(jī)測(cè)定儀器為上海棱光722 S型可見光分光光度計(jì)，測(cè)試試劑盒購(gòu)自北京北化康泰臨床試劑有限公司.

血清(Superoxide dismutase，SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量分別采用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法測(cè)定，上機(jī)測(cè)定儀器為上海棱光722 S型可見光分光光度計(jì); Ox-LDL濃度采用酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa法)測(cè)定，上機(jī)測(cè)定儀器為TECAN酶標(biāo)儀(Infinite M 1000型，瑞典).SOD、MDA試劑盒由南京建成生物科技有限公司提供，ox-LDL試劑盒由美國(guó)Santa cruz提供抗體.

1.2.3主動(dòng)脈組織形態(tài)學(xué)觀察取受試鼠主動(dòng)脈弓，剝除管壁外脂肪及結(jié)締組織，縱向剖開用生理鹽水沖洗，濾紙?jiān)嚫?，置?0%甲醛中固定一定時(shí)間，用于蘇丹Ⅳ或蘇木精-伊紅(Hematoxylin-eosin，HE)染色標(biāo)本的制備.

取10%甲醛固定24h后的一段主動(dòng)脈弓，生理鹽水沖洗，逐級(jí)脫水后制備厚約4um石蠟切片，行HE染色，置于Olympus生物顯微鏡(BX45型，日本)下觀察并拍照.

取10%甲醛固定數(shù)天后的剩余主動(dòng)脈弓，生理鹽水沖洗.置于蘇丹IV染液(蘇丹IV(g) ?70%乙醇(m1) ?丙酮為1?100?100比例)中進(jìn)行染色，20min后取出，用生理鹽水沖洗10min，再80%乙醇分色20min，最后用生理鹽水沖洗后置濾紙上拍照，Olympus體視顯微鏡(Szx 7型，日本)觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)，并用Image-pro plus圖象分析軟件計(jì)算粥樣硬化斑塊面積百分比.

1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析測(cè)得數(shù)據(jù)用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”(珚X±S)表示.統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS for windows 17.0版統(tǒng)計(jì)分析軟件完成，組間比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，在方差齊性的情況下用Least-Significant Difference (LSD)法進(jìn)行后效檢驗(yàn)，方差不齊的情況下用Tamhane's T2方法進(jìn)行后效檢驗(yàn).以P＜0.05作為差異具有顯著性的標(biāo)準(zhǔn).

2　結(jié)果

2.1大鼠體重變化

各組大鼠實(shí)驗(yàn)前(0周)體重均無顯著差異，實(shí)驗(yàn)1周后體重即開始顯著增加，且隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間進(jìn)行而不斷增加;與C組相比，各組體重在實(shí)驗(yàn)前6周并無顯著差異;然而，從實(shí)驗(yàn)第7周開始，Hm組、Hmg組體重增加速度明顯要慢于C組，即Hm組、Hmg組在7周過后的每周體重均要顯著小于C組(表1).

表1　各組大鼠體重變化情況(n =10，±S)Table 1 The Comparison of the weight changes of Rats(n =10，±S)

表1　各組大鼠體重變化情況(n =10，±S)Table 1 The Comparison of the weight changes of Rats(n =10，±S)

注:與0w比較，★P＜0.05;與C組比較，▲P＜0.05.ote: Compared with 0 Week，☆P＜0.05; Compared with group C，▲P＜0.05.

時(shí)間(周) Time(week) C組(g) Grpup C(g) H組(g) Grpup H(g) Hp組(g) Grpup Hp(g) Hg組(g) Grpup Hg(g) Hm組(g) Grpup Hm(g) Hmg組(g) Grpup Hmg(g) 0 141±10　144±11　139±12　138±11　142±12　140±13 1 153±12★　156±12★　153±11★　151±12★　152±15★　153±12★2 168±13★　169±12★　165±14★　166±13★　168±14★　169±16★3 185±15★　187±18★　183±15★　186±16★　192±17★　189±18★4 192±17★　194±17★　195±17★　197±15★　198±16★　195±17★5 218±19★　221±23★　216±21★　217±19★　218±21★　219±19★6 225±18★　227±21★　231±23★　234±22★　224±19★　225±18★7 242±19★　245±18★　241±22★　243±19★　225±22★▲　223±23★▲8 256±19★　254±20★　258±17★　257±21★　235±16★▲　238±19★▲9 265±17★　264±16★　268±18★　259±19★　242±17★▲　243±16★▲10　281±18★　283±19★　279±17★　275±18★　251±16★▲　253±19★▲11　293±18★　295±17★　289±18★　292±19★　263±16★▲　268±18★▲12　302±21★　304±22★　310±21★　312±23★　276±22★▲　279±24★▲13　314±23★　317±25★　321±24★　324±19★　283±25★▲　287±22★▲14　328±28★　329±27★　331±25★　333±27★　302±24★▲　306±23★▲15　352±29★　349±28★　354±27★　357±26★　312±25★▲　314±27★▲

2.2大鼠主動(dòng)脈蘇丹IV染色大體形態(tài)學(xué)觀察

C組大鼠血管內(nèi)膜表面平整光滑，結(jié)構(gòu)正常; H組內(nèi)膜表面粗糙、不平整，可見蘇丹IV反應(yīng)陽性的猩紅色區(qū)、點(diǎn)狀纖維斑塊連成一片，向管腔內(nèi)突出; Hp組內(nèi)膜結(jié)構(gòu)形態(tài)與H組基本相似; Hg組可見稍高于正常內(nèi)膜表面的纖維斑塊，斑塊面積較H組明顯減小; Hm組結(jié)構(gòu)變化與Hg組基本相似; Hmg組可見散在的纖維狀斑塊，其面積較Hg、Hmg組進(jìn)一步縮小(圖1).

2.3大鼠主動(dòng)脈粥樣斑塊面積百分比

本研究中，15周高脂飲食能引起大鼠主動(dòng)脈AS病變.就各高脂飲食組主動(dòng)脈粥樣斑塊面積百分比的比較來看，Hp組與H組之間無顯著差異，但Hg、Hm及Hmg組較H組均顯著下降;此外，Hmg組又顯著小于 Hm組及Hg組(表2).

2.4大鼠主動(dòng)脈HE染色形態(tài)學(xué)觀察

C組內(nèi)膜平整，內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，平滑肌排列整齊; H組內(nèi)膜明顯增厚，可見有內(nèi)皮細(xì)胞脫落及含有大量泡沫細(xì)胞的粥樣斑塊凸向管腔，平滑肌細(xì)胞增生明顯; Hp組主動(dòng)脈形態(tài)改變基本同H組; Hg組內(nèi)膜增生，也可見少許內(nèi)皮細(xì)胞脫落及含有一些泡沫細(xì)胞的粥樣斑塊、但不及H組明顯，平滑肌細(xì)胞增生; Hm組內(nèi)膜增厚、平滑肌排列欠整齊，可見有少量?jī)?nèi)皮細(xì)胞脫落; Hmg組內(nèi)膜輕度增厚、但其程度明顯小于其他各高脂飲食組，內(nèi)膜結(jié)構(gòu)基本完整、平滑肌排列基本整齊(圖2).

表2　各高脂飲食喂養(yǎng)組大鼠主動(dòng)脈斑塊面積百分比(n =10，±S)Table 2 The changes of aortae for pencent plaque area in rats fed with high fat diet(n =10，±S)

表2　各高脂飲食喂養(yǎng)組大鼠主動(dòng)脈斑塊面積百分比(n =10，±S)Table 2 The changes of aortae for pencent plaque area in rats fed with high fat diet(n =10，±S)

注:與H組比較，☆P＜0.05;與Hmg組相比，■P＜0.05.Note: Compared with group H，☆P＜0.05; Compared with group Hmg，■P＜0.05.

組別Group　　斑塊面積百分比Percent Plaque Area(%) H 14.13±3.42 Hp　13.96±3.53 Hg　5.36±2.17☆■Hm　4.83±1.85☆■Hmg　2.17±1.21☆

2.5大鼠血脂代謝水平

與C組相比，其余各組大鼠血清TC、TG、LDL-C濃度均顯著升高、HDL-C濃度顯著下降;與H組相比，Hp組血脂4項(xiàng)水平無顯著不同，但Hg、Hm、Hmg組TC、TG、LDL-C水平升高程度得到顯著控制、HDL-C水平下降程度得到顯著控制;與Hg、Hm組相比，Hmg組TC、TG、LDL-C的異常變化程度進(jìn)一步減小(表3).與C組相比，其余各組動(dòng)脈硬化指數(shù)即(TC-HDL-C) /HDL-C均顯著升高，其中H組或Hp組升高程度最為明顯，Hg或Hm組升高程度其次，Hmg組升高程度最小(表3).

2.6大鼠血清SOD、MDA及ox-LDL水平

如表4所示:與C組相比，其余各組血清SOD活性均顯著性下降;與H組相比，Hp組無顯著變化，但Hg、Hm及Hmg組的SOD活性下降程度顯著得到控制，且Hmg組下降程度最小.與C組相比，其余各組血清MDA含量均顯著上升;但Hg組、Hm組、Hmg組顯著性小于H組，Hmg組又顯著小于Hg、Hm組.氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)是反映低密度脂蛋白(LDL)氧化修飾程度的指標(biāo)，與C組相比，其余各組ox-LDL濃度均顯著升高;其中H組或Hg升高最為明顯，其次為Hg組或Hm組，升高程度最小的為Hmg組，且差異具顯著.

表3　各組大鼠血清中血脂指標(biāo)水平(n =10，±S)Table 3 The changes of serum for blood lipid tests in rats (n =10，±S)

表3　各組大鼠血清中血脂指標(biāo)水平(n =10，±S)Table 3 The changes of serum for blood lipid tests in rats (n =10，±S)

注:與C組比較，▲P＜0.05;與H組比較，☆P＜0.05;與Hmg組比較，■P＜0.05.下同.Note: Compared with group C，▲P＜0.05; Compared with group H，☆P＜0.05; Compared with group Hmg，■P＜0.05.Below is the same

組別Group 　TC(mmol/L)　TG(mmol/L)　LDL-C(mmol/L) 　HDL-C(mmol/L)　(TC－HDL-C)/HDL-C C 3.04±0.36　0.78±0.08　1.96±0.23　0.91±0.09　2.53±0.28 H　8.01±1.13▲　1.41±0.15▲　6.56±0.79▲　0.47±0.08▲　16.38±2.03▲Hp　8.03±1.21▲　1.37±0.14▲　6.61±0.75▲　0.49±0.07▲　16.42±2.11▲Hg 　5.98±0.95▲☆■　1.28±0.11▲☆■　4.23±0.51▲☆■　0.66±0.07▲☆　8.96±1.52▲☆■Hm 　5.29±0.96▲☆■　1.25±0.13▲☆■　3.93±0.46▲☆■　0.71±0.06▲☆　8.01±1.32▲☆■Hmg 　3.96±0.57▲☆■　1.13±0.09▲☆　2.91±0.39▲☆　0.73±0.08▲☆　4.68±1.29▲☆

3　討論

3.1高脂飲食大鼠血脂及血MDA、ox-LDL水平變化與動(dòng)脈粥樣硬化

現(xiàn)有大量文獻(xiàn)顯示高脂飲食可引起血脂異常變化;雖然可能由于高脂飼料配制成分的差異性及喂養(yǎng)周期、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬等不同，血脂異常變化情況并不完全一致，但均揭示血脂異常是AS形成的高危因素［2，11－13］.本研究中的受試鼠食用高脂飲食15周后，血脂代謝出現(xiàn)明顯異常;動(dòng)脈硬化指數(shù)［14］顯著升高，大鼠主動(dòng)脈出現(xiàn)AS病變.本研究還發(fā)現(xiàn)，高脂飲食大鼠血液SOD活性顯著下降，反映活性氧水平的MDA含量顯著升高.由于血液內(nèi)活性氧增多，氧化修飾LDL成為ox-LDL;因此，本研究中高脂飲食大鼠血液ox-LDL水平顯著升高.Ox-LDL可造成血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，促使單核細(xì)胞進(jìn)入血管壁并轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞，從而吞噬ox-LDL成為泡沫細(xì)胞.泡沫細(xì)胞積聚而成的脂質(zhì)核心是粥樣斑塊的主要成分，并增加了斑塊的不穩(wěn)定性［15－16］.Ox-LDL又能反過來激活巨噬細(xì)胞、T-淋巴細(xì)胞釋放自由基和細(xì)胞激素，引起血小板積聚而血管內(nèi)膜增厚、促進(jìn)AS斑快形成.筆者總結(jié)認(rèn)為:高脂飲食誘發(fā)機(jī)體血脂異常以及血液SOD活性下降、活性氧增多，最終通過誘發(fā)ox-LDL生成而導(dǎo)致AS病變.

表4　各組血清SOD、MDA及ox-LDL水平(n =10，±S)Table 4 The Comparison of SOD，MDA and ox-LDL Indexs in serum of rats (n =10，±S)

表4　各組血清SOD、MDA及ox-LDL水平(n =10，±S)Table 4 The Comparison of SOD，MDA and ox-LDL Indexs in serum of rats (n =10，±S)

組別Group SOD(U/mL) 　MDA(nmol/ml) ox-LDL (ug/L) C 　127.23±13.71 　2.29±0.51 　285.23±61.95 H 　43.59±8.86▲　5.73±1.61▲　684.73±97.65▲Hp 　44.67±8.38▲　5.68±1.68▲　691.57±95.79▲Hg 65.36±10.41▲☆■3.25±1.16▲☆■585.36±65.83▲☆Hm 59.21±9.28▲☆■3.43±1.25▲☆■563.79±71.58▲☆■Hmg 83.19±12.31▲☆　2.98±0.63▲☆398.15±75.79▲☆■

3.2中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)和GSP引起的高脂飲食大鼠血脂及血MDA、ox-LDL水平變化與動(dòng)脈粥樣硬化保護(hù)

3.2.1中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)引起的高脂飲食大鼠血脂及血MDA、ox -LDL水平變化與動(dòng)脈粥樣硬化保護(hù)大量研究表明，系統(tǒng)的耐力運(yùn)動(dòng)可改善血脂代謝［17－19］.本研究發(fā)現(xiàn)15周的中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)有明顯改善血脂代謝，下調(diào)動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù).此外，本實(shí)驗(yàn)中受試鼠成年后，中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)能控制其體重的增長(zhǎng).關(guān)于耐力運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)血脂作用的可能機(jī)制，也有些研究報(bào)道:耐力運(yùn)動(dòng)通過提高骨骼肌脂蛋白脂肪酶活性，活化β-氧化途徑，從而加速肌肉脂肪分解、增強(qiáng)肌肉組織對(duì)游離脂肪酸的攝取和氧化，同時(shí)促進(jìn)肌肉對(duì)非酯化脂肪酸和膽固醇的利用，所以血液TC、TG水平下降;耐力運(yùn)動(dòng)可能通過提高肝脂酶活性，促進(jìn)TC向高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol，HDL)轉(zhuǎn)移，后果是血液TC水平下降、HDL及HDL-C水平增加［20］.趙斐等［21］則指出高脂飼料可引起LDL清除劑水平下降，而耐力運(yùn)動(dòng)可顯著增強(qiáng)血脂異常大鼠肝臟LDL清除劑的mRNA表達(dá)，因而可控制血液LDL及LDL-C水平的升高程度.然而，關(guān)于耐力運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)血脂作用的機(jī)制尚需要進(jìn)一步深入研究.此外，本研究中的運(yùn)動(dòng)干預(yù)可通過緩解高脂飲食大鼠SOD活性的下降程度來緩解活性氧的升高程度.總之，本研究中的運(yùn)動(dòng)干預(yù)通過改善高脂飲食大鼠血脂代謝，并通過提高血液SOD活性而控制活性氧生成，最終減少了LDL的氧化修飾產(chǎn)物(ox-LDL)的生成;由于ox-LDL生成得到有效控制，所以運(yùn)動(dòng)有效抵抗了AS的形成［22］.3.2.2 GSP引起的高脂飲食大鼠血脂及血MDA、ox -LDL水平變化與動(dòng)脈粥樣硬化保護(hù)研究發(fā)現(xiàn)GSP的抗氧化作用呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系，即在一定劑量范圍內(nèi)，才能發(fā)揮出最佳抗氧化效應(yīng).在利用GSP抗動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的實(shí)驗(yàn)研究中，Vinson等［9］采用2種劑量標(biāo)準(zhǔn)(50mg/d·kg，100mg/d·kg)的GSP灌胃AS病變鼠，分別使主動(dòng)脈泡沫細(xì)胞覆蓋面積減少了50%和63%; Preuss等［8］發(fā)現(xiàn)100mg/d·kg劑量的GSP對(duì)高膽固醇患者血脂代謝有明顯改善作用;同時(shí)血液中ox-LDL自身抗體下降而機(jī)體患AS風(fēng)險(xiǎn)減小.由于GSP劑量過大反而會(huì)損傷其抗氧化作用.因此，本研究中受試鼠GSP劑量標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定成略低于100mg/d·kg，即90mg/d·kg.

本研究發(fā)現(xiàn)，GSP能顯著改善高脂飲食大鼠血脂代謝及下調(diào)其動(dòng)脈硬化指數(shù).Terra等［23］發(fā)現(xiàn)GSP能減少泡沫細(xì)胞中的TC、酯化膽固醇以及TG的堆積，并且是通過下調(diào)調(diào)控膽固醇的關(guān)鍵基因表達(dá)而實(shí)現(xiàn); GSP最終使泡沫細(xì)胞減少而發(fā)揮抗AS效應(yīng).然而，關(guān)于GSP調(diào)血脂、抗AS效應(yīng)的確切機(jī)制尚需要大量深入研究.本研究還發(fā)現(xiàn)GSP能顯著緩解高脂飲食大鼠血液SOD活性下降程度及活性氧水平的升高程度.總之，本研究中GSP通過改善高脂飲食大鼠血脂代謝，并通過提高SOD活性而抑制活性氧的異常升高水平，最終是通過緩解高脂飲食大鼠ox-LDL水平升高程度來發(fā)揮抗AS形成效應(yīng).

此外，本研究中的中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)與GSP干預(yù)，對(duì)調(diào)節(jié)高脂飲食大鼠血脂代謝及控制活性氧水平升高均具有協(xié)同作用，且對(duì)血液ox-LDL水平升高及AS病變也具有連鎖樣協(xié)同抵抗效應(yīng).

4　結(jié)論

高脂飲食可引起大鼠血脂紊亂、動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)增加，引起血液SOD活性下降而清除活性氧能力下降，最終引起血液ox-LDL水平增加而誘發(fā)AS.中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)與GSP干預(yù)均能對(duì)上述異常變化起到緩解作用;而中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)恰當(dāng)結(jié)合GSP具有協(xié)同連鎖抵抗效應(yīng).

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Effects and Its Mechanism of Moderately Intense Endurance Exercise and Grape Seed Proanthocyanidin on Atherosclerosis
Formation in Rats Fed with High-Fat Diet

DENG Wei
(Sports Work Department，Tarim University，Alaer 843300，China)

Abstract:Objective: To explore the effect and its mechanism of moderately intense endurance exercise and grape seed proanthocyanidin (GSP) on atherosclerosis (AS) formation in rats fed with high-fat diet.Methods: 60 grown male SD rats were randomly divided into normal diet control group(Group C)，high-fat diet control group (Group H)，high-fat diet and placebo group (Group Hp)，high-fat diet and GSP group (Group Hm)，high-fat diet and moderately intensity endurance exercise group (Group Hm)，high-fat diet and GSP associate with moderately intensity endurance exercise group(Group Hmg).Exclude group C，the other groups rats were fed with high-fat diet.At the same time，the groups who were fed with high-fat diet were intervened by GSP and moderately intense endurance exercise.We have observed whether the AS lesions existed in rats，analyze d AS percent plaque area，and detected serum serum Total Cholesterol (TC)，Triglyceride (TG)，Low Density Lipoprotein Cholesterol (LDL –C)，High Density Lipoprotein Cholestrerol (HDL-C) and Superoxide Dismutase (SOD)，Malondialdehyde (MDA) and Oxidative Low Density Lipoprotein (ox-LDL) indexs.Results: Serum TC，TG，LDL-C，MDA and ox-LDL levels increased significantly in rats fed with high-fat diet，and HDL-C，SOD decreased significantly.In the meanwhile，Atherosclerotic Index (AI) increased significantly，and the aortic under the sultan IV dye，the Hematoxylin-Eosin (HE) put up AS morphology lesion.But compared with Group H，the above abnormal changes for different degrees got the chain-like relief in Group Hg，Group Hm and Group Hmg.Conclusion: GSP and moderately intense endurance exercise can improve the abnorm of lipids metabolism，and enhance the organism’s ability of antioxygen by increasing the activity of SOD and finaly prevent AS formation with controlling the concentration of ox-LDL，and GSP combined with moderately intense endurance exercise can contribute to express the advantages of synergistic effect.

Key words:moderately intense endurance exercise; grape seed roanthocyanid; atherosclerosis; oxidative low density lipoprotein

作者簡(jiǎn)介:鄧偉(1982)，男，講師，主要從事體育學(xué)的研究.

基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金(31060146).

收稿日期:2014－11－03

DOI:10.14182/J.cnki.1001－2443.2015.02.017

文章編號(hào):1001－2443(2015) 02－0192－07

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A