孫 穎，郭勇英，李紅蓉，劉紅利，2，魏 聰

［1．南京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，江蘇南京 210046；2．河北以嶺醫(yī)藥研究院，河北石家莊 050035；3．國家中醫(yī)藥管理局重點研究室（心腦血管絡(luò)?。颖笔仪f 050035；4．河北省絡(luò)病重點實驗室，河北石家莊 050035；5．河北醫(yī)科大學(xué)，河北石家莊 050017］

通心絡(luò)對高脂飲食喂養(yǎng)大鼠糖脂代謝的影響

孫 穎1，郭勇英2，5，李紅蓉2，5，劉紅利1，2，魏 聰2，3，4

［1．南京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，江蘇南京 210046；2．河北以嶺醫(yī)藥研究院，河北石家莊 050035；3．國家中醫(yī)藥管理局重點研究室（心腦血管絡(luò)?。颖笔仪f 050035；4．河北省絡(luò)病重點實驗室，河北石家莊 050035；5．河北醫(yī)科大學(xué)，河北石家莊 050017］

Effects of Tongxinluo on glucose metabolism in rat fed with high-fat diet

SUN Ying1，GUO Yong-ying2，5，LI Hong-rong2，5，LIU Hong-li1，2，WEI Cong2，3，4
［1．Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210046，China；2．Hebei Yiling Medical Research Institute，Shijiazhuang 050035，China；3．Key Research Centre of State Administration of Traditional Chinese Medicine（Cardiovascular Collateral Dis-ease），Shijiazhuang 050035，China；4．Key Laboratory of Col-lateral Disease of Hebei Province，Shijiazhuang 050035，China；5．Hebei Medical University，Shijiazhuang 050017，China］

網(wǎng)絡(luò)出版時間：2015－7－22 10：42 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20150727．0901．034．html

肥胖常并發(fā)糖脂代謝紊亂等疾病，體脂堆積引起的代謝紊亂嚴(yán)重影響人類健康［1］。通心絡(luò)膠囊由人參、水蛭等中藥組成，具有益氣活血的功效，研究報道通心絡(luò)膠囊具有調(diào)節(jié)大鼠血脂的作用［2］，本研究觀察通心絡(luò)對高脂飲食喂養(yǎng)大鼠糖脂代謝及糖脂代謝相關(guān)蛋白的影響，以探討其調(diào)節(jié)糖脂代謝的相關(guān)機制。

1　材料

1．1實驗動物 SD大鼠，180～220克，♂，SPF級，購自中國食品藥品檢定研究院，許可證編號：SCXK（京）2009－0017。

1．2藥品與試劑 通心絡(luò)膠囊，石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供，批號：20120512；吡格列酮，杭州中美華東制藥有限公司生產(chǎn)，批號：20131202；油紅O染色試劑、肝糖原試劑盒，購于南京建成科技有限公司；PPARα、AMPKα、p-AMPKα、ACCα、p-ACCα、PEPCK抗體，購于Abcam公司。

1．3實驗飼料 普通飼料，購于河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心；高脂飼料自行配制，配方：面粉10%、豆粕33%、豆粉20%、豬油30%、魚粉2%、麥麩2%、骨粉3%。

2　方法

2．1分組與給藥 10只♂SD大鼠設(shè)為正常組（NF），給予普通飼料；30只♂SD大鼠，給予高脂飼料，6周后分為：模型組（HF組）、通心絡(luò)組（TXL）、吡格列酮組（PLZ）。通心絡(luò)及吡格列酮均以純水配制，分別以大鼠體重0.4 g·kg－1· d－1、10 mg·kg－1·d－1灌胃。NF組及HF組給予純水灌胃，高脂飼料喂養(yǎng)及給藥6周。

2．2油紅O染色 新鮮肝臟組織冰凍切片，油紅O方法染色。

2．3生化指標(biāo)及肝糖原檢測 全自動生化分析儀檢測血清中血脂四項（TG、TC、LDL-C、HDL-C）、空腹血糖（FBG）、游離脂肪酸（NEFA）；蒽酮法檢測肝糖原含量。

2．4肝臟糖脂代謝相關(guān)蛋白表達檢測 根據(jù)參考文獻［3］，檢測肝臟組織PPARα、AMPKα、p-AMPKα、ACCα、p-ACCα、PEPCK蛋白表達。

2．5統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件分析，數(shù)據(jù)均用±s表示，組間比較采用單因素方差分析。

3　結(jié)果

3．1肝臟油紅O染色 HF組大鼠較NF組大鼠肝臟脂肪蓄積增加，TXL組較HF組大鼠肝臟脂肪蓄積減輕。

3．2通心絡(luò)對大鼠血清生化指標(biāo)及肝糖原的影響 HF組大鼠較NF組大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、NEFA升高，HDL-C、肝糖原降低（P＜0.01）。TXL組大鼠較HF組大鼠FBG、TC、TG、LDL-C及NEFA下降，肝糖原增加（P＜0.05）。見Tab 1。

3．3通心絡(luò)對大鼠肝臟PPARα、PEPCK、p-AMPK、AMPK、p-ACC、ACC表達的影響 HF組較NF組大鼠肝臟PPARα、p-AMPKα、p-ACCα下降，PEPCK表達升高（P＜0.01）；TXL組較HF組大鼠肝臟PPARα、p-AMPK、p-ACC表達升高、PEPCK表達減少（P＜0.05）。見Tab 2。

4　討論

高脂飲食是造成糖脂代謝紊亂的主要原因之一［4］，可造成血脂異常，并刺激肝臟磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶（PEP-CK）表達，促進肝糖異生［5］。腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）可抑制肝臟糖異生，并通過使乙酰輔酶A羧化酶（ACC）磷酸化，抑制脂肪酸的合成［6］。過氧化物酶增殖激活受體α（PPARα）在肝臟脂質(zhì)代謝中起到重要作用，可調(diào)節(jié)脂類的攝取和氧化［7］。通心絡(luò)膠囊調(diào)節(jié)糖脂代謝的機制可能與干預(yù)肝臟PPARα、PEPCK表達及AMPK、ACC磷酸化有關(guān)，這也可能是益氣活血類中藥調(diào)整糖脂代謝的可能機制之一。

（致謝：本實驗由河北以嶺醫(yī)藥研究院、國家中醫(yī)藥管理局重點研究室指導(dǎo)，于河北省絡(luò)病重點實驗室完成，感謝以上科室對本實驗提供的技術(shù)指導(dǎo)及資金支持。）

Tab 1 Effects of Tongxinluo on biochemical parameters in blood and hepatic glycogen of fat rats（±s，n＝6）

Tab 1 Effects of Tongxinluo on biochemical parameters in blood and hepatic glycogen of fat rats（±s，n＝6）

**P＜0．01 vs NF group；＃P＜0．05，＃＃P＜0．01 vs HF group

Group　TC／mmol·L－1TG／mmol·L－1LDL-C／mmol·L－1HDL-C／mmol·L－1NEFA／mmol·L－1FBG／mmol·L－1Hepatic glycogen／mg·L－1NF　0．97±0．16　0．45±0．05　0．17±0．07　1．05±0．34　0．20±0．08　5．36±0．71　24．82±4．10 HF　2．66±0．74**　2．10±1．06**　0．36±0．07**　0．63±0．13**　0．80±0．17**　10．39±0．31**　14．56±2．12**TXL　1．02±0．19＃?！?．87±0．20＃　0．24±0．07?！?．78±0．21　0．59±0．15?！?．05±0．95　18．82±0．19＃PLZ　1．58±0．31?！?．97±0．19＃　0．24±0．01＃?！?．59±0．18＃　0．6±0．16＃?！?．32±0．83?！?9．23±0．84＃

Tab 2 Effects of Tongxinluo on protein expression of PPARα，PEPCK，p-AMPK，AMPK，p-ACC，ACC in livers of fat rats（±s，n＝3）

**P＜0．01 vs NF group；＃P＜0．05，＃＃P＜0．01 vs HF group

Group　PEPCK　PPARαp-AMPK　AMPK　p-ACC　ACC NF　1．32±0．15　0．87±006　0．88±0．04　0．99±0．05　0．68±0．04　0．78±0．01 HF　3．07±0．32**　0．40±0．11**　0．67±0．03**　0．96±0．02　0．30±0．02**　0．71±0．05 TXL　1．64±0．26?！?．75±0．04?！?．76±0．02＃?！?．00±0．02　0．45±0．01＃?！?．78±0．06 PLZ　1．86±0．18?！?．70±0．08?！?．76±0．03＃＃　0．99±0．03　0．47±0．02＃＃0．77±0．03

參考文獻：

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［1］ Li Q．The research for progress of promote obesity with type 2 dia-betes［J］．J Clin Int Med，2012，29（3）：152－4．

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［2］ Huang X Z，Liu X Y，Yu X Y，et al．Treatment of Tongxinluo on high blood pressure，high blood sugar combined hypercholesterol-emia rats［J］．China J Chin Mat Med，2011，36（2）：224－7．

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［4］ Wang W P，Wang Y M，Wang L P．The effect of sibutramine hydro-chloride on expression of hypothalamus orexin system gene in high-fat dietary obesity rats［J］．Chin Pharmacol Bull，2008，24（2）：265－8．

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［6］ Guo S．Insulin signaling，resistance，and the metabolic syndrome：insights from mouse models into disease mechanisms［J］．J Endo-crinol，2014，220（2）：T1－T23．

［7］ Leone T C，Weinheimer C J，KeIIy D P．A criticall role for the per-oxisome proliferator-activated receptor alpha（PPARalpha）in the cellular fasting response：the PPARaIpha-null mouse as a model of fatty acid oxidation disorders［J］．Proc Natl Acad Sci USA，1999，96（13）：7473－8．

中國圖書分類號：R-332；R282.71；R322.47；R349.1；R589.1；R589.2

關(guān)鍵詞：通心絡(luò)；肥胖大鼠；糖脂代謝；AMPK；ACC；PEPCK；PPARα

Key words：Tongxinluo；fat rat；glucose metabolism；AMPK；ACC；PEPCK；PPARα

作者簡介：孫 穎（1987－），女，博士生，研究方向：中醫(yī)臨床基礎(chǔ)，E-mail：sunying2006＠126．com；魏 聰（1979－），女，博士，主任醫(yī)師，研究方向：絡(luò)病學(xué)，通訊作者，E-mail：weitcm＠163．com

基金項目：國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃（973計劃）資助項目（No 2012CB518606）

收稿日期：2015－04－23，修回日期：2015－05－26

文獻標(biāo)志碼：A

文章編號：1001－1978（2015）08－1181－02

doi：10．3969／j．issn．1001－1978．2015．08．031