不同粒徑木香粉體對有效成分溶出度的影響*

★年娟娟史亞軍*通信作者：史亞軍。E-mail:328573751@qq.com。焦璇王媚郭東艷(陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西 咸陽 712046)

摘要：目的:研究不同粒徑木香粉體中去氫木香內(nèi)酯的溶出度，探討粒徑對粉體有效成分溶出的影響。方法：采用槳法進(jìn)行體外溶出試驗(yàn)，HPLC法測定不同粒徑木香粉體中去氫木香內(nèi)酯在不同時(shí)間點(diǎn)的溶出量，計(jì)算其累積溶出率并進(jìn)行比較。結(jié)果：木香細(xì)粉的溶出率最高，普通粉體次之，超微粉體最低。結(jié)論：對于具有揮發(fā)性的藥材，適當(dāng)?shù)姆鬯榱６葧黾佑行С煞值娜艹觯竭^小反而會使溶出度降低。

關(guān)鍵詞：木香；超微粉碎；溶出度

木香為菊科植物木香(AucklandialappaDecne.)的干燥根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，有行氣止痛，溫中和胃之效，中醫(yī)常用于治療胃部脹滿、消化不良、嘔吐、腹痛和腹瀉等癥[1]。木香主含揮發(fā)油，其中主要成分為木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯，具有抗菌、抗腫瘤、抗?jié)兊茸饔?，可作為木香質(zhì)量控制的主要指標(biāo)[2-4]。木香在許多中成藥中以粉碎物投料，但其中含有的揮發(fā)性成分均有不同程度的損失，不同粒度的木香粉末也有著不同的溶出度，一般來講，藥材經(jīng)過粉碎，其有效成分充分暴露，有利于藥物的釋放和吸收，從而提高生物利用度[5]，但隨著粉碎時(shí)間延長，溫度升高，其有效成分也會逐漸散失，為了探討不同粒度木香溶出度，本文對木香普通粉體、細(xì)粉及超微粉體的溶出率進(jìn)行了比較研究。有文獻(xiàn)對22批木香藥材和飲片中木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯含量進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)去氫木香內(nèi)酯的含量均高于木香烴內(nèi)酯，揭示去氫木香內(nèi)酯的含量測定更有利于藥材及產(chǎn)品的質(zhì)量控制[6-7]，因此，本文以去氫木香內(nèi)酯的含量為指標(biāo)探討不同粒徑木香的溶出行為，預(yù)期為含木香制劑前處理提供科學(xué)依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器ZRS-8G智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)無線電廠)，戴安U-3000高效液相色譜儀，BP-121S電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，QE-300高速萬能粉碎機(jī)(浙江屹立工貿(mào)有限公司)，HAO-30C超微粉碎機(jī)(廣州市賽豪機(jī)械有限公司)，KH-400KDE型高功率數(shù)控超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)，SHB-Ⅲ真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)。

1.2試藥木香飲片(西安盛興中藥飲片有限責(zé)任公司，經(jīng)陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥教研室胡本祥教授鑒定為菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根)，去氫木香內(nèi)酯對照品(批號：111525-201008，中國藥品生物制品檢定所)，甲醇(色譜純，美國Honeywell公司)，水為純凈水，其余試劑均為分析純。

2方法

2.1不同粒徑木香粉體制備普通粉體的制備：取木香飲片適量，采用萬能粉碎機(jī)粉碎，過六號篩(100目)置于干燥器中，備用。

細(xì)粉的制備：取木香飲片適量，采用萬能粉碎機(jī)粉碎，過九號篩(200目)置于干燥器中，備用。

超微粉體的制備：取木香普通粉體，經(jīng)超微粉碎機(jī)粉碎得超微粉體(300目)，置于干燥器中，備用。

2.2溶出度測定

2.2.1色譜條件色譜柱：Agilent TC-C18柱(4.6mm×250 mm，5 μm)，流動相：甲醇-水65∶35，流速：1.0 mL/min，進(jìn)樣量為10 μL，柱溫25℃，檢測波長225 nm。色譜圖見圖1。

2.2.2對照品溶液的制備精密稱取去氫木香內(nèi)酯對照品6.84mg，加甲醇溶解并定容至10 mL，即得濃度為0.6840mg/mL的對照品儲備溶液，備用。

去氫木香內(nèi)酯對照品(A)、樣品溶出液(B)、空白溶液(C)

2.2.3供試品溶液的制備取溶出液適量，0.45 μm微孔濾膜過濾，備用。

2.2.4線性關(guān)系考察[8]取上述去氫木香內(nèi)酯對照品溶液適量，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，分別進(jìn)樣1,2,4,8,10 μL，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程為：Y=26.053X-1.3193(r=0.9999)，線性范圍為0.684~6.84 μg。

2.2.5精密度試驗(yàn)取上述對照品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，進(jìn)樣量10μL，測定峰面積，計(jì)算去氫木香內(nèi)酯的RSD為0.96%，表明儀器精密度良好。

2.2.6重復(fù)性試驗(yàn)取同一批次木香樣品5份，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，去氫木香內(nèi)酯的RSD為1.29%，表明方法重復(fù)性良好。

2.2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件分別于0,4,8,12,24h進(jìn)行測定，去氫木香內(nèi)酯的RSD為1.30%，表明供試品在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定[9]。

2.2.8加樣回收率試驗(yàn)[10]精密吸取已知去氫木香內(nèi)酯含量的樣品溶出液2.0 mL，置于5mL容量瓶中，共6份，每2份一組，各組分別加入去氫木香內(nèi)酯對照品溶液(0.0544mg/mL)1.6 ,2.0 ,2.4mL，定容，并經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，測得平均加樣回收率為101.65%，RSD為1.25%。

2.2.9藥材中去氫木香內(nèi)酯含量測定[11]取藥材粉末約0.3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，放置過夜，超聲處理(功率250 W，頻率50 kHz)30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，0.45 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定。

2.2.10溶出度測定按《中國藥典》2010年版二部附錄X C第二法(槳法)進(jìn)行測定。準(zhǔn)確稱取各藥材粉末2g(普通粉體、細(xì)粉和超微粉體中去氫木香內(nèi)酯含量分別為17.20,17.54,12.40mg/g)，投入溶出杯中，以經(jīng)脫氣處理的0.1 mol/L的鹽酸為溶出介質(zhì)，體積為800 mL，溫度為37℃，轉(zhuǎn)速為100 r/min，進(jìn)行溶出實(shí)驗(yàn)。分別在2,5,10,20,30,60,90,120 min取樣2.5mL，同時(shí)補(bǔ)充同溫溶出介質(zhì)2.5mL，溶出液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，備用[12，13]。按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，測得各樣品中去氫木香內(nèi)酯的含量，計(jì)算各個(gè)時(shí)間點(diǎn)三種粉體的溶出量及累積溶出率。結(jié)果見表1-2。

表1　不同粒徑木香粉體中去氫木香內(nèi)酯的平均溶出量

根據(jù)Weibull方程對溶出數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，計(jì)算出普通粉體、細(xì)粉和超微粉體的T50及Td(T50、Td分別為藥物溶出50%和63.2%所需時(shí)間)，并進(jìn)行方差分析，結(jié)果如表3。

T50反映前半段的溶出特征，由表3可知，三種粉體在前半段溶出無顯著性差異。Td反映后半段溶出規(guī)律，結(jié)果說明三種粉體在后半段溶出具有顯著性差異，但細(xì)粉與超微粉體之間并無顯著性差異。

表2不同粒徑木香粉體中去氫木香

t/min累積溶出率/%普通粉體細(xì)粉超微粉體222.20±0.0117.91±0.1125.75±0.32552.45±0.1956.42±0.9259.53±1.191053.25±0.4757.91±0.5560.31±0.712053.51±0.4862.41±0.2762.10±0.303056.80±1.4163.09±0.1062.92±0.836061.25±0.4964.03±0.0666.36±0.619058.54±0.8263.99±0.2365.90±0.7412057.82±0.3863.85±0.0166.02±0.71

表3　不同粒徑木香粉體的溶出參數(shù)及分析結(jié)果

3討論

一般情況下，隨著藥物粉體粒徑減小，藥物與溶媒接觸面積增大，有效成分溶出增多。由表1和圖2可以看出，木香普通粉體、細(xì)粉和超微粉體中去氫木香內(nèi)酯的溶出率基本在60min達(dá)到最大，最大溶出率分別為61.25%、64.03%和66.36%，細(xì)粉和超微粉體的溶出率明顯大于普通粉體，但由表1可知，超微粉的溶出量明顯少于另外兩種粉體，這是因?yàn)殡S著粉體粒徑減小，比表面積增大，增大了粒子與溶出介質(zhì)的有效接觸面積，縮短了溶劑進(jìn)入粒子中心的距離，從而使有效成分溶出加快[14]；但藥材進(jìn)行超微粉碎時(shí)，隨著時(shí)間延長，揮發(fā)性成分可能會有所散失(超微粉中去氫木香內(nèi)酯含量僅為12.40mg/g )；且隨著粉體粒徑的減小，粒子表面能急劇增大，粒子產(chǎn)生團(tuán)聚，有效成分的溶出不再進(jìn)一步增加，說明適當(dāng)?shù)臏p小粉體粒徑能使有效成分的溶出增加，但不能盲目的為了增加溶出度而將藥材進(jìn)行超微粉碎(尤其是主要成分具有揮發(fā)性的藥材)，甚至納米化，要將藥材主要成分的性質(zhì)結(jié)合起來，選擇合適的粉碎粒徑，以最大化發(fā)揮其藥效。

20世紀(jì)90年代粉體技術(shù)科學(xué)家提出了粉體的粒子設(shè)計(jì)理念，即根據(jù)粉體的理化性質(zhì)，在微觀層面對粉體結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)，進(jìn)而提高粉體的使用性能的一門新技術(shù)[15]。課題組以經(jīng)典處方生脈散為對象研究了該技術(shù)的可行性。生脈散由人參、麥冬和五味子組成，設(shè)計(jì)程序是麥冬與五味子混合粉碎，組成粒子團(tuán)，再將人參超微粉碎成納米粒子，包裹在最外層。最終設(shè)計(jì)出的生脈散色白微黃，有濃郁的參味參氣，幾乎聞不到麥冬與五味子的味道。這樣，切斷了五味子、麥冬與外界的直接接觸，減少了五味子揮發(fā)油的散失，避免了麥冬多糖的吸潮，且充分利用了人參皂苷對五味子素的増溶作用增強(qiáng)藥效，充分說明該技術(shù)具有一定的可行性。

參考文獻(xiàn)

[1]張建春,蔡雅明,周德斌,等.木香的研究進(jìn)展[J].甘肅科技,2010,26(20):170-173.

[2]魏華,彭勇,馬國需,等.木香有效成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥,2012,43(2):613-617.

[3]錢偉,徐溢,王昌瑞,等.木香藥材活性成分及其結(jié)構(gòu)修飾研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2012,24:1 857-1 865,1 874.

[4]王永兵,王強(qiáng),毛福林,等.木香的藥效學(xué)研究[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2001,32(2):146-148.

[5]孫源源,杜光.超微粉碎技術(shù)在中藥中的應(yīng)用進(jìn)展[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(1):69-71.

[6]徐宇,方魯延,談紅,等.HPLC法測定木香中去氫木香內(nèi)酯的含量[J].中草藥,2004,35(12):1 416-1 417.

[7]王永兵,許華,張玉鳳,等.木香藥材的質(zhì)量評價(jià)研究—HPLC法測定木香中2種倍半萜內(nèi)酯的含量[J].藥物分析雜志,2000,20(6):366-367.

[8]李澤友,潘揚(yáng),丁崗.木香藥材中木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯的定性和定量研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2004,15(11):745-746.

[9]熊慧,郭舟,趙靜文,等.梔子超微粉與細(xì)粉中梔子苷的體外溶出度比較[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(21):53-55.

[10]吳小明,梁少瑜,程文勝,等.三七普通細(xì)粉與超微粉中三七皂苷 R1、人參皂苷 Rb1及人參皂苷 Rg1體外溶出行為的比較研究[J].中草藥,2014,44(24):3 489-3 492.

[11]中國藥典2010版.一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:58.

[12]劉莉,吳柳萍,劉強(qiáng).甘草不同粒徑粉末的粉體特性和體外溶出實(shí)驗(yàn)研究[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,30(5):179-1 081.

[13]張定堃,林俊芝,秦春鳳,等.微粉化對穿心蓮內(nèi)酯粉體學(xué)性質(zhì)和溶出度的影響[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,2014,45(4):325-329.

[14]丁志平,孫毅坤,喬延江.不同粒徑黃連粉體中小檗堿體外溶出研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2004.27(3):60-62.

[15]李鳳生,姜煒,付廷明,等.藥物粉體技術(shù)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2007:272.

(收稿日期：2015-03-06)編輯：曾文雪

*基金項(xiàng)目：陜西省教育廳科研計(jì)劃項(xiàng)目(12JS038)；陜西省重點(diǎn)學(xué)科(中藥制藥學(xué))資助項(xiàng)目；陜西省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2013KCT-26)。

中圖分類號：R283

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A