過氧乙酸消毒劑對胃鏡污染枯草桿菌黑色變種芽孢的消毒研究

浙江省教育廳科研項(xiàng)目,編號：Y201430623

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目,編號：2014KYA063

·論著·

吳忱姣1，張弘炎2，顧青1，鐘肖琪1，顧立英1，程瑛1，胡海霞1，方英1

消化內(nèi)鏡檢查是胃腸道疾病診治的重要手段，然而內(nèi)鏡檢查可能導(dǎo)致組織黏膜損傷，如果消化內(nèi)鏡清洗消毒不徹底，極易引起醫(yī)院感染[1-2]。有效提高內(nèi)鏡清洗消毒水平，對于減少醫(yī)源性感染有著重要意義。過氧乙酸是一種廣譜、高效、環(huán)保的消毒劑，對病毒、細(xì)菌、真菌和芽胞均能迅速殺滅，常用于環(huán)境、果蔬、食具等物品表面的消毒，但在內(nèi)鏡清洗消毒中的應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)有限。本研究旨在分析過氧乙酸消毒劑對枯草桿菌黑色變種芽孢人工污染胃鏡的清洗消毒效果，為臨床內(nèi)鏡清洗消毒工作提供參考?，F(xiàn)將人工模擬試驗(yàn)結(jié)果報告如下。

1材料與方法

1.1試劑和器材本研究采用的胃鏡為GIF-160胃鏡，智能化清洗消毒水槽1套；試驗(yàn)菌株為枯草桿菌黑色變種芽孢ATCC 9372，由浙江省疾病預(yù)防控制中心提供；消毒劑為過氧乙酸消毒劑、戊二醛消毒劑、鄰苯二甲醛消毒劑，培養(yǎng)基為胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基，過氧乙酸、戊二醛和鄰苯二甲醛的中和劑分別為0.5%硫代硫酸鈉+1%吐溫80、0.5%甘氨酸+1%吐溫80、0.5%甘氨酸+1%吐溫80，均以磷酸鹽緩沖液為基礎(chǔ)溶劑。

1.2芽孢懸液制備按照《消毒技術(shù)規(guī)范(2002版)》規(guī)定，取凍干菌第三代肉湯培養(yǎng)物，接種于羅氏培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)7 d。經(jīng)改良芽孢染色計(jì)數(shù)合格后，收集菌懸液，并制成實(shí)驗(yàn)用菌懸液。菌懸液保存在4℃冰箱。

1.3人工模擬試驗(yàn)用無菌注射器抽取4 ml 菌懸液，從待檢胃鏡活檢口注入，水平位放置5~8 min，制成污染胃鏡30根，而后進(jìn)行胃鏡清洗消毒處理。按所用消毒劑分為3組，每組清洗消毒胃鏡10根。過氧乙酸組和鄰苯二甲醛組分別用相應(yīng)的消毒劑浸泡5 min，戊二醛組用戊二醛消毒劑浸泡10 min，其余清洗消毒流程一致，按內(nèi)鏡清洗消毒常規(guī)流程操作。

1.4清洗消毒后采樣選用消毒劑相應(yīng)的中和劑，中和劑本身不影響消毒效果。用無菌注射器抽取20 ml含相應(yīng)中和劑的緩沖液，從待檢胃鏡活檢口注入，用無菌瓶從活檢出口收集，再通入無菌毛刷，剪去露出的毛刷頭，及時送檢，2 h內(nèi)檢測。

1.5清洗消毒效果檢測將不同實(shí)驗(yàn)組送檢液充分混勻震蕩，取1 ml，接種于直徑90 mm無菌平皿，一式兩份，每個平皿分別加入已融化的45~48℃培養(yǎng)基15~18 ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，放入干凈塑料袋內(nèi)，在37℃培養(yǎng)72 h后計(jì)數(shù)?；厥找炎饔迷谖哥R腔體5~8 min后的菌懸液作為陽性對照作細(xì)菌計(jì)數(shù)，同樣也通入無菌毛刷，剪去毛刷頭培養(yǎng)。設(shè)陰性對照組以觀察同次試驗(yàn)用相關(guān)溶液和培養(yǎng)基有無污染。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法由于各組胃鏡菌落數(shù)不呈正態(tài)分布，所以采用中位數(shù)和四分位數(shù)區(qū)間表示，不同組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)(Kruskal-WallisH檢驗(yàn))，兩兩比較用秩和檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析由SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件完成。

2結(jié)果

2.13組胃鏡清洗消毒效果比較見表1。

表1　3組胃鏡清洗消毒效果比較

注：1)與戊二醛組和鄰苯二甲醛組比較P<0.01，2)與鄰苯二甲醛組比較P>0.05

2.23組清洗消毒時間由于不同處理組消毒劑浸泡時間存在差異，過氧乙酸組和鄰苯二甲醛組清洗消毒所需時間均為19 min，而戊二醛組清洗消毒所需時間為24 min。

3討論

3.1加強(qiáng)內(nèi)鏡清洗消毒研究的意義消化內(nèi)鏡檢查在胃腸疾病診治中起極為重要的作用，每年美國有超過500萬例次可接受消化內(nèi)鏡檢查[3]。作為一種侵入性操作，消化內(nèi)鏡檢查時可能損傷黏膜，如果內(nèi)鏡清洗消毒不徹底，可引發(fā)醫(yī)院感染[1-3]。經(jīng)消化內(nèi)鏡傳播的幽門螺桿菌已被認(rèn)為是消化性潰瘍最重要的致病因子，并已被定為Ⅰ類致癌因子[4]。常見的經(jīng)內(nèi)鏡傳播的感染病原體還包括肝炎病毒、沙門菌屬、結(jié)核分枝桿菌、假單胞菌屬等，尤其是人類免疫缺陷病毒，一旦感染即造成嚴(yán)重后果[5]。加強(qiáng)內(nèi)鏡清洗消毒研究，積極提高內(nèi)鏡清洗消毒水平，對減少醫(yī)源性感染有著重要的意義。

3.2消毒劑浸泡是內(nèi)鏡清洗消毒的重要環(huán)節(jié)內(nèi)鏡清洗消毒不徹底與內(nèi)鏡結(jié)構(gòu)復(fù)雜，材料嬌嫩，孔道細(xì)長，易沾掛血液、黏液、組織和排泄物等因素有關(guān)；此外欠規(guī)范的操作、內(nèi)鏡生物膜形成等因素也是內(nèi)鏡清洗消毒不徹底的重要原因[1,6]。針對消化內(nèi)鏡清洗消毒過程，美國感染控制協(xié)會和歐洲消化內(nèi)鏡協(xié)會分別制定了感染控制指南和關(guān)于消化內(nèi)鏡清洗消毒指南，提出內(nèi)鏡清洗消毒方法分為以下幾個步驟：患者用過的內(nèi)鏡應(yīng)立即用自來水和清洗劑、或含酶清潔劑清洗內(nèi)鏡外表面和各孔道內(nèi)腔；刷洗內(nèi)鏡各腔道；將內(nèi)鏡全部浸沒于高水平消毒劑中，且將消毒劑灌注吸引管道和活檢鉗孔道及氣、水通道；用滅菌水沖淋內(nèi)鏡鏡體和各孔道，再用乙醇沖洗。兩個指南均指出，消毒劑浸泡是內(nèi)鏡清洗消毒的重要環(huán)節(jié)，高效的消毒劑是保證患者安全及內(nèi)鏡安全的關(guān)鍵。

鄰苯二甲醛具有作用時間短、使用濃度低、性質(zhì)穩(wěn)定、殺滅微生物能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)[8]。然而，鄰苯二甲醛有一個比較突出的問題就是皮膚接觸到鄰苯二甲醛后容易使皮膚變灰色，衣物接觸到鄰苯二甲醛后會使衣服呈淡灰色、不易洗去。過氧乙酸屬于過氧化物類消毒劑，具有快速、高效、無毒等優(yōu)點(diǎn)，對細(xì)菌繁殖體、真菌、芽孢和病毒都具有高效的殺滅作用。本研究比較了過氧乙酸、戊二醛、鄰苯二甲醛對枯草桿菌黑色變種芽孢人工污染胃鏡的清洗消毒效果，枯草桿菌黑色變種芽孢是衛(wèi)生部消毒技術(shù)規(guī)范規(guī)定為消毒試驗(yàn)中殺滅芽孢唯一指示菌。研究結(jié)果顯示，過氧乙酸組胃鏡殘留菌落數(shù)顯著低于戊二醛組和鄰苯二甲醛組，且過氧乙酸組總的內(nèi)鏡清洗消毒時間較戊二醛組縮短5 min，體現(xiàn)了過氧乙酸消毒快速和高效的特點(diǎn)。綜上所述，本研究結(jié)果顯示過氧乙酸對胃鏡的消毒效果優(yōu)于戊二醛和鄰苯二甲醛，且消毒效率高于戊二醛，值得臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

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(1.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院，浙江杭州310003；

2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，新疆烏魯木齊830054)

摘要：目的分析過氧乙酸消毒劑對枯草桿菌黑色變種芽孢人工污染胃鏡的清洗消毒效果，為臨床內(nèi)鏡清洗消毒工作提供參考。方法采用人工模擬試驗(yàn)，比較過氧乙酸、戊二醛、鄰苯二甲醛等3種不同內(nèi)鏡消毒劑對枯草桿菌黑色變種芽孢人工污染胃鏡的清洗消毒效果及效率。結(jié)果過氧乙酸組、戊二醛組和鄰苯二甲醛組胃鏡清洗消毒后殘留菌落數(shù)分別為2 (0~90) cfu/鏡、1 885 (1 000~ 5 500) cfu/鏡和2 360 (700~10 375) cfu/鏡，經(jīng)檢驗(yàn)，過氧乙酸組胃鏡殘留菌落數(shù)顯著低于戊二醛組和鄰苯二甲醛組(P均<0.01)；過氧乙酸組、鄰苯二甲醛組、戊二醛組清洗消毒所需時間分別為19 min、19 min和24 min。結(jié)論過氧乙酸對胃鏡的消毒效果優(yōu)于戊二醛和鄰苯二甲醛。

關(guān)鍵詞：胃鏡；消毒；過氧乙酸；戊二醛；鄰苯二甲醛doi:10.3969/j.issn.1671-9875.2015.10.001

Research on disinfection on gastroscope contaminated by Bacillus svblilis var. niger using peracetic acid disinfectant// Wu Chenjiao1, Zhang Hongyan2, Gu Qing1, Zhong Xiaoqi1, Gu Liying1, Cheng Ying1, Hu Haixia1, Fang Ying1// 1.The First Affiliated Hospital Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou Zhejiang 310003, China; 2.The First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi, Xinjiang 830054, China

Abstract:ObjectiveTo analyze the disinfection effect of peracetic acid disinfectant on gastroscope contaminated artificially by Bacillus svblilis var. niger to provide evidence for clinical cleaning and disinfecting of endoscope. MethodCompare the disinfection effect and efficiency of peracetic acid, glutaraldehyde and ortho-phthalaldehyde on gastroscope contaminated by Bacillus svblilis var. niger artificially by artificial experiment. ResultResidual bacterial amount of gastroscope after cleaning and disinfecting by peracetic acid, glutaraldehyde and ortho-phthalaldehyde are 2 (0~90) cfu/scope, 1 885 (1 000~5 500) cfu/scope and 2 360 (700~10 375) cfu/scope. Residual bacterial amount of peracetic acid group is obviously less than glutaraldehyde and ortho-phthalaldehyde group (P<0.01 each) by test results. Time cost by cleaning and disinfecting are 19min, 19min and 24min for peracetic acid group, ortho-phthalaldehyde group and glutaraldehyde group respectively. ConclusionDisinfection effect of peracetic acid is better than glutaraldehyde and ortho-phthalaldehyde.

Key words:gastroscope; disinfection; peracetic acid; glutaraldehyde; ortho-phthalaldehyde

中圖分類號：R472.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1671-9875(2015)10-0903-03

通信作者：方英，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院

收稿日期：2015-06-12

作者簡介：吳忱姣(1974-)，女，本科，主管護(hù)師.