李丹，陳亮，李陽

（黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所，黑龍江齊齊哈爾 161006）

一例仔狐感染綠膿桿菌的診斷與防制

李丹，陳亮，李陽

（黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所，黑龍江齊齊哈爾 161006）

2015年9月，齊齊哈爾某養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)的仔狐突發(fā)以呼吸困難為主要癥狀的疾病，經(jīng)過臨床診斷、病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，確認(rèn)該病是由綠膿桿菌感染引起。

1 發(fā)病情況

發(fā)病期間該養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)的病仔狐表現(xiàn)為精神沉郁，食欲減退，呼吸困難，病程一般較短，多數(shù)于發(fā)病后3～4d死亡。該養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)用左氧氟沙星對(duì)該病進(jìn)行治療，但治療效果甚微，發(fā)病仔狐死亡率仍可達(dá)到30%。

2 臨床檢驗(yàn)

患病仔狐多表現(xiàn)為體態(tài)瘦弱，被毛粗亂，鼻端干燥，出現(xiàn)呼吸困難，呈腹式呼吸，有些甚至呈犬坐式呼吸。有些仔狐發(fā)病急促，毫無癥狀，突然死亡。剖檢死亡仔狐的尸體可見肺部出現(xiàn)出血或充血現(xiàn)象，肺葉呈棕褐色，切面可流出大量的血水樣液體；脾臟、腎臟均有出血點(diǎn)；肝臟充血，腫大；腸粘膜呈彌散性出血。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 涂片鏡檢

無菌采集送檢剛死仔狐的心血、肝臟、脾臟制成涂片，進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，觀察該菌為革蘭氏陰性菌，呈單個(gè)，成雙或呈短鏈排列，中等大小。

3.2 細(xì)菌培養(yǎng)

無菌操作取病死仔狐的心臟、肝臟、脾臟等組織接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、血液瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)18～24h。該菌在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的藍(lán)綠色中等大小菌落，該菌落形狀扁平、表面光滑、邊緣整齊的，培養(yǎng)基可被染成青綠色；在血液瓊脂培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的灰褐色菌落，菌落較大，在菌落周圍可形成β溶血環(huán)；在麥康凱培養(yǎng)基上可形成肉眼可見的灰綠色菌落。

3.3 生化實(shí)驗(yàn)

將細(xì)菌進(jìn)行分離純化，將純化培養(yǎng)物分別接種于各種微量發(fā)酵管中，在滅菌平皿中培養(yǎng)24～48h，生化試驗(yàn)結(jié)果顯示該細(xì)菌可以分伯膠糖、解葡萄糖、甘露糖、單奶糖，能液化明膠，氧化酶、觸酶、尿素酶均為陽性，可利用枸櫞酸鹽；不分解麥芽糖、棉籽糖、菊糖、乳糖、甘露醇及蔗糖；靛基質(zhì)、M.R、V-P試驗(yàn)均陰性；通過將上述試驗(yàn)結(jié)果與細(xì)菌生化反應(yīng)對(duì)照表進(jìn)行比較可以確定該菌為綠膿桿菌。

3.4 動(dòng)物試驗(yàn)

隨機(jī)選取10只健康小白鼠，分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，照組和試驗(yàn)組每組各5只。將綠膿桿菌肉湯培養(yǎng)物注射到試驗(yàn)組小白鼠腹腔內(nèi)，0.1mL/只，免疫組每只免疫綠膿桿菌劑量為0.5×109CF；對(duì)照組小白鼠腹腔注射等量無菌肉湯，注射完畢后進(jìn)行隔離飼養(yǎng)。結(jié)果攻毒組小白鼠在24h內(nèi)全部死亡，對(duì)照姐小鼠剛?cè)看婊?，并可以從死亡的攻毒小白鼠體內(nèi)再次分離到綠膿桿菌。

根據(jù)以上臨床癥狀，病理剖檢以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果可確定引起該養(yǎng)殖場(chǎng)仔狐發(fā)病的主要病原是綠膿桿菌。

3.5 藥敏試驗(yàn)

將綠膿桿菌接種到普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂，分別選用阿米卡星、慶大霉素、復(fù)方新諾明、頭孢曲松、左氧氟沙星、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星和恩諾沙星等7種藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果表明該菌對(duì)慶大霉素、頭孢曲松、阿米卡星高敏；對(duì)環(huán)丙沙星、恩諾沙星和頭孢噻肟中敏；其它藥物不敏感。

4 病原特點(diǎn)

銅綠假單胞菌（P.Aeruginosa）又稱綠膿桿菌。其廣泛在自然界中，是土壤中存在的最常見的細(xì)菌之一，是一種常見的條件性致病菌。為革蘭氏陰性桿菌。菌體一端一般有一根鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。其大小為1.5～3.0μm×0.5～0.8μm，有時(shí)呈球桿狀或線狀，成對(duì)或短鏈狀排列，無芽胞，米液型菌株有多糖、莢膜或糖萼，具有抗吞噬作用。

5 預(yù)防措施

預(yù)防本病的措施主要是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，搞好狐舍的清潔衛(wèi)生。對(duì)發(fā)病仔狐進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，用5%的熱火堿水對(duì)籠舍、地面環(huán)境、糞便等進(jìn)行噴霧消毒,食槽及飲水槽、碗或杯用百度殺進(jìn)行浸泡消毒，2次/d，連續(xù)1周；用5%煤酚皂對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行噴霧式消毒。7～9月份正處于炎熱的夏季，也是綠膿桿菌發(fā)病的高峰期，這時(shí)的仔狐抵抗力降低，致使體內(nèi)存在的條件病原菌大量繁殖，最終引起感染和死亡。夏季天氣炎熱，狐舍通風(fēng)散熱差，高溫高濕，更利于綠膿桿菌繁殖，因此夏季對(duì)狐舍應(yīng)加強(qiáng)管理，做好通風(fēng)、降溫、防暑的工作。發(fā)病后畜主一般擅自使用多種藥物治療，會(huì)使細(xì)菌對(duì)多種藥物產(chǎn)生耐藥性，增加治療的難度。為了減少經(jīng)濟(jì)損失和不必要的浪費(fèi)，發(fā)病后應(yīng)立即通過藥敏試驗(yàn)確定敏感藥物進(jìn)行治療，這樣才能收到顯著的防治效果。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．12.084