周鳳萍，周云峰，翟宇，莫添添，王敏

（1.吉林省梅河口市一座營鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，吉林梅河口 135014；2.吉林省鎮(zhèn)賚縣疫病預(yù)防控制中心，吉林鎮(zhèn)賚 137300；

3.吉林省梅河口市動物疫病預(yù)防控制中心，吉林梅河口 135000；4.吉林省動物衛(wèi)生監(jiān)督所，吉林 13000）

豬傳染性萎縮性鼻炎的診斷方法

周鳳萍1，周云峰2，翟宇3，莫添添3，王敏4

（1.吉林省梅河口市一座營鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，吉林梅河口 135014；2.吉林省鎮(zhèn)賚縣疫病預(yù)防控制中心，吉林鎮(zhèn)賚 137300；

3.吉林省梅河口市動物疫病預(yù)防控制中心，吉林梅河口 135000；4.吉林省動物衛(wèi)生監(jiān)督所，吉林 13000）

豬傳染性萎縮性鼻炎是由支氣管敗血波氏桿菌或/和產(chǎn)毒素性多殺性巴氏桿菌感染而引起的豬的一種嚴重的慢性呼吸道傳染病。該病的診斷可以從臨床癥狀進行初步診斷，實驗室診斷可以分為血清學、X線檢查及分子生物學方法。本文著重對該病的診斷方法進行了概述。

豬萎縮性鼻炎；波氏桿菌；多殺性巴氏桿菌；診斷

豬傳染性萎縮性鼻炎是由支氣管敗血波氏桿菌（Bb）引起的豬的一種嚴重的慢性呼吸道傳染病，亦或與產(chǎn)毒素性多殺性巴氏桿菌混合感染。臨床上表現(xiàn)為漿液性卡他型鼻炎、嚴重的發(fā)展為化膿性鼻炎、鼻甲骨萎縮扭曲、顏面部變形、采食困難、生長遲緩和生產(chǎn)能力下降。本病廣泛存在于全世界所有養(yǎng)豬國家，是對養(yǎng)豬業(yè)危害最大的疾病之一。國際動物衛(wèi)生組織（OIE）將其歸為B類動物傳染疫病。近幾十年來根據(jù)臨床癥狀、血清學、細菌學檢測和流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，本病在我國也有較高的感染率，且存在廣泛。由于臨床癥狀非常明顯，該病的診斷可以從臨床癥狀進行初步診斷，如需進一步確診，可進行實驗室診斷，目前的實驗室診斷可以分為病原學、血清學、X線檢查及分子生物學方法。

1 臨床癥狀

本病感染豬的臨床表現(xiàn)程度與豬只的年齡存在明顯的相關(guān)性。表現(xiàn)為豬齡越小感染率越高，臨床癥狀越為明顯。任何年齡的豬都可發(fā)生本病，但是最為常見于2～5月齡的豬。本病特征性的病變?yōu)楸羌坠前l(fā)育受阻或者是明顯可見的鼻部萎縮、顏面部變形。1.5～2月齡豬感染本病后，出現(xiàn)鼻炎的癥狀，打噴嚏，呼吸時有鼾聲。青年豬或成年豬感染，由于骨骼的發(fā)育已經(jīng)成熟，往往在外觀無面部歪斜，只發(fā)生不同程度的鼻甲骨萎縮病變。但是病豬的體溫、采食、糞便、精神等一般表現(xiàn)為正常。由于臨床癥狀明顯，靠本病的臨床癥狀作出診斷并不難，必要時可通過實驗室進一步做出確切的診斷。

2 血清學診斷

目前只有針對支氣管敗血波氏桿菌的診斷方法，尚未有多殺性巴氏桿菌的血清學診斷方法方面的報道。豬在感染Bb后2～4周后，血清中就能檢測出凝集抗體，有的稍晚，可能在12周齡以后才能檢測出來，凝集抗體至少可以維持4個月以上。采用血清學檢測方法中的試管凝集試驗（Ta）或者平板凝集試驗，將待檢血清作系列倍比稀釋，然后加入等量抗原，充分震蕩或用移液器充分混勻，同時作陰性對照，37℃，溫濕環(huán)境下放置一天左右，從溫箱中取出，在室溫環(huán)境下放置2h候判定結(jié)果，1：80以上即為陽性。

3 X線檢查

X線診斷可以作為臨床診斷的輔助，主要用于表面觀察并不是太明顯時。該方法可以準確地反映出活體鼻甲骨的萎縮病變特征，檢查時要以拍攝豬鼻背部位片為主，如果有需要時，也可以拍攝側(cè)位片作為補充，以輔助作出準確的診斷。健康豬只的鼻背部位片顯示為鼻中隔筆直，兩側(cè)鼻道呈現(xiàn)為均勻的白底狹隙，兩側(cè)鼻甲骨表現(xiàn)為致密的對稱的梭型結(jié)構(gòu)，均勻排列。病變的X線則顯示為鼻中隔萎縮彎曲變形、兩側(cè)的鼻道增寬，兩側(cè)不對稱、鼻甲骨萎縮顯而易見，結(jié)構(gòu)密度降低等。

4 分子生物學方法

隨著分子生物學研究的快速發(fā)展，更多的分子生物學診斷方法得以建立起來并被廣泛應(yīng)用。最先使用PCR方法的為Nagai等學者，該方法可以檢測并區(qū)分產(chǎn)毒和不產(chǎn)毒的多殺性巴氏桿菌，特異性的引物可以擴增毒素基因中的特異性片斷，PCR方法特異性好、敏感性高，最低可檢測到l0pg的DNA。美國學者Register KB等應(yīng)用一種菌落雜交分析法，該方法是應(yīng)用雙色雜交法同時檢測AR的病原體敗血性波氏桿菌和多殺性巴氏桿菌。優(yōu)點為不需要對受檢細菌進行純代培養(yǎng)，同時雜交出Bb的alcA基因和T+Pm的toxA基因探針，其中alcA為地高辛標記，toxA為熒光標記，雜交后有Bb存在處顯粉紅色，有T+Pm存在處顯紫色，取樣3天后即可獲得準確的結(jié)果。國內(nèi)學者魯承等研究出一種多重PCR方法，其優(yōu)點是可同時檢測Bb和T+Pm兩種致病菌的存在，其敏感性也高于常規(guī)PCR方法，根據(jù)toxA基因和編碼Bb鞭毛的fla基因上游序列，設(shè)計一對特異性引物，提取基因組后，進行PCR，之后作電泳觀察結(jié)果。

5 結(jié)語

豬萎縮性鼻炎是世界上影響?zhàn)B豬業(yè)的重大細菌傳染病之一。在我國也有著廣泛的流行，制約著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。為了能夠?qū)Ρ静∽鞒隹焖佟蚀_診斷，需要未來高效、靈敏、方便、快捷的診斷方法，進而才能預(yù)防、控制、凈化該病的流行發(fā)展。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．12.054