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        羊腸毒血癥的診斷

        2015-02-22 10:36:10黑龍江省動物疫病預防與控制中心150069
        現(xiàn)代畜牧科技 2015年10期
        關(guān)鍵詞:小鼠

        (黑龍江省動物疫病預防與控制中心 150069)

        (黑龍江省動物疫病預防與控制中心 150069)

        羊腸毒血癥是魏氏梭菌(產(chǎn)氣莢膜梭菌D型)在腸道內(nèi)大量繁殖并產(chǎn)生毒素引起的急性傳染病。

        1 綜合性診斷

        流行病學的特點:病程短,死亡快,多為散發(fā)性。只有羊發(fā)病,死亡的多為營養(yǎng)較好的,在青草生長旺盛期發(fā)病多,易地放牧可減少發(fā)病。

        臨床癥狀:體溫不高,出現(xiàn)咬牙、肌肉顫抖、痙攣、四肢抽搐、頭頸向后反張等神經(jīng)癥狀,常下痢。

        病理解剖:皮下血管舒張明顯,肝臟腫大質(zhì)脆有時呈煮熟樣。膽囊脹大,腎臟軟化,心臟擴張松弛,心內(nèi)、外膜常有出血斑點。肺臟淤血氣腫,氣管、支氣管積有多量白色泡沫性黏液,脾不腫大。積有多量胸水、腹水,腸道有出血點等病變。

        根據(jù)以上特點進行綜合判定,即可初步確診為羊腸毒血癥。但在新發(fā)病地區(qū)或以上特點不完全具備的情況下,則必須采取有出血點的小腸黏膜做直接涂片,革蘭氏染色,可見多量的產(chǎn)氣莢膜梭菌。

        為了迅速確診,可采用腸內(nèi)容物毒素中和試驗,操作方法是采取新鮮尸體的小腸內(nèi)容物30~50 mL,加生理鹽水作適當?shù)南♂專?jīng)離心沉淀后,吸取上清液給家兔靜脈注射,如家兔很快死亡便證明腸內(nèi)容物有毒素。再以此毒素分別與產(chǎn)氣莢膜梭菌的C型和D型抗毒素融合,因為診斷羊腸毒血癥主要是鑒別C型和D型故可省去B型抗毒素。經(jīng)過中和后再分別給家兔靜脈注射。如用D型抗毒素血清所中和的毒素不發(fā)生死亡,便證明是羊腸毒血癥。反之,則診斷為羊猝狙。根據(jù)當?shù)貙嶒灲Y(jié)果,將腸內(nèi)容物稀釋后用濾紙反復濾過,直至濾液呈半透明為止,給家兔靜脈注射亦可得到同樣的結(jié)果。

        診斷羊腸毒血癥也可從腸內(nèi)容物中直接培養(yǎng)分離產(chǎn)氣莢膜梭菌,將少量腸內(nèi)容物接種于厭氣肉肝湯內(nèi),置37℃溫箱培養(yǎng)3~4 h,待產(chǎn)氣莢膜梭菌生長發(fā)育后,再接種于血液瓊脂平板,置厭氣培養(yǎng)罐內(nèi)培養(yǎng)3~4 d取出。鉤取產(chǎn)氣莢膜梭菌的典H落,再接種于厭氣肉肝湯培養(yǎng)72 h即可獲得本菌的純培養(yǎng)物。也可將此培養(yǎng)液離心沉淀后,吸取上清液給小鼠靜脈注射測毒,小鼠若于24 h內(nèi)死亡,便證明有毒。然后以此毒素分別與產(chǎn)氣莢膜梭菌的D型和C型抗毒素血清中和后,再給小鼠靜脈注射觀察結(jié)果。被D型抗毒素中和的毒素不致死小鼠,被C型抗毒素中和的毒素能致死的小鼠,便證明是羊腸毒血癥。反之,則為羊猝狙。用小鼠試驗也可采用腹腔注射,僅死亡時間略有延長。為了爭取時間也可在產(chǎn)氣莢膜梭菌為24 h培養(yǎng)液內(nèi)加入胰蛋白酶使毒素活化后,其毒力與72 h培養(yǎng)菌液所產(chǎn)毒素的毒力相同。

        為了迅速得出診斷結(jié)果,在當?shù)貤l件下可用廣口瓶,內(nèi)置60℃的適量溫水,水溫若低于60℃,瓶內(nèi)溫度會迅速下降。將培養(yǎng)管放入,每6~8 h換1次溫水,可代替溫箱做細菌培養(yǎng)。在沒有厭氣培養(yǎng)罐的情況下,取鉑環(huán)菌液連續(xù)劃線接種3支血液瓊脂斜面,將培養(yǎng)管換用翻口膠塞密閉,然后用帶針頭的注射器通過膠塞抽盡試管內(nèi)的空氣,隨即于針眼處涂以凡士林后,置入廣口瓶內(nèi)培養(yǎng)。經(jīng)培養(yǎng)后,在接種的第二管和第二管斜面上,即可看到有溶血環(huán)的產(chǎn)氣莢膜梭菌的單個菌落。鉤取單個菌落接種于厭氣肉肝湯內(nèi),即可得到純粹培養(yǎng)。用此方法比較簡單,不需要特殊設(shè)備,因為是在當?shù)夭僮?,不僅可以縮短時間,而且能夠比較容易地分離到強度菌種。

        2 鑒別診斷

        羊猝狙:本病的腸內(nèi)容物含有C型產(chǎn)氣莢膜梭菌毒素,而腸毒血型則含有D型產(chǎn)氣莢膜梭菌的毒素。故采用毒素和抗毒素中和試驗方法,可把兩種疫病區(qū)分開。這兩型產(chǎn)氣莢膜梭菌的抗毒素,除對本病腸內(nèi)容物毒素有中和能力,無交互中和能力。

        羊快疫:本病將有菌血癥,可從血液中分離出腐敗梭菌。在肝被膜的觸片中,可見腐敗梭菌呈線條樣的長鏈,這種特征是腸毒血癥所沒有的。

        炭疽:在流行地區(qū)除羊發(fā)病外,牛、馬、駱駝、豬亦多同時發(fā)病。在臨床上有明顯的體溫反應,結(jié)膜多呈藍紫色,死后天然孔出血,脾臟異常腫大,鏡檢血液涂片可看到具有莢膜的呈竹節(jié)狀的炭疽桿菌。采取皮膚或臟器做炭疽沉淀反應檢查,呈陽性反應。

        巴氏桿菌?。罕静〉牟〕潭嘣?天以上,不如腸毒血癥死亡迅速。在臨床上表現(xiàn)體溫高,皮下組織有出血性膠樣浸潤。在后期多呈明顯的肺炎癥狀,在涂片中可看到兩級著色的巴氏桿菌。

        肉毒梭菌?。涸诹餍械貐^(qū)除羊發(fā)病外,牛亦多同時發(fā)病,有時馬、驢也有發(fā)病。本病的病程多在1天以上,在臨床表現(xiàn)為吞咽困難和四肢麻痹。腸內(nèi)容物含有肉毒梭菌毒素,用其濾液靜脈注射家兔可迅速引起死亡。但不能被產(chǎn)氣莢膜梭菌各型抗毒素所中和,而能被肉毒梭菌各型抗毒素所中和,以中和后的毒素注射小鼠,可鑒別出肉毒梭菌感染的菌型。

        羊腸毒血癥的診斷

        趙曉春,李 鵬,王寧寧

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