?;撬崤cL-肉堿對異育銀鯽生長與抗氧化能力的影響
[引著格式]王銀東,何吉祥,楊嚴(yán)鷗.?;撬崤cL-肉堿對異育銀鯽生長與抗氧化能力的影響[J].長江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版) ,2015,12(21):31~33,84.
王銀東,何吉祥(安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)科學(xué)研究所,安徽 合肥 230036)
楊嚴(yán)鷗(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,安徽 合肥 230036)
[摘要]在基礎(chǔ)飼料中分別添加牛磺酸1000、2000、3000mg/kg,L-肉堿100、200 、300mg/kg,制成6種飼料,再以基礎(chǔ)飼料作為對照組,共7種飼料飼養(yǎng)異育銀鯽(Carassius auratus gibebio)8周。結(jié)果顯示,各組的攝食率無顯著差異,部分試驗(yàn)組飼料系數(shù)比對照組有顯著下降,特定生長率有顯著上升,其中牛磺酸1000mg/kg組和L-肉堿200mg/kg組的飼料利用及生長效果最佳。除超氧化物歧化酶外,過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性、維生素E、氧化型和還原型谷胱甘肽含量等抗氧化指標(biāo)均受到添加劑的顯著影響,并且大多在?;撬?000mg/kg組和L-肉堿200mg/kg組變化最為顯著。結(jié)果表明,生長性能的變化和抗氧化能力的變化密切相關(guān)。
[關(guān)鍵詞]異育銀鯽(Carassius auratus gibebio); ?;撬?;L-肉堿; 生長; 抗氧化
魚類具有由抗氧化酶(例如超氧化物歧化酶等)和非酶物質(zhì)(如谷胱甘肽等)組成的抗氧化系統(tǒng)[1],而營養(yǎng)條件的改變會引起該系統(tǒng)中酶類活性和非酶類物質(zhì)含量的改變[2],這種改變會對魚類生長產(chǎn)生影響,例如營養(yǎng)脅迫時魚類產(chǎn)生的抗氧化應(yīng)激會導(dǎo)致其餌料系數(shù)升高,生長速度降低[3]。?;撬岷蚅-肉堿均為營養(yǎng)性添加劑,?;撬嶙鳛橐环N小分子的含硫氨基酸,L-肉堿作為一種由賴氨酸衍生而成的兼性化合物,對魚類的生長具均有促進(jìn)作用[4~7],但二者對魚類抗氧化能力影響的研究非常缺乏。因此,有必要從抗氧化的角度來探討魚類的快速生長的機(jī)制。本研究以我國的大宗養(yǎng)殖魚類異育銀鯽(Carassaisauratusgibebio)為材料魚對此進(jìn)行了探討。
1材料與方法
循環(huán)水養(yǎng)魚系統(tǒng)包括28個單個體積為60cm×60cm×65cm的塑料水族箱(有效水體180L)。水源為曝氣自來水,使用沸石、活性炭凈化水體,真空泵提水。單只箱體循環(huán)水量為2.5L/min,箱內(nèi)放置散氣石,以通風(fēng)管連接羅茨鼓風(fēng)機(jī)間斷性充氧。自然水溫,變化范圍25.5~27.8℃,節(jié)能日光燈提供照明,光照時間8:30~20:00,瞬時開斷。
試驗(yàn)魚為鯽魚,取自安徽合肥市的巢湖三珍養(yǎng)殖場,運(yùn)回后2%食鹽水消毒,實(shí)驗(yàn)室循環(huán)水水族箱內(nèi)暫養(yǎng)2周,暫養(yǎng)期間投喂基礎(chǔ)飼料,在基礎(chǔ)飼料中分別添加牛磺酸0、1000、2000、3000mg/kg,L-肉堿0、100、200、300mg/kg,包括基礎(chǔ)飼料,共配制7種試驗(yàn)飼料;飼料通過顆粒機(jī)制成直徑2mm顆粒,60℃烘干,過篩,塑料袋密封4℃保存使用?;A(chǔ)飼料配方及化學(xué)組成見表1。
表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料的化學(xué)組成及營養(yǎng)水平
注:1.維生素預(yù)混物(I.U./100g預(yù)混物):維生素A550、維生素D3100、維生素E5、維生素K1、膽堿55、尼氨酸10、核黃素2、吡哆醇2、硫胺素2、泛酸鈣5、生物素0.01、葉酸0.5、維生素B122、抗壞血酸10、肌醇10;2.礦物鹽預(yù)混物(g/100g預(yù)混物):氯化鈉1、硫酸鎂15、磷酸二氫鈉25、磷酸二氫鉀32、磷酸二氫鈣20、檸檬酸鐵2.5、乳酸鈣3.5、硫酸鋅0.353、硫酸錳0.162、硫酸銅0.031、氯化鈷0.001、碘酸鉀0.003、纖維素0.45。
試驗(yàn)開始前,將魚饑餓24h,然后隨機(jī)取樣稱重,每箱放入同種魚30尾,每種飼料4個重復(fù),共28個水族箱。
試驗(yàn)持續(xù)56d,每天9:00和15:00各投過量飼料1次,1.5h后回收殘餌,70℃烘干。殘餌量用飼料溶失率校正,測定溶失率時隨機(jī)在4個無魚的箱中各放入1份已稱重的飼料,1.5h后回收,70℃烘干至恒重并稱重。
試驗(yàn)結(jié)束時,將魚饑餓24h,稱量每箱魚的總重,再從每箱中隨機(jī)取樣8尾,每條魚的肝臟各取少量,等量混合;-70℃保存,用于測定抗氧化指標(biāo)。
生化分析:測定餌料的干物質(zhì)、粗蛋白、脂肪、灰分和能量含量。測定干物質(zhì)時在105℃下干燥樣品至恒重;測定蛋白質(zhì)時用凱氏定氮法測定含氮量,再乘以6.25;脂肪采用索氏乙醚抽提法測定,灰分采用馬弗爐550℃灼燒樣品測定;能值采用Phillipson能量計(jì)測定。
抗氧化指標(biāo)測定:測定肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)以及過氧化氫酶(CAT)活性,測定肝臟維生素E(VE)含量以及氧化型谷胱甘肽、還原型谷胱甘肽含量共6個指標(biāo)。采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定,方法參見試劑盒。
濕重特定生長率(SGRW)=100(lnWt-lnW0)/t
攝食率(FR)=200ITd/t(Wt+W0)
飼料系數(shù)(FCR)=ITd/(Wt-W0)
式中,Wt為魚體終末濕重,kg;W0為初始濕重,kg;t為試驗(yàn)周期,d;ITd為試驗(yàn)期間的總飼料消耗(干重),kg。
試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用單因素方差分析(ANOVA)后進(jìn)行組間差異的多重比較(Duncan’s procedure)。顯著性水平設(shè)置為α=0.05。統(tǒng)計(jì)軟件均為SPSS 16.0。
2結(jié)果與分析
由表2可知,?;撬?000mg/kg組和L-肉堿300mg/kg組的生長率及終末重量顯著高于對照組,由于各組的攝食率均無顯著差異,因此生長的差異主要是由于這2組的飼料系數(shù)顯著降低導(dǎo)致。
由表3可知,除超氧化物歧化酶外,其余各指標(biāo)均受到添加劑量的顯著影響。?;撬峤M中,1000mg/kg添加量的維生素E和過氧化氫酶獲得顯著提高,其余2組這2項(xiàng)指標(biāo)與對照組均無顯著差異。L-肉堿組在100、200mg/kg添加組谷胱甘肽,過氧化物酶均顯著低于對照組,氧化型谷胱甘肽均顯著高于對照組,還原型顯著低于對照組。
表2 ?;撬崤cL-肉堿對異育銀鯽生長與飼料利用的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,n=4)
注:平均值后的上標(biāo)字母表示Duncan檢驗(yàn)的結(jié)果,不同大寫字母表示牛磺酸組與對照組有顯著差異,不同小寫字母表示L-肉堿組與對照組有顯著差異(P<0.05),表3同。
表3 ?;撬崤cL—肉堿對異育銀鯽抗氧化能力的影響(平均值(標(biāo)準(zhǔn)差,n=4)*
3討論
本研究顯示,?;撬岷蚅-肉堿均能顯著降低異育銀鯽的飼料系數(shù),從而提高特定生長率,羅莉等[8]添加牛磺酸飼養(yǎng)草魚、王立新等[6]和田娟等[5]添加L-肉堿分別飼養(yǎng)鯽魚與草魚都得出相似的結(jié)果,但這2種添加劑的使用必須掌握適當(dāng)?shù)膭┝?。例如,就?;撬岫裕_莉等[8]的試驗(yàn)表明添加量為0.6%~1.0%時草魚生長效果最好,本研究在1000mg/kg組生長率最高,餌料系數(shù)最低,與上述結(jié)果基本一致。
本研究中,除超氧化物歧化酶外,其余各項(xiàng)抗氧化指標(biāo)均受到添加劑的顯著影響,這種影響與添加的劑量顯著相關(guān),大多在?;撬?000mg/kg組以及L-肉堿200mg/kg組變化最為顯著,而這2組也是生長率最高的試驗(yàn)組,因此,這些指標(biāo)的變化趨勢與生長趨勢密切相關(guān)。例如,維生素E(VE)作為動物體內(nèi)的重要的抗氧化物質(zhì),一般充當(dāng)生物膜表面的脂質(zhì)過氧化的阻斷劑[9,10],在上述2組中的含量均顯著最高。但2種添加劑對抗氧化系統(tǒng)的影響又有明顯不同的特點(diǎn)。例如,過氧化氫酶作為一種過氧化物酶體的標(biāo)志酶,能催化過氧化氫分解成氧和水的酶,在?;撬?000mg/kg組顯著高于對照組,而在L-肉堿200mg/kg組則與對照組無顯著差異;還原型谷胱甘肽在牛磺酸1000mg/kg組顯著最高,在L-肉堿200mg/kg組則顯著最低(在其各自的組別中),其變化趨勢相反,對此還有待進(jìn)一步的研究。
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[中圖分類號]S963;S965.117
[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A
[文章編號]1673-1409(2015)21-0031-03
通信作者:
[作者簡介]王銀東(1968-),男,博士,副研究員,研究方向?yàn)樗a(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料。何吉祥,hejixiang813@126.com。
[基金項(xiàng)目]安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目(13C0506)。
[收稿日期]2014-09-29