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2008-2013年大腸埃希菌檢出情況及耐藥性分析

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150113.1850.013.html

張帥1, 費(fèi)櫻2*, 焦彥朝3

(1.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系， 貴州 貴陽(yáng)550004； 2.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院附院 微生物免疫科， 貴州 貴陽(yáng)550004； 3.貴州出入境檢驗(yàn)檢疫局， 貴州 貴陽(yáng)550004)

[摘要]目的： 分析2008年1月～2013年9月大腸埃希菌的檢出情況及對(duì)抗菌藥物的耐藥性。方法： 對(duì)送檢標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)，觀察各年大腸埃希菌檢出率、耐藥性，不同標(biāo)本來(lái)源、不同送檢科室檢出大腸埃希菌的耐藥性,并觀察產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰氨酶(ESBLs)大腸埃希菌檢出率。結(jié)果： 6年共分離大腸埃希菌4 607株，各年大腸埃希菌的檢出率為18.2%～26.5%，大腸埃希菌對(duì)氨芐西林和哌拉西林的耐藥率最高(>91.0%)，對(duì)亞胺培南的耐藥率最低(<3.0%)，2010-2013年對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素、復(fù)方磺胺甲惡唑和妥布霉素抗菌藥物的耐藥率有所下降(P<0.05)；血液標(biāo)本來(lái)源的大腸埃希菌耐藥率低于其他標(biāo)本來(lái)源大腸埃希菌的耐藥率，來(lái)自ICU的大腸埃希菌對(duì)常見抗菌藥物的耐藥率普遍較高，其次為外科，兒科送檢標(biāo)本檢出的大腸埃希菌耐藥率較低；2010年大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs菌株檢出率為37%，2012年為70.9%，2010-2012年產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌檢出率逐年上升。結(jié)論： 6年內(nèi)大腸埃希菌分離株增多，耐藥情況嚴(yán)峻,ESBLs產(chǎn)酶率較高，應(yīng)加強(qiáng)本地區(qū)抗菌藥物使用合理性。

[關(guān)鍵詞]大腸埃希菌； 藥物耐受，細(xì)菌； 抗菌藥； 超廣譜β-內(nèi)酰氨酶

大腸埃希菌是一類在自然界中廣泛存在的微生物,也是感染性疾病的主要病原菌之一，在我國(guó)，引起腸道外感染的細(xì)菌中，大腸埃希菌是常見致病菌之一[1]。在腸道內(nèi)可引起如腹瀉、出血性結(jié)腸炎等疾病[2]，在腸道外可引起如尿路感染、肺炎等疾病。因此，掌握大腸埃希菌的臨床分布及耐藥情況，對(duì)指導(dǎo)臨床合理用藥等方面有著重要意義。為此，2008年1月～2013年9月對(duì)臨床科室送檢分離自腸道外的大腸埃希菌的分布和耐藥性進(jìn)行分析，報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1菌株來(lái)源

來(lái)自2008年1月～2013年9月臨床送檢標(biāo)本(括痰、尿、血、分泌物等)中所分離的大腸埃希菌，剔除同一患者同一部位重復(fù)分離菌。

1.2質(zhì)控菌株

大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、銅綠假單胞菌 ATCC 27853，購(gòu)自貴州省臨床檢驗(yàn)中心。

1.3細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)

按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版要求，接種分離細(xì)菌并進(jìn)行相應(yīng)處理[3]。采用SIEMENS MicroScan WalkAway-40SI全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏測(cè)試系統(tǒng)及SIEMENS MicroScan革蘭陰性桿菌鑒定藥敏復(fù)合測(cè)試板進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰氨酶(ESBLs)菌株的確證試驗(yàn)：采用雙紙片法，抗菌藥物紙片為頭孢噻肟/克拉維酸(30 μg/10 μg)和頭孢他啶/克拉維酸(30 μg/10 μg)。依據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定[4]。

1.4觀察指標(biāo)

觀察各年大腸埃希菌檢出率、耐藥性，不同標(biāo)本來(lái)源、不同送檢科室檢出大腸埃希菌的耐藥性,并觀察產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌檢出率。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用WHONET5.6軟件和SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1大腸埃希菌檢出率

各年大腸埃希菌的檢出率為18.2%～26.5%，于2010年后逐年上升。見表1。

表1　2008-2013年大腸埃希菌檢出率

2.2大腸埃希菌耐藥率

6年間，大腸埃希菌對(duì)氨芐西林和哌拉西林的耐藥率最高(>91.0%)，其次對(duì)環(huán)丙沙星、頭孢唑林、頭孢吡肟、復(fù)方磺胺甲惡唑均在56%以上，亞胺培南耐藥率最低(<3.0%)。2008年和2009年檢出大腸埃希菌對(duì)11種抗菌藥物耐藥率較高，2010年-2013年對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素、復(fù)方磺胺甲惡唑和妥布霉素的耐藥率下降(P<0.05)。在6年中，檢出大腸埃希菌對(duì)8種抗菌藥物的耐藥率高于50%，而對(duì)3種β內(nèi)酰胺含酶抑制劑類藥物耐藥率均小于15%。見表2。

2.3不同標(biāo)本來(lái)源大腸埃希菌耐藥率

在不同標(biāo)本來(lái)源中，大腸埃希菌對(duì)氨芐西林和哌拉西林的耐藥率最高，對(duì)亞胺培南的耐藥率最低。血液標(biāo)本來(lái)源的大腸埃希菌的耐藥率低于其他標(biāo)本來(lái)源大腸埃希菌的耐藥率 。見表3。

2.4不同送檢科室檢出大腸埃希菌及耐藥率

來(lái)自ICU的大腸埃希菌對(duì)常見抗菌藥物的耐藥率普遍較高，其次為外科，兒科送檢標(biāo)本檢出的大腸埃希菌耐藥率較低。見表4。

表2　2008-2013年大腸埃希菌對(duì)抗菌藥物耐藥率(%)

n為當(dāng)年大腸埃希菌總檢出菌株數(shù)，(1)表示該年大腸埃希菌對(duì)該種抗生素的耐藥率與耐藥率最高年份相比，P<0.05

2.5大腸埃希菌產(chǎn)ESBL酶菌株檢出率

產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌菌株檢出率在2010年最低為37%，2012年最高為70.9%。2010-2012年中，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌檢出率逐年上升。見表5。

3討論

大腸埃希菌是一種革蘭陰性菌，屬于正常菌群，多分布于人體消化道[5]。根據(jù)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)提示，大腸埃希菌是引起社區(qū)和院內(nèi)感染的主要細(xì)菌[2]。本次調(diào)查顯示，6年的大腸埃希菌檢出率較高，并由2008年的18%上升至2013年的26%，有逐年升高的趨勢(shì)，與國(guó)內(nèi)主要地區(qū)大腸埃希菌的檢出率(25.8%～27.9%)相近[6~10]。

本次耐藥性結(jié)果顯示，除阿米卡星、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他巴坦外，大腸埃希菌對(duì)各類抗菌藥物的耐藥率在2008年和2009年高于其他年份；2010-2013年對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素、復(fù)方磺胺甲惡唑和妥布霉素抗菌藥物的耐藥率有所下降(P<0.05)，這可能與本地區(qū)上述抗菌藥物的使用有關(guān)。本次調(diào)查中，大腸埃希菌對(duì)阿米卡星的耐藥率較低(4%~7.7%)，而對(duì)妥布霉素(47%～64.3%)和慶大霉素(54.6%～67.8%)的耐藥率較高，形成這種敏感性差異的主要原因可能是這些菌株攜帶了不同的氨基糖苷類修飾酶基因，而阿米卡星結(jié)構(gòu)改造、對(duì)修飾酶具有一定的穩(wěn)定性[11]，且可能與在本地區(qū)該藥物的使用率低有關(guān)。β-內(nèi)酰胺含酶抑制劑類抗菌藥物如阿莫西林/克拉維酸、替卡西林/克拉維酸和哌拉西林/他巴坦則顯示出較理想的抗菌作用(耐藥率均小于15%)。碳青霉烯類的亞胺培南的抗菌效果最顯著，6年耐藥率均在3%以下，但選用該藥時(shí)應(yīng)慎重，因?yàn)閬啺放嗄峡咕V極廣，抗菌效果極強(qiáng)，易造成耐藥菌株產(chǎn)生和真菌感染。此外，亞胺培南也具有誘導(dǎo)產(chǎn)生大量ESBLs的作用，且價(jià)格昂貴，所以選用該類藥物時(shí)，除應(yīng)結(jié)合患者病情[5],同時(shí)還應(yīng)參照不同地區(qū)的耐藥特點(diǎn)。

表3　不同標(biāo)本來(lái)源大腸埃希菌對(duì)抗菌藥物耐藥率(%)

(n)為該類標(biāo)本檢出大腸埃希菌總菌株數(shù)，(1)表示該標(biāo)本來(lái)源大腸埃希菌對(duì)該抗生素的耐藥率與其他來(lái)源菌株對(duì)該抗生素耐藥率最高者相比，P<0.05

表4　不同送檢科室檢出大腸埃希菌耐藥率(%)

(n)為該科室檢出大腸埃希菌總菌株數(shù)，(1)表示該科室來(lái)源的大腸埃希菌對(duì)該種抗生素的耐藥率與其他科室檢出菌株對(duì)該藥耐藥率最高者相比，P<0.05

表5　2010-2013年大腸埃希菌產(chǎn)

本研究結(jié)果顯示，來(lái)自血液標(biāo)本大腸埃希菌的耐藥率低于其他來(lái)源的大腸埃希菌耐藥率；ICU的大腸埃希菌對(duì)常見抗菌藥物的耐藥率普遍較高。但不同標(biāo)本來(lái)源和各臨床科室分離大腸埃希菌的耐藥情況與其總體耐藥趨勢(shì)是一致的，對(duì)氨芐西林和哌拉西林的耐藥率較高，對(duì)亞胺培南的耐藥率最低。

大腸埃希菌是產(chǎn)生ESBLs的主要細(xì)菌[12]，產(chǎn)ESBLs菌株的質(zhì)粒上常常攜帶著對(duì)其他抗菌藥物的耐藥基因。本次調(diào)查顯示，大腸埃希菌的產(chǎn)酶率較2002年有明顯升高并在近四年呈上升趨勢(shì)[13]，特別是在2012年(70.9%)明顯高于國(guó)內(nèi)其他地區(qū)的平均水平(50.7%～56.5%)[6~10]。研究顯示, 由質(zhì)粒介導(dǎo)的產(chǎn)ESBLs菌株出現(xiàn)和傳播與廣譜β-內(nèi)酰胺抗生素特別是第三代頭孢菌素的廣泛使用有密切的關(guān)系[14]。限制第三代頭孢菌素的廣泛使用, 有助于控制本地區(qū)產(chǎn)ESBLs 菌株的出現(xiàn)和傳播。產(chǎn)ESBL的大腸埃希菌顯示出對(duì)常用抗生素的更高耐藥率[15],這不僅提示合理應(yīng)用抗生素的重要性，而且提示研究人員要加強(qiáng)對(duì)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的研究。

綜上所述，大腸埃希菌檢出率高，且耐藥及產(chǎn)ESBLs情況嚴(yán)重，臨床醫(yī)生應(yīng)嚴(yán)格掌握抗菌藥物的適應(yīng)證，盡可能依據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏測(cè)試結(jié)果選用藥物。

參考文獻(xiàn)4

[1] 馬越, 李景云, 張新妹, 等. 1999-2002年北京、廣東、湖北和遼寧地區(qū)大腸埃希菌及肺炎克雷伯氏菌臨床分離株耐藥性比較分析[J]. 中國(guó)抗生素雜志, 2004(4): 226-234.

[2] 劉坤友. 耐藥性大腸桿菌研究進(jìn)展[J]. 中外健康文摘, 2011(31)：119-121.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社, 2006:357-360.

[4] 中華醫(yī)學(xué)會(huì). 抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2013(1):21-23.

[5] 吳雪梅. 242 例大腸埃希菌耐藥性分析[J]. 現(xiàn)代診斷與治療, 2013(5): 987-988

[6] 汪復(fù), 朱德妹, 胡付品,等. 2008 年中國(guó) CHINET 細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志, 2009(5): 321-329.

[7] 汪復(fù), 朱德妹, 胡付品，等. 2009 年中國(guó) CHINET 細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè) [J]. 中國(guó)感染與化療雜志, 2010(5): 325-334.

[8] 朱德妹, 汪復(fù), 胡付品，等. 2010 年中國(guó) CHINET 細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè) [J]. 中國(guó)感染與化療雜志, 2011(5): 321-329.

[9] 胡付品,朱德妹,汪復(fù),等. 2011年中國(guó)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志, 2012(5):321-329.

[10]汪復(fù),朱德妹, 胡付品,等. 2012 年中國(guó) CHINET 細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 中國(guó)感染與化療雜志, 2013(5)：321-330

[11]張淑清．產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)氨基糖苷類藥物耐藥基因研究[J]．中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)， 2012(16)：299-301．

[12]Jacoby GA. Genetics of extended-spectrum beta-lactamases[J]. European Journal of Clinical Microbiology and Infectious Diseases, 1994(1):2-11.

[13] 席學(xué)莉, 馬文, 桂坤, 等. 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌院內(nèi)肺部感染情況及耐藥性分析[J]. 貴州醫(yī)藥, 2002(7): 612-613.

[14] Domenech-Sanchez A, Pascual A, Suarez AI, et al. Activity of nine antimicrobial agents against clinical isolates of klebsiella paeumoniae producing extended-spectrum β-lactamases and deficient or not in porins[J]. J Antimicrob Chemother, 2000(46):858-859

[15]吳開明. 大腸埃希菌的分離及耐藥情況分析[J]. 大家健康, 2013(5)：42-43.

(2014-09-13收稿，2014-11-17修回)

中文編輯： 周凌； 英文編輯： 劉華

Detection Rate ofEscherichiacolifrom 2008 to 2013

and An Analysis of Its Drug Resistance

ZHANG Shuai1, FEI Ying2, JIAO Yanchao3

(1.DepartmentofClinicalLaboratoryScience,GuiyangMedicalCollege,Guiyang550004,Guizhou,China; 2.Laboratory

ofMicrobiologyandImmunology,TheAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege,Guiyang550004，Guizhou,

China; 3.GuizhouEntry-exitInspection&QuarantineBureau,Guiyang550004,Guizhou,China)

[Abstract]Objective: To investigate detection rate of Escherichia coli (E. coli) from January 2008 to September 2013 and to analyze its drug resistance. Methods: The samples from different resources and clinical departments were collected to identify bacteria and to test their drug sensitivity. The detection rate of E. coli and drug resistance were analyzed. Especially, the detection rate of E. coli producing extended spectrum β lactamases (ESBLs) was observed. Results: During the six years from 2008 to 2013, 4 607 strains of E. coli were separated. The overall detection rates were 18.2%~26.5%. Drug resistance rates of E. coli to ampicillin, piperacillin were the highest (>91.0%), while it to imipenem was the lowest (<3.0%). During the period of 2010-2013, drug tolerance rates of E. coli to ciprofloxacin, gentamycin, compound sulfamethoxazole and tobramycin decreased (P<0.05). The drug resistance rate of E. coli from blood samples was lower than that from other sources. The drug resistance rate of ICU-sourced E.coli to common antibiotics was generally in higher level, followed by those from departments of surgery and pediatrics；The detection rate of E.coli producing ESBLs was 37% in 2010 and 70.9% in 2012 showing a rising tendency. Conclusions: The isolate amount of E.coli keeps on creasing during the 6 years, the situation of drug resistance is severe, and the producing rate of ESBLs is relatively high. It is suggested to strengthen the administration rationality of antibiotics.

[Key words]E. coli; drug tolerance; bacteria; antibiotics; extended spectrum β lactamases

[中圖分類號(hào)]R446.51

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1000-2707(2015)01-0048-04

通信作者*E-mail:645903661@qq.com網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015-01-13