劉曉楠，張文超

口腔癌相關(guān)microRNA研究進(jìn)展

劉曉楠，張文超△

口腔癌是常見(jiàn)的頭頸部惡性腫瘤，局部復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移是其預(yù)后差的主要因素，但具體分子機(jī)制尚不清楚。研究發(fā)現(xiàn)，微小RNA（microRNA）在口腔癌的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移中起到重要作用，有望成為有價(jià)值的診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。本文就口腔癌相關(guān)microRNA的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

口腔癌；微小RNA；進(jìn)展；治療；預(yù)后；綜述

微小RNA（microRNA）是由內(nèi)源性發(fā)夾結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物衍生而來(lái)的一種長(zhǎng)19～25 nt的單鏈RNA，通過(guò)堿基配對(duì)與靶mRNA結(jié)合從而在轉(zhuǎn)錄后水平引起靶mRNA的剪切或翻譯的抑制［1］。目前研究表明，microRNA的異常表達(dá)與口腔癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移及疾病預(yù)后有關(guān)［2］，成為近年研究的熱點(diǎn)。

1 口腔癌相關(guān)microRNA概述

口腔癌是最常見(jiàn)的頭頸部惡性腫瘤，以鱗狀細(xì)胞癌為主，多數(shù)呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，侵襲周?chē)M織，易發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。近年來(lái)，口腔癌治療中化療、放療及修復(fù)重建技術(shù)有較大進(jìn)展，但中晚期口腔癌患者的5年生存率仍為50%左右［3］。原位復(fù)發(fā)、頸部轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率高以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是造成患者預(yù)后差、生存率低的主要原因［4］。研究表明，口腔癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中出現(xiàn)明顯異常表達(dá)的microRNA，且表達(dá)趨勢(shì)不同、作用不同［5-11］?？谇话┲斜磉_(dá)上調(diào)的microRNA有miR-21、miR-24、miR-196等，具有促癌基因活性，可通過(guò)抑制凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖、促進(jìn)腫瘤的非依賴(lài)性生長(zhǎng)、促進(jìn)遷移及侵襲等誘導(dǎo)口腔癌的惡性生物學(xué)行為，導(dǎo)致疾病的進(jìn)展［5-7］。miR-125a、let-7d、miR-205、miR-136等具有抑癌基因活性，可抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞周期捕獲、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞遷移侵襲等，這些基因在口腔癌中的表達(dá)下調(diào)可導(dǎo)致口腔癌的發(fā)生發(fā)展，并造成口腔癌患者的生存期縮短、疾病復(fù)發(fā)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［8-11］。

2 microRNA在口腔癌中的作用機(jī)制

口腔癌的發(fā)生與多種因素有關(guān)，如吸煙、飲酒、不良口腔衛(wèi)生、義齒、咀嚼檳榔、人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染等，但其分子生物學(xué)機(jī)制尚不十分清楚。研究表明，microRNA可以通過(guò)調(diào)控癌基因的表達(dá)、細(xì)胞增殖凋亡、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）等過(guò)程參與口腔癌的發(fā)生發(fā)展［5，9，13］。

miR-21在多種實(shí)體惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào)，具有癌基因活性，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、凋亡及侵襲。miR-21的表達(dá)水平與舌癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其在早期舌癌中的表達(dá)水平是正常組織的8.29倍，在晚期舌癌中達(dá)到37.89倍，其作用機(jī)制為沉默TPM1和PTEN，抑制舌癌細(xì)胞凋亡、促進(jìn)舌癌細(xì)胞增殖［5］。舌癌患者血漿中miR-24呈高表達(dá)，且T4期患者的表達(dá)水平顯著高于T1～T3期，其通過(guò)作用于抑癌基因P57促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)［12］。另一項(xiàng)研究揭示miR-24通過(guò)下調(diào)RNA結(jié)合蛋白-終端蛋白1（DND1），并在轉(zhuǎn)錄后水平抑制其下游基因周期依賴(lài)酶抑制因子1B（CDKN1B）的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)舌癌細(xì)胞的增殖，抑制凋亡［6］。

Let-7是一個(gè)高度保守的表達(dá)下調(diào)的microRNA家族，在生物發(fā)育、細(xì)胞增殖與凋亡、腫瘤發(fā)生方面有重要作用。Let-7通過(guò)調(diào)控靶基因RAS、c-MYC、HMGA等的表達(dá)而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡［13］。Let-7通過(guò)調(diào)控高遷移率蛋白HMGA2抑制包括食管癌、非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌等實(shí)體腫瘤的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移［14-16］。近期有研究報(bào)道let-7d在舌癌中表達(dá)下調(diào)，EMT相關(guān)標(biāo)志物Twist、Snail的表達(dá)上調(diào)，侵襲能力提高；而應(yīng)用SPONGE技術(shù)敲降舌癌細(xì)胞系let-7d后，不但導(dǎo)致侵襲性增加，而且對(duì)化療藥物順鉑和5-氟尿嘧啶（5-FU）的耐藥性增加［9］。Sasahira等［17］發(fā)現(xiàn)miR-126在口腔癌中的表達(dá)下調(diào)，其主要通過(guò)負(fù)性調(diào)節(jié)微血管生成因子（VEGF）-A的表達(dá)促進(jìn)腫瘤血管形成及淋巴管形成，導(dǎo)致口腔癌的侵襲轉(zhuǎn)移。

3 microRNA與口腔癌的診斷治療

3.1 microRNA與口腔癌的病理演進(jìn)及診斷 口腔癌前病變具有不同的潛在的癌變傾向，口腔黏膜白斑是一種口腔黏膜的白色斑片，約有16%～62%的口腔癌由口腔黏膜白斑進(jìn)展而來(lái)。有研究發(fā)現(xiàn)miR-10b、miR-708在進(jìn)展性口腔黏膜白斑中表達(dá)顯著升高，miR-145、miR-99b、miR-181c的表達(dá)顯著下調(diào)［18］。Momen-Heravi等［11］研究顯示口腔癌患者唾液中miR-27b的表達(dá)水平顯著高于口腔扁平苔蘚患者以及健康人。以上結(jié)果提示雖然組織活檢是鑒別口腔癌前病變與口腔癌的金標(biāo)準(zhǔn)，但檢測(cè)唾液中microRNA的表達(dá)差異將有助于口腔癌的早期診斷。

口腔癌的發(fā)生是一個(gè)從正常組織—低級(jí)別瘤變—中級(jí)別瘤變—高級(jí)別瘤變—原位癌—浸潤(rùn)癌的逐漸進(jìn)展過(guò)程。microRNA的表達(dá)與組織病理學(xué)進(jìn)展相關(guān)，microRNA的檢測(cè)有助于疾病進(jìn)展的診斷。Cervigne等［19］在對(duì)進(jìn)展性與非進(jìn)展性口腔黏膜白斑的研究中發(fā)現(xiàn)，miR-21、miR-345和miR-181b的表達(dá)水平隨著疾病進(jìn)展持續(xù)升高。Brito等［20］發(fā)現(xiàn)口腔癌、黏膜白斑、正常組織中microRNA的表達(dá)水平與細(xì)胞病理學(xué)特征相關(guān)，miR-21、miR-345和miR-181b在口腔癌中的表達(dá)顯著高于口腔黏膜白斑和正常黏膜組織。而在有絲分裂象增多、核質(zhì)比高、染色深的口腔黏膜白斑細(xì)胞中miR-21、miR-181b的表達(dá)增高。在細(xì)胞核增多或體積增大，核質(zhì)比高的口腔黏膜白斑中miR-345高表達(dá)。監(jiān)測(cè)miR-21、miR-345和miR-181b的表達(dá)水平在診斷口腔黏膜白斑的惡性轉(zhuǎn)變中具有重要指導(dǎo)意義。

3.2 microRNA與口腔癌的治療 目前，中晚期口腔癌的治療方式仍以手術(shù)治療為主，但手術(shù)部位深在，入路及切除難度大，切除后經(jīng)常影響到外貌、發(fā)音、咀嚼、吞咽等重要生理功能，從而導(dǎo)致患者的生存質(zhì)量較差。同時(shí)，對(duì)放化療的抵抗也是造成中晚期舌癌治療效果差的重要因素。因此，探索口腔癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制，尋找新的治療靶點(diǎn)，減少手術(shù)對(duì)中晚期口腔癌患者造成的損傷以及對(duì)放化療的抵抗具有重要意義。

在順鉑耐藥細(xì)胞系中，miR-200b和miR-15b低表達(dá)，其通過(guò)作用于靶基因BMI1調(diào)節(jié)舌癌轉(zhuǎn)移過(guò)程中的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程，從而增加了舌癌的化療耐藥性［21］。Shiiba等［22］證明提高口腔癌細(xì)胞miR-125b的表達(dá)水平，可以降低細(xì)胞間黏附分子2（ICAM2）的表達(dá)，并且使口腔癌細(xì)胞對(duì)放療的敏感性增加。miR-21通過(guò)作用于Wnt/β-catenin信號(hào)通路中的DKK2位點(diǎn)促進(jìn)舌癌的侵襲，提示其可以作為舌癌靶向治療的潛在靶點(diǎn)［23］。JAK-STAT信號(hào)途徑是參與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的重要信號(hào)通路。研究表明，應(yīng)用小分子抑制劑抑制JAK-STAT信號(hào)通路中的信號(hào)分子STAT3，可降低舌鱗癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力，STAT3可作為人舌鱗癌治療的分子靶點(diǎn)［24］。

4 microRNA與口腔癌的預(yù)后

影響口腔癌預(yù)后的因素包括臨床分期、病理學(xué)分級(jí)、是否有HPV感染、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。microRNA作為分子生物學(xué)指標(biāo)在臨床判斷口腔癌的預(yù)后方面具有一定的指導(dǎo)意義。在對(duì)103例舌癌患者癌組織及其癌旁組織的研究中發(fā)現(xiàn)，miR-21在癌組織高表達(dá)，并且進(jìn)展期舌癌患者的表達(dá)率高于早期患者，miR-21可以作為舌癌評(píng)估患者預(yù)后的獨(dú)立因素［5］。在另一項(xiàng)對(duì)86例舌癌患者的癌組織及癌旁組織的研究發(fā)現(xiàn)，miR-21高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞間質(zhì)及血管中，而在癌旁組織中并不表達(dá)；并且細(xì)胞間質(zhì)中miR-21的表達(dá)水平與舌癌無(wú)病生存期（DFS）以及預(yù)后密切相關(guān)［25］。let-7表達(dá)下調(diào)協(xié)同靶基因RAS的表達(dá)上調(diào)不僅會(huì)促進(jìn)口腔癌的侵襲轉(zhuǎn)移，而且let-7與靶基因結(jié)合位點(diǎn)（LCSs）的單核苷酸多態(tài)性（SNP）會(huì)導(dǎo)致口腔癌患者生存率顯著下降，是口腔癌預(yù)后差的重要指標(biāo)［26］。

5 結(jié)語(yǔ)

microRNA在口腔癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，在口腔癌的進(jìn)展過(guò)程中microRNA的表達(dá)水平隨之變化，有利于口腔癌的早期診斷以及疾病進(jìn)展的監(jiān)測(cè)。并且隨著研究的深入，其生物學(xué)功能得以逐漸揭示，通過(guò)RNAi或反義核苷酸抑制上調(diào)的microRNA的表達(dá)，促進(jìn)下調(diào)的microRNA的表達(dá)，抑制口腔癌的生長(zhǎng)、分化、侵襲、轉(zhuǎn)移，可能為口腔癌的治療提供一種新的方法，從而降低以手術(shù)為主的治療對(duì)其造成的生理功能以及心理狀態(tài)的影響，改善其生存預(yù)后。

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（2014-09-23收稿 2014-11-12修回）

（本文編輯 閆娟）

Research advances of microRNA related to oral cancer

LIU Xiaonan，ZHANG Wenchao△
Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital，National Clinical Research Center for Cancer&Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy，Tianjin 300060
△Corresponding Author E-mail:zwbeyond_999@sina.com

Oral cancer is a common cancer of head and neck.Regional recurrence and metastasis are the main course of the poor prognosis.But the exact molecular mechanism is still unknown.Studies have showed that microRNA plays an important role in the tumorigenesis，invasion and metastasis of oral cancer.And it is expected to become a valuable diagnostic marker and therapeutic target.This paper makes a review about the microRNA related to oral cancer.

oral cancer；microRNA；progression；therapy；prognosis；review

R739.8

A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.05.031

天津市衛(wèi)生局科技基金資助項(xiàng)目（2011kz75）

天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院、國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心、天津市“腫瘤防治”重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（郵編300060）

劉曉楠（1988），女，碩士在讀，主要從事頭頸部腫瘤研究

△及審校者 E-mail:zwbeyond_999@sina.com