喬曉孟，殷芳圓，李云肖，魏曙光，賴江華

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大鼠基底外側(cè)杏仁核組蛋白乙?；瘜岱瘸砂a記憶的調(diào)控作用

喬曉孟，殷芳圓，李云肖，魏曙光，賴江華

西安交通大學(xué)法醫(yī)學(xué)院 ， 西安 710061

為了探索組蛋白乙?；瘜岱瘸砂a記憶相關(guān)分子表達(dá)調(diào)控機(jī)制，文章選取健康成年雄性SD大鼠34只，隨機(jī)分為正常對照組(n = 6)及基底外側(cè)杏仁核(Basolateral amygdala, BLA)顱內(nèi)定位手術(shù)組(n =28)。在條件性位置偏愛(Conditioned place preference, CPP)訓(xùn)練階段，大鼠BLA內(nèi)給予組蛋白去乙?；敢种苿┣乓志谹(Trichostafin A, TSA)并且腹腔注射嗎啡溶液(10.0 mg/kg)，對照組給予相同體積的10%二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)或鹽水。應(yīng)用蛋白質(zhì)印記方法，檢測嗎啡誘導(dǎo)大鼠CPP建立后BLA內(nèi)組蛋白H3K14乙酰化和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示，腹腔注射10 mg/kg嗎啡能成功建立CPP。嗎啡、TSA聯(lián)合給藥組大鼠比單純嗎啡給藥組大鼠表現(xiàn)出更強(qiáng)烈的CPP(<0.0001)。嗎啡和TSA都能使BLA內(nèi)的組蛋白H3乙酰化水平和BDNF的表達(dá)顯著增高(< 0.0001)，同時(shí)二者之間具有協(xié)同作用。結(jié)果表明，大鼠BLA內(nèi)組蛋白乙?；脚c嗎啡成癮記憶形成有關(guān)，抑制BLA內(nèi)組蛋白去乙?；?Histone deacetylases, HDACs)的活性可強(qiáng)化嗎啡誘導(dǎo)的線索記憶的形成；大鼠BLA內(nèi)BDNF參與了嗎啡誘導(dǎo)的線索記憶的形成并可能受到組蛋白乙?；恼{(diào)控。

嗎啡；條件性位置偏愛；基底外側(cè)杏仁核；組蛋白乙酰化

藥物成癮是一種慢性、復(fù)發(fā)性腦疾病，其主要特征為對藥物的耐受、強(qiáng)烈渴求、強(qiáng)迫性覓藥行為，以及中斷用藥后出現(xiàn)戒斷癥狀[1]，不僅會(huì)給成癮者自身造成嚴(yán)重的精神和軀體危害，還會(huì)引起嚴(yán)重的社會(huì)經(jīng)濟(jì)和公共衛(wèi)生問題?！?013年中國禁毒報(bào)告》顯示，截至2012年底，我國登記在冊的吸毒人數(shù)有209.8萬余，其中濫用阿片類毒品者有127.2萬人，占60.6%。目前對以嗎啡為代表的阿片類藥物成癮的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制仍知之甚少，并且對阿片類藥物成癮的臨床防治也缺乏理論指導(dǎo)。因此，對嗎啡成癮的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行研究就顯得十分緊要和迫切。

研究提示，表觀遺傳變異的長時(shí)穩(wěn)定性可能是成癮記憶長期存在的一個(gè)重要機(jī)制[2]。組蛋白乙?；潜碛^修飾的重要方式之一，越來越多的證據(jù)表明，組蛋白的乙?；?去乙酰化調(diào)控機(jī)制在許多重大腦功能中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，如神經(jīng)元分化[3]、神經(jīng)退行性變[4,5]、晝夜比率[6]、癲癰發(fā)作[7,8]、記憶形成及藥物成癮[9~11]。組蛋白去乙?；?Histone deacetylases, HDACs)可通過催化組蛋白殘基末端的去乙?；磻?yīng)來調(diào)節(jié)下游基因的表達(dá)，從而產(chǎn)生持久的神經(jīng)生物學(xué)改變并最終影響個(gè)體行為調(diào)控。然而，HDACs在嗎啡成癮記憶形成中的作用及其對記憶相關(guān)重要基因的表達(dá)調(diào)控尚不清楚。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)已經(jīng)被證明對學(xué)習(xí)記憶、突觸可塑性以及維持多巴胺能神經(jīng)元的存活和功能起到十分重要的作用[12]，然而在慢性嗎啡作用下這些分子的具體變化尚未見報(bào)道。本研究通過觀察大鼠嗎啡成癮條件性位置偏愛(Conditioned place preference, CPP)建立后大鼠BLA內(nèi)組蛋白H3K14的乙酰化水平和BDNF的蛋白表達(dá)水平，探索組蛋白乙?；瘜τ洃浵嚓P(guān)分子的表達(dá)調(diào)控。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康成年雄性SD大鼠34只，8周齡左右，體重230~250 g，由西安交通大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。隨機(jī)分為正常對照組(即homecage組，不參與任何手術(shù)及訓(xùn)練；= 6)、基底外側(cè)杏仁核(Basolateral amygdala, BLA)顱內(nèi)定位手術(shù)組(= 28)。BLA顱內(nèi)定位手術(shù)根據(jù)造模后的不同給藥方案分為4個(gè)亞組，分別為：鹽水+二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide, DMSO)組(saline + DMSO,= 7)，鹽水+曲古抑菌素A(Tri-chostafin A，TSA)組(saline + TSA,= 7)，嗎啡+DMSO組(morphine + DMSO,= 7)，嗎啡+TSA組(morphine + TSA,= 7)。各組分籠飼養(yǎng)，自由飲水、進(jìn)食。

1.2 BLA顱內(nèi)定位術(shù)

大鼠用20%戊巴比妥鈉，按50 mg/kg腹腔注射麻醉。俯臥位固定于大鼠腦立體定位儀(深圳瑞沃德生命科技公司)上，沿顱頂正中線切開皮膚，暴露頭骨，按照G. Paxinos大鼠腦立體定位圖譜第五版[13]定位：前囟?2.9 mm；中線兩側(cè)旁±5.0 mm；距顱骨表面高度?7.5 mm，用標(biāo)記筆標(biāo)記，用牙科鉆在標(biāo)記處鉆孔，在顱骨表面固定2顆微型螺釘，去除進(jìn)樣器，先左后右，分別插入套管至BLA注射區(qū)，用玻璃離子體水門汀(粉：水=1 : 1)覆蓋整個(gè)腦切面待干燥后抹一層牙托粉(義齒基托樹脂Ⅱ型)進(jìn)一步固定。每次BLA內(nèi)微量給藥時(shí)，用尖端突出于引導(dǎo)套管1.0 mm、容量為1.0 μL的微量注射器，抽吸1.0 μL的TSA(美國Sigma-Aldrich公司)溶液，將注射器經(jīng)引導(dǎo)套管插入BLA上方，用同一速度緩慢推注藥物注射入BLA，注射用時(shí)大于60 s。藥物全部推進(jìn)完畢后針頭原位停留60 s以促進(jìn)藥物在腦組織中的擴(kuò)散，并防止外溢。對照組大鼠雙側(cè)給予10%DMSO(美國Sigma-Aldrich公司)作為對照。

1.3 嗎啡CPP模型的建立與測試

自然偏愛測試(1~2 d)：建立CPP前，第1 d上午8: 00將實(shí)驗(yàn)箱(上海吉量軟件科技公司)隔板取走，讓大鼠自由在實(shí)驗(yàn)箱兩側(cè)適應(yīng)觀察15 min，第2 d讓大鼠在箱子內(nèi)自由走動(dòng)15 min，并記錄其在兩側(cè)各停留的時(shí)間，確定大鼠偏好傾向，以非天然偏愛箱(白箱)為嗎啡伴藥箱。嗎啡CPP建立：第3 d，嗎啡組大鼠BLA核團(tuán)內(nèi)微量注射165mmol/L的TSA溶液(溶于DMSO中)或等體積的10%DMSO，30 min后腹腔注射10 mg/kg嗎啡(沈陽第一制藥廠)溶液，然后將其放置于白箱，用隔板封閉CPP箱，使大鼠在白箱中訓(xùn)練30 min；同時(shí)，鹽水組BLA內(nèi)注射TSA或DMSO，隨后腹腔注射生理鹽水，然后將其放置于白箱，用隔板封閉CPP箱，使大鼠在白箱中訓(xùn)練30 min。第4 d，所有大鼠BLA內(nèi)給藥后均腹腔注射生理鹽水，然后將其放置于黑箱，用隔板封閉CPP箱，使大鼠在黑箱中訓(xùn)練30 min。條件性測試：第5 d，所有大鼠均不給予任何藥物，將CPP箱中間的隔板打開，使大鼠可在兩箱中自由穿梭，測試時(shí)間為15 min (900 s)，記錄大鼠在各箱中的停留時(shí)間、活動(dòng)路程及穿梭次數(shù)。

為更好地觀察TSA對嗎啡CPP建立過程的影響，本研究共經(jīng)歷4個(gè)訓(xùn)練循環(huán)(3~4 d、6~7 d、9~10 d、12~13 d)和4次條件性測試(5 d、8 d、11 d、14 d)，如圖1所示。

1.4 蛋白檢測

CPP測試結(jié)束后即刻以頸椎脫臼法處死大鼠，剝離大腦，分離BLA組織，每20 mg加入1.0 mL預(yù)冷的RIPA裂解液(預(yù)先加入蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑)，提取蛋白質(zhì)。加入樣品緩沖液，沸水浴5 min，離心后取上清，進(jìn)行12%SDS-PAGE電泳，采用半干法將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜。用5%的牛血清蛋白封閉液室溫封閉PVDF膜2 h。將抗乙酰化組蛋白H3K14兔多克隆抗體(美國Cell Signaling Technology公司)、抗BDNF兔多克隆抗體(美國Abcam Technology公司)、抗GAPDH小鼠多克隆抗體(美國Cell Signaling Technology公司)用封閉液稀釋至1:1000濃度，4℃冰箱孵育過夜。TBS-T洗膜3次，每次10 min，將相應(yīng)的二抗用TBS-T稀釋至1：10000，室溫下孵育1.5 h。TBS-T洗膜4次，每次10 min，進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測。采用美國Bio-Rad公司的Quantity One軟件分析條帶結(jié)果，計(jì)算條帶的光密度，進(jìn)行相對定量分析。計(jì)算檢測的目的蛋白與內(nèi)參蛋白(GAPDH)條帶的光密度比值來表示檢測蛋白的相對表達(dá)水平。

圖1 嗎啡CPP流程圖

M: 嗎啡; S: 鹽水。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

采用GraphPad Prism 6.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果均使用均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SEM)來表示。大鼠總活動(dòng)距離、總穿梭次數(shù)以及CPP評分均采用重復(fù)測量的雙因素方差分析并采用Tukey’s post hoc 檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較。BLA內(nèi)BDNF表達(dá)量以相對于各組中Sal+DMSO組的相對倍數(shù)表示，采用雙因素方差分析研究嗎啡和TSA對蛋白表達(dá)的影響。以< 0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 大鼠體重變化

2.1.1 手術(shù)恢復(fù)期

手術(shù)結(jié)束后，大鼠經(jīng)歷連續(xù)5 d的恢復(fù)期，以消除因手術(shù)應(yīng)激、傷痛、感染等因素影響總體代謝，從而對行為學(xué)實(shí)驗(yàn)造成干擾。在恢復(fù)期，本文測量了大鼠的體重變化，如圖2所示。雙因素方差分析表明，在整個(gè)恢復(fù)期手術(shù)組(experimental，n = 28)大鼠體重與Hc組(homecage，n = 6)相比沒有明顯區(qū)別(Ftime (4, 150)= 0.9523，= 0.4357；Fexperimental (1, 150)= 0.03969，= 0.8424)。在恢復(fù)期結(jié)束時(shí)，手術(shù)組大鼠平均體重為252.2±18.3 g，Hc組大鼠平均體重為256.5±16.7 g，說明手術(shù)組大鼠經(jīng)歷5 d的恢復(fù)期后，其基礎(chǔ)代謝水平與對照組無顯著差異。這一結(jié)果提示，手術(shù)或可能造成的疼痛、應(yīng)激等因素并未對大鼠進(jìn)食和能量代謝造成嚴(yán)重影響。

圖2 大鼠恢復(fù)期體重變化

2.1.2 CPP實(shí)驗(yàn)期

本文分別測量了前測階段(1 d、2 d)和4次CPP測試(5、8、11、14 d)時(shí)的大鼠體重，見圖3。雙因素方差分析表明，在為期14 d的CPP訓(xùn)練和測試階段，所有大鼠的體重皆有顯著增長(Ftime(5,162)=16.18，<0.0001)，各個(gè)藥物處理組大鼠的體重變化與Hc組相比沒有明顯區(qū)別(Ftreatment (4, 162)= 1.615，= 0.3066)。在CPP實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，Hc組大鼠平均體重為213.3± 12.2 g，Sal(Saline)+DMSO組為215.2±15.0 g，Sal+ TSA組為329.4±13.1 g，Mor(Morphine)+DMSO組為293.6±12.6 g，Mor+TSA組為304.2±16.0 g。這說明大鼠BLA內(nèi)給予TSA(165mmol/L)并且腹腔注射10.0 mg/kg嗎啡溶液不會(huì)顯著影響大鼠基礎(chǔ)代謝，也可以排除總體代謝差異對腦內(nèi)分子變化的干擾。

2.2 CPP行為測試

CPP行為測試結(jié)果如圖4所示。Pre-test的CPP評分表明4個(gè)實(shí)驗(yàn)組大鼠之間基礎(chǔ)偏愛值沒有差異，所有大鼠皆自然偏愛黑箱且在黑箱中的停留時(shí)間基本相同，CPP評分在?46.0~?149.6 s之間。Sal+ TSA組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均未產(chǎn)生顯著的CPP，表明BLA內(nèi)給165mmol/L TSA本身不具有獎(jiǎng)賞效應(yīng)，不能誘導(dǎo)位置偏愛的形成。Mor+DMSO組大鼠在Test 3(< 0.01)和Test 4(< 0.0001)中表現(xiàn)出顯著的伴藥箱(白箱)偏愛，表明腹腔注射10 mg/kg嗎啡可成功誘導(dǎo)大鼠建立CPP。Mor+TSA組大鼠在接受第一個(gè)循環(huán)的條件性訓(xùn)練后(Test 1，<0.05)即表現(xiàn)出顯著的位置偏愛，而這種強(qiáng)烈的位置偏愛一直持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束(Test 4，<0.0001)依然存在。

2.3 BLA內(nèi)組蛋白乙酰化及BDNF的表達(dá)變化

2.3.1 組蛋白H3乙?；淖?/p>

雙因素方差分析表明，嗎啡和TSA對BLA內(nèi)組蛋白H3K14乙?；骄哂酗@著影響(Fmorphine(1,28)= 68.1，< 0.0001；FTSA (1, 28)= 134，<0.0001)，如圖5所示。Mor+TSA聯(lián)合給藥后，BLA內(nèi)的組蛋白H3乙?；奖萐al+DMSO組增高4.82倍，與Mor+ DMSO組相比也明顯增高(<0.05)。以上結(jié)果提示，腹腔注射嗎啡或BLA內(nèi)給予TSA(165mmol/L)皆能顯著提高BLA內(nèi)組蛋白H3(K14)乙?；?，且二者具有協(xié)同作用。

2.3.2 BDNF表達(dá)改變

油茶病蟲害較少，主要是油茶炭疽病、油茶軟腐病、油茶煤污病和油茶尺蠖（又叫量步蟲）。均造成一定程度的落果、落葉和枝枯，造成減產(chǎn)，但不會(huì)死樹毀林。這幾種病都與油茶林經(jīng)營管理水平密切相關(guān)。林內(nèi)通風(fēng)透光，樹體健壯，肥、水、土條件好，病枝、病葉、病果、過密枝得到及時(shí)剪除和深埋，發(fā)病就輕，反之就較重。品種的抗病能力也有差異，造林前可以選擇抗性強(qiáng)的品種。發(fā)病期，可自配波爾多液控制病情。實(shí)在有必要可噴施退菌特800倍液防治。量步蟲幼蟲身體光滑無毛，行動(dòng)遲緩，可以直接人工捕殺。

對BLA內(nèi)BDNF蛋白進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，嗎啡和TSA皆對BDNF表達(dá)具有顯著作用(Fmorphine(1,28)= 76.44，<0.0001；FTSA (1, 28)= 28.82，<0.0001)，同時(shí)二者之間具有顯著的交互作用(Fmorphine×TSA (1, 28)= 5.71，<0.05)，如圖6所示。Mor+TSA聯(lián)合給藥后，BLA內(nèi)BDNF表達(dá)比Sal+DMSO組增高3.03倍(<0.0001)。

圖3 大鼠CPP實(shí)驗(yàn)期間體重變化

圖4 大鼠CPP評分

與各次測試中Sal + DMSO組比較，*< 0.05，**< 0.01，***< 0.0001；線段所指示的兩組相互比較，#< 0.05，###< 0.0001。

圖5 乙?；M蛋白H3(aceH3K14)蛋白表達(dá)

與Sal + DMSO組比較，**< 0.01，***< 0.0001；線段所指示的兩組相互比較，#< 0.05。

圖6 BDNF蛋白表達(dá)改變

與Sal + DMSO組比較，**< 0.01，***< 0.0001。

3 討 論

隨著表觀遺傳學(xué)在后基因時(shí)代迅速發(fā)展，近年來，對表觀遺傳學(xué)的大量研究發(fā)現(xiàn)，基因表觀事件的發(fā)生與精神活性物質(zhì)的濫用和成癮有著密切的關(guān)系[14]。介導(dǎo)表觀遺傳現(xiàn)象的分子機(jī)制主要集中在DNA 甲基化和組蛋白乙?；揎梼煞N方式，其中組蛋白乙?；诮鼛啄晏岢龅谋碛^遺傳學(xué)理論中占有重要地位，在精神活性物質(zhì)所致的成癮記憶和行為敏化中也發(fā)揮著重要作用。

本研究對BLA內(nèi)組蛋白H3K14位點(diǎn)的總體乙酰化水平進(jìn)行了檢測，首次證明連續(xù)的嗎啡全身給藥可使BLA內(nèi)H3K14位點(diǎn)的乙酰化水平增高，TSA也可顯著增高H3K14位點(diǎn)的乙?；剑叶邔M蛋白H3K14乙?；哂袇f(xié)同作用。然而在BLA內(nèi)TSA和嗎啡對組蛋白H3K14的協(xié)同作用是否是導(dǎo)致TSA能強(qiáng)化嗎啡相關(guān)線索記憶的直接原因？H3K14乙酰化與藥物相關(guān)記憶的一致性變化僅僅是一種巧合還是有必然的因果聯(lián)系呢？盡管從我們目前的實(shí)驗(yàn)結(jié)果上尚不能直接得出確切結(jié)論，然而一種可能的解釋是：BLA這一腦區(qū)負(fù)責(zé)了獎(jiǎng)賞相關(guān)(正性獎(jiǎng)勵(lì)和無/負(fù)性獎(jiǎng)勵(lì))線索記憶的形成，而組蛋白乙酰化可通過某種機(jī)制促進(jìn)并加強(qiáng)了新記憶的形成過程。未來尚需運(yùn)用更具特異性的干預(yù)手段對這一問題進(jìn)行更深入的研究。

記憶的形成和存儲(chǔ)涉及神經(jīng)元的許多適應(yīng)性改變，包括神經(jīng)突觸的功能和結(jié)構(gòu)變化，而這些變化都需要相關(guān)基因的表達(dá)發(fā)生相應(yīng)變化[15]。BDNF已經(jīng)被證明對學(xué)習(xí)記憶、突觸可塑性以及維持多巴胺能神經(jīng)元的存活和功能起到十分重要的作用[12]。在本實(shí)驗(yàn)中，嗎啡所誘導(dǎo)的組蛋白乙?；黾幽茱@著提高BLA內(nèi)BDNF蛋白表達(dá)，提示BLA內(nèi)BDNF可能參與了嗎啡誘導(dǎo)的線索記憶的形成。這一結(jié)果顯示，成癮性藥物可以通加強(qiáng)組蛋白乙酰化來增加轉(zhuǎn)錄因子活性，從而提高轉(zhuǎn)錄效率并促進(jìn)突觸可塑性改變。

本研究成功建立了嗎啡誘導(dǎo)的CPP模型，并在BLA內(nèi)給予TSA對組蛋白乙酰化水平進(jìn)行干預(yù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)在TSA本身不影響CPP的狀態(tài)下，能加強(qiáng)嗎啡誘導(dǎo)的CPP形成。此外，分子結(jié)果提示嗎啡所引起的組蛋白乙?；黾訉ο掠位駼DNF的表達(dá)可能有一定的調(diào)控作用，同時(shí)說明BDNF在線索相關(guān)獎(jiǎng)賞記憶的形成中具有重要作用。根據(jù)我們目前的研究結(jié)果，要闡明嗎啡誘導(dǎo)記憶改變所涉及的表觀遺傳學(xué)機(jī)制，將來尚需從以下幾個(gè)方面進(jìn)行深入研究：

(2)本研究僅觀察了BLA內(nèi)總體水平的組蛋白H3K14乙酰化改變，由于BLA內(nèi)BDNF和DFosB與HDACs存在復(fù)雜的交互作用，未來應(yīng)采用染色質(zhì)免疫沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)技術(shù)觀察BDNF和DFosB基因啟動(dòng)子區(qū)H3乙酰化以闡明這一問題。

(3)由于大腦復(fù)雜的神經(jīng)信號傳遞通路和基因表達(dá)的調(diào)節(jié)，雖然組蛋白乙?；呀?jīng)開始用于研究藥物濫用引起的行為反應(yīng)，但是還不能用來準(zhǔn)確的解釋藥物依賴的發(fā)病機(jī)理和成癮行為的形成，在將來的研究中，從組織、細(xì)胞等多個(gè)水平結(jié)合藥物、基因等多種干預(yù)方法進(jìn)行成癮行為、線索記憶及其分子機(jī)制的研究，將是進(jìn)一步明確藥物成癮發(fā)生發(fā)展機(jī)制的重要內(nèi)容。

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[15] Guan Z, Giustetto M, Lomvardas S, Kim JH, Miniaci MC, Schwartz JH, Thanos D, Kandel ER. Integration of long-term-memory-related synaptic plasticity involves bidirectional regulation of gene expression and chromatin structure., 2002, 111(4): 483–493.

(責(zé)任編委: 方向東)

The role of histone acetylation in the basolateral amygdala in morphine-associated memory in rats

Xiaomeng Qiao, Fangyuan Yin, Yunxiao Li, Shuguang Wei, Jianghua Lai

To examine the regulatory effect of histone acetylation on memory related molecules, 34 healthy male SD rats were randomly divided into control and basolateral amygdala (BLA) intracranial positioning operation groups. In the process of conditioned place preference (CPP) training, Trichostafin A (TSA) was administrated by the route of BLA and morphine was injected into enterocoelia with dimethyl sulfoxide or saline as control. Expression levels of H3K14 acetylation and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in BLA were evaluated by Western blotting.The results showed that CPP could be established by intraperitoneal injection of morphine. Compared with control groups, a stronger place preference was established and expression of H3K14 acetylation and BDNF was significantly increased in the group treated with TSA and morphine. In addition, there was a synergistic effect between morphine and TSA. Our results suggested that the level of histone acetylation in BLA is associated with the formation of morphine memory in rats. Inhibition of the activity of histone deacetylases in BLA can promote the formation of cue-associated memory induced by morphine and the involvement of BDNF in BLA maybe was regulated by histone acetylation.

morphine; conditioned place preference; BLA; histone acetylation

2014-11-20;

2015-03-01

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號：81172910)資助

喬曉孟，博士研究生，專業(yè)方向：法醫(yī)物證學(xué)。E-mail: xiaomeng416520@126.com

賴江華，教授，研究方向：藥物成癮分子機(jī)制研究。E-mail: Laijh1011@mail.xjtu.edu.cn

10.16288/j.yczz.14-406

2015-3-11 9:19:22

http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1913.R.20150311.0919.003.html