蘇冬娜 吳詩品 (深圳市人民醫(yī)院暨南大學(xué)第二臨床學(xué)院感染內(nèi)科，廣東 深圳 518020)

乙肝相關(guān)性肝癌組織中IMP3與IGF2表達(dá)及與臨床病理的相關(guān)性

蘇冬娜 吳詩品 (深圳市人民醫(yī)院暨南大學(xué)第二臨床學(xué)院感染內(nèi)科，廣東 深圳 518020)

目的 探討乙肝相關(guān)性肝癌組織中胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)mRNA結(jié)合蛋白3(IMP3)與IGF2的表達(dá)及與臨床病理的相關(guān)性。方法 選擇該院2013年1月至2014年12月收治的60例乙肝相關(guān)性肝癌患者，分別檢測(cè)其肝癌組織及癌旁正常組織中IMP3及IGF2的表達(dá)情況，并分析其與患者臨床病理特征的相關(guān)性以及兩種標(biāo)志物之間的相關(guān)性。結(jié)果 IMP3及IGF2在肝癌組織中的陽性表達(dá)率均明顯高于癌旁組織(P＜0.05);IMP3及IGF2的表達(dá)陽性率在低分化組織中、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、伴有門脈栓癌、有轉(zhuǎn)移組織及Edmondson-Steiner分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)中均明顯增高;IMP2及IGF2在肝癌組織中的表達(dá)具有顯著相關(guān)性(r=0.32，P＜0.05)。結(jié)論 乙肝相關(guān)性肝癌患者的癌癥組織中IMP3和IGF2的表達(dá)均顯著增強(qiáng)，同時(shí)IMP3及IGF2的表達(dá)具有顯著相關(guān)性，通過對(duì)IMP3作用機(jī)制的探討與研究，可將其作為臨床癌癥診斷和治療的靶分子。

肝癌;IMP3;IGF2

通過手術(shù)切除腫瘤是臨床治療肝癌最有效的手段，可明顯提高患者生存率〔1〕。手術(shù)治療雖能延長(zhǎng)患者的生存期，但術(shù)后復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移對(duì)患者的生存造成巨大威脅。胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)mRNA結(jié)合蛋白3(IMP3)是VICKZ家族中的重要成員之一，是IGF2 mRNA連接蛋白，參與胚胎形成早期的細(xì)胞生長(zhǎng)和遷移〔2〕。研究〔3〕發(fā)現(xiàn)，IMP3與肝癌組織中的細(xì)胞增殖及遷移密切相關(guān)。本研究旨在探討IMP3和IGF2兩種指標(biāo)與患者臨床病理的相關(guān)性，為臨床乙肝相關(guān)性肝癌的診斷和治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2013年1月至2014年12月收治的60例乙肝相關(guān)性肝癌患者，均經(jīng)術(shù)后病理結(jié)果證實(shí)。其中男33例，女27例;年齡39～82歲，平均(59.2±5.2)歲;依據(jù)美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)最新TNM分期標(biāo)準(zhǔn):I～Ⅱ期42例，Ⅲ～Ⅳ期18例;分化程度:高分化10例，中分化31例，低分化19例;根據(jù)Edmondson-Steiner分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ ～Ⅱ級(jí)32例，Ⅲ ～Ⅳ級(jí)28例。所有患者術(shù)前均未行輔助放化療。另選擇患者癌旁正常肝組織作為對(duì)照。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 試劑 一抗兔抗人IMP3及IGF2多克隆抗體、二抗生物素標(biāo)記抗IgG抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記抗IgG抗體、枸櫞酸抗原修復(fù)液、DAB顯色劑、蘇木素染液及SP試劑盒購買自北京中杉金橋公司。

1.2.2 標(biāo)本組織切片制備 離體標(biāo)本用組織陣列儀按照陣列設(shè)計(jì)抽提病理蠟塊組織芯并有規(guī)律的排列在空白受體蠟塊上，并在52℃恒溫箱中加熱融合，制成組織蠟塊。用全自動(dòng)組織切片機(jī)制備5 μm組織切片。

1.2.3 免疫組化檢測(cè) 采用SP免疫組化法，對(duì)組織切片進(jìn)行脫蠟、修復(fù)及磷酸鹽緩沖液(PBS)漂洗等處理，繼而加入一抗4℃孵育過夜，后加入二抗37℃水浴鍋恒溫孵育60 min，DAB顯色、蘇木素復(fù)染、脫水、封片，顯微鏡下觀察染色情況。

1.3 結(jié)果判斷 IMP3為胞質(zhì)染色，IGF2為胞質(zhì)及胞核染色，顯微鏡下對(duì)陽性細(xì)胞數(shù)及染色強(qiáng)度進(jìn)行檢查，著色細(xì)胞數(shù)＞50%且染色較深者計(jì)為強(qiáng)陽性();著色細(xì)胞數(shù)＜50%或染色較淺者計(jì)為陽性(+);無著色細(xì)胞計(jì)為陰性(－)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用 SPSS16.0軟件，采用 χ2檢驗(yàn)、Chisquare檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)、Pearson檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 IMP3及IGF2在肝癌組織及癌旁組織中的表達(dá) IMP3及IGF2在肝癌組織中的陽性表達(dá)率分別為68.3%(41/60)和63.3%(38/60)，均明顯高于癌旁組織中的1.7%(1/60)及13.3%(8/60)(P＜0.05)。

2.2 IMP3及IGF2的表達(dá)與肝癌病理相關(guān)性分析 IMP3及IGF2在肝癌組織中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大小未表現(xiàn)出明顯的相關(guān)性(P＞0.05);而IMP3及IGF2的表達(dá)陽性率在高、中、低分化組織中明顯不同，在低分化組織中最高，同時(shí)，IMP3及IGF2表達(dá)陽性率在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期明顯高于Ⅰ～Ⅱ期，在伴有門脈栓癌中明顯高于無門脈栓癌，在有轉(zhuǎn)移組織中明顯高于無轉(zhuǎn)移組織，在Edmondson-Steiner分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)明顯高于Ⅰ～Ⅱ級(jí)(P＜0.05)。見表1。

2.3 IMP3與IGF2在肝癌組織中表達(dá)的相關(guān)性分析 IMP2及IGF2同時(shí)表達(dá)陽性率為53.3%(32/60)，同時(shí)表達(dá)陰性率為21.7%(13/60)，兩者在肝癌組織中的表達(dá)具有顯著相關(guān)性(r=0.32，P＜0.05)。

表1 IMP3及IGF2陽性表達(dá)與肝癌病理相關(guān)性分析(n)

3 討論

肝癌是臨床常見的惡性腫瘤，發(fā)病率及死亡率均較高，造成肝癌發(fā)病的原因主要包括乙肝和長(zhǎng)期飲酒。目前對(duì)于乙肝相關(guān)性肝癌的發(fā)病機(jī)制尚不明確，近年來隨著生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展，對(duì)于肝癌的發(fā)病機(jī)制主要從分子的調(diào)控與表達(dá)、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能以及蛋白質(zhì)在細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡中的作用進(jìn)行詮釋〔4〕。目前，臨床已發(fā)現(xiàn)多種肝癌相關(guān)性分子標(biāo)志物，這些標(biāo)志物可參與肝癌組織細(xì)胞的生長(zhǎng)、凋亡、轉(zhuǎn)移及侵襲等。其中IMP3及IGF2是新發(fā)現(xiàn)的肝癌診斷標(biāo)志物〔5〕。

IMP3是近年新發(fā)現(xiàn)的一類癌胚蛋白，其在人和小鼠胚胎早期上皮、肌肉及胎盤組織中均有表達(dá)，而在成人組織中表達(dá)較低或不表達(dá)〔6〕。目前研究〔7〕證實(shí)，IMP3在多種惡性腫瘤中表達(dá)，且其表達(dá)程度及強(qiáng)度可作為腫瘤診斷和治療的靶分子標(biāo)志物。IGF2已被證實(shí)可以自分泌或者旁分泌的形式促進(jìn)腫瘤原位生長(zhǎng)。研究〔8〕顯示，晚期結(jié)腸癌中IGF2的表達(dá)較高，表明其可促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。IGF2異常不僅與肝癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，同時(shí)與腫瘤的增殖、轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)均有密切關(guān)系。本研究進(jìn)一步表明肝癌的發(fā)生發(fā)展與IMP3和IGF2的表達(dá)具有顯著相關(guān)性，該兩種標(biāo)志物可作為肝癌診斷和治療的靶分子。有研究〔9〕報(bào)道，IMP3和IGF2在肝癌組織的表達(dá)情況與患者組織分級(jí)、分化程度、腫瘤體積等密切相關(guān)，IMP3和IGF2均為胰島素相關(guān)生長(zhǎng)因子，IMP3被認(rèn)為是IGF2的翻譯激活因子，本研究提示IMP3可通過增強(qiáng)IGF2表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。

總之，乙肝相關(guān)性肝癌患者的癌癥組織中IMP3和IGF2的表達(dá)均顯著增強(qiáng)，其與患者的病理分期、組織分化、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移等均有密切相關(guān)性，同時(shí)IMP3及IGF2的表達(dá)具有顯著相關(guān)性，通過對(duì)IMP3作用機(jī)制的探討與研究，可將其作為臨床癌癥診斷和治療的靶分子。

1 奚 忠，丁忠陽，郭榆江，等.ABCG2在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床病理意義〔J〕.肝膽胰外科雜志，2013;25(5):385-7.

2 林黎娟，金 政，林貞花，等.肝細(xì)胞癌組織中IMP3蛋白的表達(dá)及意義〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2012;28(1):87-9.

3 林黎娟，張錦輝，王 研，等.肝細(xì)胞癌組織中IMP3與IGF2表達(dá)對(duì)預(yù)后評(píng)估的臨床病理學(xué)意義〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2013;29(4):361-4.

4 Chen P，Wang SJ，Wang HB，et al.The distribution of IGF2 and IMP3 in osteosarcoma and its relationship with angiogenesis〔J〕.J Mol Histol，2012;43(1):63-70.

5 Dai N，Christiansen J，Nielsen FC，et al.mTOR complex 2 phosphorylates IMP1 cotranslationally to promote IGF2 production and the proliferation of mouse embryonic fibroblasts〔J〕.Genes Dev，2013;27(3):301-12.

6 Ueki A，Shimizu T，Masuda K，et al.Up-Regulation of IMP3 confers in vivo tumorigenicity on murine osteosarcoma cells〔J〕.PLoS One，2012;7(11):e50621.

7 邱少敏，彭 鵬，宋玉華，等.肝癌患者血清趨化因子配體18的檢測(cè)及其意義〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012;12(22):4275-6，4280.

8 Hartmann EM，Beà S，Navarro A，et al.Increased tumor cell proliferation in mantle cell lymphoma is associated with elevated insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 3 expression〔J〕.Mod Pathol，2012;25(9):1227-35.

9 劉俊鋒，張騰藝，李利文，等.IMP3與CD44v6在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.國(guó)際外科學(xué)雜志，2014;41(2):94-7.

R735.7

A

1005-9202(2015)09-2453-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.066

吳詩品(1963-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制方面的研究。

蘇冬娜(1977-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制方面的研究。

〔2014-12-25修回〕

(編輯 李相軍/滕欣航)