吳瓊皎

[摘要]目的 探討2型糖尿?。═2DM）患者血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、白細胞介素-6（IL-6）和腫瘤壞死因子（TNF-α）水平的變化及其臨床意義。 方法 應(yīng)用放射免疫法對40例2型糖尿病腎病患者、36例2型糖尿病非腎病患者及38例健康人（健康對照組）進行血清VEGF、IL-6及TNF-α水平的檢測。 結(jié)果 2型糖尿病腎病組血清VEGF、IL-6及TNF-α水平顯著高于健康對照組（P<0.01）及2型糖尿病非腎病組（P<0.01）。 結(jié)論 VEGF、IL-6及TNF-α是2型糖尿病腎病發(fā)生的重要炎癥反應(yīng)介質(zhì)，提示高水平的VEGF、 IL-6及TNF-α可能在T2DM及其腎病并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起到一定作用，檢測其水平變化可作為2型糖尿病腎病臨床診斷的參考依據(jù)。

[關(guān)鍵詞]2型糖尿病腎??；VEGF；IL-6；TNF-α

[中圖分類號]R587.1 [文獻標(biāo)識碼]B [文章編號]2095-0616（2014）20-136-03

Detection of the level and its significance of VEGF， IL 6 and TNF-α in patients with type 2 diabetic nephropathy

WU Qiongjiao

Department of Nephrology， Sanmenxia Central Hospital， Sanmenxia Central Hospital Affiliated to Henan University of Science and Technology， Sanmenxia 472000， China

[Abstract]Objective To study the detection of the level and its clinical significance of vascular endothelial growth factor（VEGF）. interleukin-6（IL-6） and tumor necrosis factor-a（TNF-α） in patients with type 2 diabetic nephropathy（DN）. Methods The levels of VEGF， IL-6and TNF-α in 40 patients with DN， 36 patients diagnosed simply type 2 diabetes mellitus（DM） and 38 healthy persons （healthy controls） were radioimmunologically examined. Results The level of VEGF， IL-6 and TNF-α in the DN group were markedly lower than those in the healthy group（P<0.01） and the simply type 2 DM group（P<0.01）. Conclusion The VEGF， IL-6 and TNF-α were important inflammatory mediators in the development of the DN， high levels of VEGF， IL-6 and TNF-α may play important roles in the occurrence and development of the type 2 diabetes mellitus and diabetic complications， detecting the level changes can be used as references for clinical diagnosis of type 2 diabetic nephropathy.

[Key words]Type 2 diabetic nephropathy； VEGF； IL-6； TNF-α

糖尿病腎?。╠iabetes nephropathy， DN）是糖尿病微血管病變的主要并發(fā)癥之一[1]。目前多認為DN屬于一種以蛋白尿為臨床特點的腎小球疾病，但其發(fā)病機制尚未完全明確[2]。目前關(guān)于糖尿病及其并發(fā)癥發(fā)生、發(fā)展的炎癥學(xué)說受到廣泛關(guān)注[3-4]。免疫功能的變化是其主要機制之一，VEGF是一種促血管生長因子，可促進血管內(nèi)皮生長因子分化、增生及腔管形成，增強血管通透性，維持血管穩(wěn)定[5]。IL-6是由機體單核-巨噬細胞等多種免疫參與細胞所產(chǎn)生的重要的生物活性細胞因子，TNF-α可以激活中性粒細胞和單核巨噬細胞，刺激其合成IL-1、IL-6、IL-8等炎性細胞因子，促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生。本研究通過對三組患者檢測其體內(nèi)VEGF、IL-6及TNF-α水平變化，探討其在2型糖尿病發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本組所有患者均來自2013年2月～2014年2月我院腎內(nèi)科就診患者。糖尿病腎病組均為2型糖尿?、蟆羝诨颊?；40例2型糖尿病腎病患者，其中男、女各20例，年齡38～75歲，平均（45.6±4.2）歲，2型糖尿病腎病患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)為：尿白蛋白排泄率（UAER）持續(xù)在20～199μg/min，或尿白蛋白排出量>300mg/h，相當(dāng)于尿蛋白總量>0.5g/24h，并且排除無其他病癥所致腎損傷者。糖尿病非腎病組：36例患者均為2型糖尿病患者，其中男19例，女17例，年齡39～73歲，平均（46.8±3.7）歲，尿白蛋白定量<30mg/24h，并且腎及其他器官無嚴(yán)重合并癥者。所有患者均符合1999年WHO提出的糖尿病診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)[6]。正常對照組38例，其中男、女各19例，年齡38～74歲，平均（46.1±4.8）歲，經(jīng)檢查為各項指標(biāo)均正常的健康者，且肝、腎功能正常，無糖尿病家族史。

1.2 方法

采集標(biāo)本：觀察組和對照組于清晨空腹采集血液6mL，血液進行離心處理，血清置于-20℃冰箱保存待測，測定前于28℃室溫復(fù)溫10min，再于5℃4000r/min離心5min，取上清液進行測定。VEGF、IL-6和TNF-α檢測免疫試劑盒（上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司），BIO-RAD xMark全自動酶標(biāo)儀、前自動生化分析儀（拜耳ADVIA-1650型）等。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件，各組數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，組間比較采用ANOVA方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

各組間血清VEGF、IL-6及TNF-α水平。見表1。

三組VEGF、IL-6和TNF-α經(jīng)方差分析比較，F(xiàn)值分別為34.928、50.685、110.231，P值均為0.000（P<0.01），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，且三組之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 討論

近年來，免疫調(diào)節(jié)因子在糖尿病尤其是糖尿病并發(fā)癥發(fā)病機制中所起到的作用正逐漸被人們所重視[5]。正常腎組織表達的某些因子對于維持腎臟的生理功能具有重要的作用和意義。病理情況下，白三烯、IL-6、TNF-α等炎癥因子的釋放過度，造成了腎小球病理變化加劇，其組織功能和結(jié)構(gòu)也發(fā)生了異常變化[7]。外在主要病理表現(xiàn)為誘發(fā)和加重腎小球增生和肥大，出現(xiàn)細胞脫顆?，F(xiàn)象，基質(zhì)蛋白沉積，系膜區(qū)擴展，基膜加厚，進而呈現(xiàn)糖尿病腎病典型的腎小球硬化征。通過實驗發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病腎病患者VEGF、IL-6、TNF-α水平顯著高于正常人（P<0.01），從而確定2型糖尿病腎病患者出現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的紊亂，炎癥細胞因子可能與腎小球病理變化存在相關(guān)性。

糖尿病患者在高糖狀態(tài)下體內(nèi)代謝出現(xiàn)功能性紊亂，導(dǎo)致細胞炎癥因子分泌失調(diào)，引起局部組織的缺血和缺氧，刺激了巨噬細胞、脂肪細胞以及血管內(nèi)皮細胞釋放大量細胞因子，這些細胞因子通過與相應(yīng)受體相結(jié)合，構(gòu)成了信號傳導(dǎo)通路，引起了胰島素抵抗，從而間接的參與了2型糖尿病的發(fā)生與發(fā)展[8]。

VEGF可使得毛細血管毛細血管內(nèi)皮細胞增殖、分裂，刺激內(nèi)皮細胞釋放纖溶酶原和膠原酶等血管活性物質(zhì)，同時，VEGF可以增加血管通透性，促進一氧化氮、血管內(nèi)皮素等的產(chǎn)生，薛菲等[5]認為VEGF與尿白蛋白的排泄率呈正相關(guān)，表明了高水平VEGF會有道蛋白尿的產(chǎn)生，促進腎臟組織損傷。且由本實驗結(jié)果可知，2型糖尿病患者血清VEGF水平顯著高于健康人，并且合并腎病組患者較非腎病組患者血清VEGF水平也顯著升高，與文獻[5，9-10]報道一致。最近研究顯示，在代謝紊亂與血流動力學(xué)機制的基礎(chǔ)上，炎癥機制是糖尿病腎病發(fā)生、持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵因素[11-12]，免疫調(diào)節(jié)因子在糖尿病尤其是糖尿病并發(fā)癥發(fā)病機制中所起的作用也逐漸為人們所重視[13-14]。IL-6主要是由巨噬細胞、T細胞、B細胞等多種細胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，分子量21～26kD。IL-6與其受體相結(jié)合有促使分化成熟的B細胞分泌抗體，促進TC、TD細胞增殖分化等生物學(xué)效應(yīng)。IL-6主要通過降低胰島素受體和IRS-1的蛋白表達，通過細胞因子信號抑制因子（SOCS）抑制胰島素信號傳導(dǎo)，同時也可抑制瘦素信號傳導(dǎo)，從而產(chǎn)生IR和瘦素抵抗。本研究結(jié)果顯示2型糖尿病腎病患者IL-6水平顯著高于其余兩組（P<0.01），這表明IL-6在腎病的發(fā)病過程中的作用。TNF-α可以通過肝細胞膜上的TNF-α受體影響肝臟脂質(zhì)代謝，進而降低胰島素受體絡(luò)氨酸激酶的活性，從而加重脂肪細胞分泌瘦素引起的胰島素抵抗。正常情況下，TNF-α具有抗腫瘤、抗感染的作用，但如果持續(xù)大量釋放或者與其他免疫調(diào)節(jié)因子的關(guān)系失調(diào)，則會引起機體的發(fā)熱等而參與2型糖尿病腎病的發(fā)病機制。本研究結(jié)果表明，2型糖尿病腎病患者血清TNF-α水平顯著的高于其余兩組水平（P<0.01）。其原因可能與TNF-α引起腎臟固有細胞增殖，進而刺激其表達粘附分子和過多的細胞外基質(zhì)和其他炎癥介質(zhì)直接導(dǎo)致對腎臟系膜細胞的損傷。

綜上所述，血清中VEGF、IL-6、TNF-α水平可反映患者2型糖尿病腎病的嚴(yán)重程度，而VEGF、IL-6、TNF-α對于2型糖尿病腎病的發(fā)展和預(yù)后的評估有著極為重要的參考意義，同時炎癥因子釋放的過度釋放和浸潤可能是2型糖尿病腎病發(fā)生與發(fā)展的重要機制，臨床檢測以上細胞因子水平對于了解患者病情，指導(dǎo)用藥和觀察預(yù)后具有十分重要的參考價值。

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（收稿日期：2014-07-14）