周 賀,郭 彬,門秀麗(華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,河北唐山063009)
NADPH氧化酶介導(dǎo)地塞米松誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞凋亡*
周賀,郭彬,門秀麗△
(華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,河北唐山063009)
目的:觀察地塞米松(dexamethasone,Dex)對(duì)胰島β細(xì)胞凋亡的影響及NADPH氧化酶(Nox)表達(dá)水平的變化。方法:將大鼠胰島β細(xì)胞系INS-1細(xì)胞分為正常對(duì)照組及不同濃度的地塞米松處理組。培養(yǎng)48 h后MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況; Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況; real-time PCR檢測(cè)Nox1、Nox3、Nox4和p47phoxmRNA表達(dá)水平;熒光法檢測(cè)ROS釋放量; Western blot檢測(cè)Nox4蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:地塞米松誘導(dǎo)INS-1細(xì)胞凋亡具有明顯的劑量依賴性,隨Dex濃度增加,凋亡細(xì)胞數(shù)明顯增多,并且在此過程中NADPH氧化酶Nox1、Nox3、Nox4和p47phoxmRNA表達(dá)上調(diào),Nox4蛋白表達(dá)水平隨Dex濃度增加而升高,0.1 μmol/L Dex處理細(xì)胞24h即可見ROS釋放量明顯增加,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:地塞米松誘導(dǎo)INS-1細(xì)胞凋亡可能與上調(diào)Nox1、Nox3、Nox4和p47phox表達(dá),增加ROS生成,促進(jìn)氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)。
國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助(No.81370918)
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