王　齊，王　建，李慶華，龐天翔(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院，實驗血液學(xué)國家重點(diǎn)實驗室，北京100032)

shRNA干擾CIAPIN1基因表達(dá)對K562細(xì)胞粒系分化的影響*

王齊，王建，李慶華△，龐天翔△
(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，血液學(xué)研究所血液病醫(yī)院，實驗血液學(xué)國家重點(diǎn)實驗室，北京100032)

目的:探討沉默CIAPIN1基因?qū)β粤＜?xì)胞白血病K562細(xì)胞向粒系分化的影響。方法:針對CIAPIN1基因構(gòu)建短shRNA真核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染細(xì)胞。瑞氏染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;電鏡觀測細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變; real-time PCR方法檢測粒系分化標(biāo)志基因mRNA水平的改變; Western blotting檢測ERK1/2、JNK、p38 MAPK及Akt磷酸化水平的改變。結(jié)果: CIAPIN1基因沉默后，K562細(xì)胞的形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)趨向成熟粒細(xì)胞，表面分化抗原CD11b、NCF1、ORM1、C/EBPα和HIF1α的mRNA表達(dá)水平升高，ERK1/2磷酸化水平升高。結(jié)論:抑制CIAPIN1基因表達(dá)能促進(jìn)K562細(xì)胞分化，ERK1/2磷酸化水平的升高可能參與了該分化過程。

國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學(xué)基金資助項目(No.14JCZDJC34900)

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