禹曉童,王鵬雁,王紅霞,王學江△(首都醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理生理學教研室,北京00069;北京協和醫(yī)院病理科,北京0003)
尾加壓素II介導卵圓細胞增殖的機制探討
禹曉童1,王鵬雁2,王紅霞1,王學江1△
(1首都醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理生理學教研室,北京100069;2北京協和醫(yī)院病理科,北京100032)
目的:探討尾加壓素II(UII)對肝臟干細胞即卵圓細胞內活性氧(ROS)的影響及其參與UII促細胞增殖的機制探討。方法:通過流式細胞術,應用DCFH-DA探針檢測UII孵育卵圓細胞WB-F344后,胞內ROS水平變化。通過Western blot方法檢測胞內NADPH氧化酶亞基、細胞周期蛋白E、細胞周期蛋白依賴性激酶2及信號通路蛋白ERK表達水平。采用流式細胞術方式分析UII對于細胞周期的影響。應用BrdU摻入法檢測細胞增殖情況。結果: UII刺激卵圓細胞可引起胞內ROS水平增加,同時NADPH氧化酶亞基表達上調。給予NADPH氧化酶抑制劑apocynin預處理后,明顯改善UII介導的ERK磷酸化水平升高。此外,UII孵育組細胞周期比例S期明顯高于G1期,而apocynin預處理組S期比例較UII刺激組有所降低,且細胞增殖檢測結果顯示apocynin預處理可使UII介導的促細胞增殖效應受到明顯抑制。結論: UII可通過上調細胞內NADPH氧化酶介導ROS增加,繼而促進ERK激活以及加速細胞從G1期進入S期,參與UII促細胞增殖作用。
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