賈　石，鄭　銘(北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部生理學(xué)與病理生理學(xué)系，北京100871)

Nogo-C增加心肌細(xì)胞鈣滲漏誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡*

賈石，鄭銘△
(北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部生理學(xué)與病理生理學(xué)系，北京100871)

目的:研究Nogo-C在心臟中的作用及機(jī)制。方法:冠脈左前降支結(jié)扎建立心梗模型;缺氧孵箱培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞;感染Nogo-C cDNA或shNogo-C腺病毒過表達(dá)或敲低Nogo-C; TUNEL染色及AnnexinⅤ/PI雙標(biāo)檢測細(xì)胞凋亡; Fluo-4/Fura-2觀察細(xì)胞鈣離子濃度;蛋白免疫共沉淀檢測蛋白相互作用。結(jié)果:心梗心肌組織及缺氧心肌細(xì)胞Nogo-C蛋白水平顯著增高;過表達(dá)Nogo-C可促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡，而敲低Nogo-C保護(hù)細(xì)胞抵抗缺氧引起的凋亡;免疫熒光觀察Nogo-C定位于肌漿網(wǎng);高表達(dá)Nogo-C可增加心肌細(xì)胞鈣滲漏從而降低鈣庫含量; Nogo-C可與肌漿網(wǎng)膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Sec61α相互作用，過表達(dá)Nogo-C上調(diào)Sec61蛋白水平; Sec61抑制劑茴香霉素可逆轉(zhuǎn)Nogo-C引起的鈣滲漏并抑制凋亡。結(jié)論:心梗時(shí)心肌細(xì)胞中Nogo-C水平增高，上調(diào)Sec61蛋白，使細(xì)胞鈣滲漏增加，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.31371350) ;科技部國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃項(xiàng)目“973”(No.2013CB531203)

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