李　楊，王　麗，劉慧榮(山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系，山西太原03000;首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病生教研室，北京00069)

β1-腎上腺素受體自身抗體誘導(dǎo)的自噬和凋亡之間關(guān)系的研究

李楊1，王麗1，劉慧榮2△
(1山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系，山西太原030001;2首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病生教研室，北京100069)

目的:通過使用自噬激動劑、自噬抑制劑、凋亡抑制劑以及蛋白阻滯劑處理或預(yù)處理已由β1-腎上腺素受體自身抗體(β1-AA)造模的H9c2細胞，探討能否通過人為因素調(diào)控細胞自噬從而下調(diào)心肌細胞凋亡，改善心功能受損。方法:采用不含EDTA的0. 25%胰蛋白酶消化傳代H9c2心肌細胞，用含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，主動免疫Wistar大鼠獲得的β1-AA對細胞進行24 h造模處理，或用自噬激動劑雷帕霉素、自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤、自噬抑制劑氯喹、凋亡抑制劑、蛋白阻滯劑分別單獨給予或者聯(lián)合處理細胞，采用Western blot以及RT-PCR對自噬的變化進行檢測;對自噬變化組采用流式細胞術(shù)以及線粒體跨膜電位檢測法對凋亡進行檢測。結(jié)果: H9c2細胞約90%滿時可傳代并每隔約2天傳代一次;β1-AA可誘導(dǎo)H9c2細胞發(fā)生自噬和凋亡;自噬和凋亡在一定范圍內(nèi)彼此影響，協(xié)同決定細胞死亡的發(fā)生。結(jié)論:β1-腎上腺素受體自身抗體誘導(dǎo)的自噬和凋亡在一定范圍內(nèi)彼此之間相互調(diào)節(jié)。

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