血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子含量表達(dá)與喉癌侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)性

蘇凱劉敩蔡郁孫立群

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春130041)

摘要〔〕目的探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)含量變化與喉癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)68例喉癌患者血清VEGF含量與病理分級(jí)、臨床分期及區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素關(guān)系。結(jié)果喉癌轉(zhuǎn)移組和喉癌非轉(zhuǎn)移組病人血清中VEGF含量表達(dá)與正常對(duì)照組相比差異顯著(P<0.01)。結(jié)論VEGF含量檢測(cè)可以作為喉癌的復(fù)發(fā)和區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的客觀指標(biāo)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)對(duì)于指導(dǎo)臨床治療有重要意義。

關(guān)鍵詞〔〕喉腫瘤；VEGF；ELISA

中圖分類號(hào)〔〕R735.34〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

通訊作者：蔡郁(1976- )，女，主管護(hù)師，主要從事頭頸腫瘤治療研究。

第一作者：蘇凱(1973-)，男，主管技師，主要從事頭頸腫瘤研究。

喉癌是頭頸部常見(jiàn)的惡性腫瘤，喉癌的局部復(fù)發(fā)、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移是影響患者預(yù)后的主要因素〔1〕。因此，尋找與喉癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物對(duì)預(yù)測(cè)腫瘤的生物學(xué)行為以及指導(dǎo)治療有重要的臨床意義。本研究應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)不同時(shí)期喉癌患者血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)含量變化，觀察其與喉癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，旨在為喉癌的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后判斷提供客觀指標(biāo)。

1材料與方法

1.1對(duì)象68例喉癌病人血清由我院住院病人提供。均經(jīng)病理診斷喉鱗狀細(xì)胞癌，手術(shù)前后均進(jìn)行采血，分離血清凍存。其中男45例，女23例，平均年齡56歲；隨機(jī)分為喉癌非轉(zhuǎn)移組40例，喉癌轉(zhuǎn)移組28例。根據(jù)美國(guó)抗癌協(xié)會(huì)第七版TNM分期，T116例，T224例，T318例，T410例；病理分級(jí)，Ⅰ級(jí)18例，Ⅱ級(jí)26例，Ⅲ級(jí)24例。抗人VEGF試劑盒購(gòu)于武漢博士德生物工程有限公司。取40例健康體檢人員為對(duì)照組。各組年齡性別無(wú)明顯差別。

1.2方法取-70℃冰箱凍存的人喉癌血清做1∶10倍稀釋。分別加入含有VEGF抗體的酶標(biāo)板內(nèi)100μl，4復(fù)孔，置37℃5%二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)反應(yīng)60min，取出后磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3次，5min/次。每孔內(nèi)加入酶標(biāo)抗體工作液100μl，置37℃ 5%二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)反應(yīng)60min，取出后甩干，PBS洗3次，加入鄰苯二胺工作液100μl，避光保溫10min，每孔加入終止液50μl,立即于酶標(biāo)儀492nm處測(cè)OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品OD值在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上作圖。結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即為VEGF含量。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS11.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1手術(shù)前后血清中VEGF含量比較與術(shù)前比較，術(shù)后VEGF含量水平明顯下降〔(489.7±16.2)ng/mlvs(261.4±9.6)ng/ml〕(P<0.01)。

2.2各組VEGF含量比較喉癌病人血清中VEGF總體水平高于正常對(duì)照組〔(236.8±6.9)ng/ml〕。但是喉癌轉(zhuǎn)移組VEGF含量〔(567.5±19.1)ng/ml〕明顯高于非轉(zhuǎn)移組〔(438.4±13.3)ng/ml〕(P<0.01)。

2.3喉癌病人血清VEGF含量表達(dá)與病理分級(jí)相關(guān)性分析呈正相關(guān)關(guān)系，即病理分級(jí)越高，VEGF含量隨之升高，Ⅰ級(jí)與Ⅱ級(jí)Ⅲ級(jí)相比〔(451.2±15.3)ng/ml，(495.5±13.8)ng/ml，(51.54±17.4)ng/ml〕差別顯著(P<0.05)，但Ⅱ級(jí)Ⅲ級(jí)相比無(wú)顯著差異。

2.4喉癌病人血清VEGF含量表達(dá)與臨床分期相關(guān)性T1T2兩組間VEGF含量水平〔(447.2±13.4)ng/ml，(468.2±16.2)ng/ml〕無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而T1、T2兩組分別與T3、T4〔(521.6±16.8)ng/ml，(563.3±19.3)ng/ml〕相比差異顯著(P<0.05)。

3討論

近年來(lái)，喉癌治療技術(shù)有了很大的發(fā)展，但是單純手術(shù)治療效果仍難讓人滿意，局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率較高〔2〕。因此，目前許多學(xué)者從腫瘤分子生物學(xué)角度對(duì)喉癌細(xì)胞因子進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)喉癌組織中VEGF含量異常表達(dá)，與腫瘤侵襲復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，腫瘤如果沒(méi)有新生血管的支持，當(dāng)腫瘤體積達(dá)到1mm3時(shí)就會(huì)停止生長(zhǎng)并發(fā)生退化〔3〕，所以抑制VEGF表達(dá)就可以阻止腫瘤生長(zhǎng)。因?yàn)榕R床分期是制定臨床決策的主要因素，臨床分期越高證明疾病的侵襲范圍就越廣〔4〕。所以VEGF含量檢測(cè)可以作為臨床分期的參考指標(biāo)，為正確的臨床分期提供理論依據(jù)。本研究結(jié)果表明隨著病理分級(jí)的升高血清中VEGF含量亦升高。文獻(xiàn)報(bào)道〔5〕，喉癌組織類型和組織分化程度是決定腫瘤行為及預(yù)后關(guān)鍵因素,掌握組織病理學(xué)的特征，將有助于選擇早期篩查腫瘤標(biāo)志物和有針對(duì)性的治療方案尤其重要。VEGF是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，提高血管通透性等生物學(xué)作用，是目前發(fā)現(xiàn)最重要的促進(jìn)腫瘤血管生成因子，因此，通過(guò)血清VEGF水平表達(dá)監(jiān)測(cè)喉癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的發(fā)展規(guī)律，為腫瘤抗血管生成治療帶來(lái)了新的思路，由于血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、快速無(wú)創(chuàng)、尤其對(duì)晚期腫瘤的診斷及療效的評(píng)估，預(yù)后判斷有較高的臨床實(shí)用價(jià)值。

4參考文獻(xiàn)

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〔2015-03-22修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)