曹省艷 王強(qiáng) 周小藝（四川省綿陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 621000）

鴨病毒性肝炎概述

曹省艷 王強(qiáng) 周小藝（四川省綿陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 621000）

鴨肝炎病毒屬微RNA病毒科，腸道病毒屬。鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種急性傳染病，病鴨精神委頓，出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。本病發(fā)病急，傳播快，死亡率高。常給鴨場帶來重大的危害。

鴨病毒性肝炎；病原；流行病學(xué)；診斷

鴨病毒性肝炎（Duck Virus Hepatitis，DVH），是由鴨病毒性肝炎病毒（Duck Hepatitis Virus，DHV）引起雛鴨的一種以肝臟出現(xiàn)出血性炎癥為主要特征的急性烈性傳染病。該病由Levine等（1949）最先在美國長島白色北京鴨群中發(fā)現(xiàn)，并于1950年首次用雞胚分離出鴨肝炎病毒。病鴨精神委頓，出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，有時(shí)腹瀉，通常發(fā)病4d內(nèi)死亡，重要病變是肝臟腫大并有出血斑點(diǎn)，雛鴨感染后，以5～10日齡發(fā)病最多，死亡率相差很大，為10～100%，雛鴨的日齡越大，其死亡率就越低，超過四周齡很少發(fā)病。DHV對成年鴨無致病力，但可以隱性感染。

1 病原

鴨肝炎病毒包含小核糖核酸病毒科、星狀病毒科和嗜肝病毒科3個(gè)病毒科的4種病毒。嗜肝病毒科的鴨肝炎病毒引起鴨乙型肝炎，其對鴨沒有顯著的致病性；星狀病毒科引起Ⅱ型鴨肝炎，目前為止僅英國有發(fā)病報(bào)道；小核糖核酸病毒科主要引起Ⅰ型和Ⅲ型鴨肝炎。Ⅰ型和Ⅲ型鴨肝炎在臨床癥狀和病理變化上類似，但中和試驗(yàn)和熒光抗體試驗(yàn)證實(shí)二者無共同抗原成分，且Ⅲ型鴨肝炎病毒的致病力不如Ⅰ型鴨肝炎病毒，對雛鴨的致病率很少超過30%。通常所說的鴨肝炎主要是指Ⅰ型鴨肝炎，其病毒致死性最強(qiáng)，呈世界性分布，主要發(fā)生于雛鴨，臨床表現(xiàn)為發(fā)病急、死亡快，剖解病變特征主要為肝臟有明顯的出血點(diǎn)、出血斑，是一種具有急性、高度接觸性和致死性的傳染性疾病，給養(yǎng)鴨業(yè)造成很大的危害。

1.1 I型鴨肝炎病毒

屬于小RNA病毒科（Picornaviridae），腸道病毒屬（Enteroviurs），病毒呈球形或類球鞋形，直徑為20～40nm，為二十面體對稱核衣殼，沒有囊膜，衣殼上有32顆殼粒，胞漿內(nèi)繁殖。其基因組為不分節(jié)段的單股正鏈RNA。該病毒具有較強(qiáng)抵抗力：對胰酶，硫酸銨等有抵抗力；對乙醚、氯仿、甲醇等有機(jī)溶劑也有抵抗力；能耐pH3.0的酸性環(huán)境；耐熱，56℃1h仍有部分病毒存活，62℃、30min可全部滅活；在自然環(huán)境中，病毒可在未清洗的污染孵化器內(nèi)存活10周，在陰涼處的濕糞中可存活37d以上。在4℃條件下可存活2年以上，在-20℃條件下則可長達(dá)9年。對常用消毒劑也有明顯的抵抗力；Ⅰ型DHV不能凝集任何動(dòng)物的紅細(xì)胞，也不具有紅細(xì)胞吸附特性。可在鴨胚、雞胚和鵝胚的絨毛尿囊腔內(nèi)增殖，可在雞胚組織中增殖，但不產(chǎn)生病變，在鴨腎細(xì)胞中增殖可以出現(xiàn)細(xì)胞病變。但不能在經(jīng)胰酶消化過的組織上增殖；雞胚致弱后的DHV能在雞胚成纖維細(xì)胞中生長，而且犢牛血清對其生長有明顯抑制作用。在我國流行的DVH的病原為I型DHV。但林世棠等發(fā)現(xiàn)我國也有1型變異株存在，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果與Sandhu報(bào)道相似：該變異株可使雛鴨從7日齡開始發(fā)病，15～20日齡為發(fā)病高峰，病死率為30～40%，青年鴨多在15～45日齡發(fā)病，病死率為40～50%。

1.2 Ⅱ型鴨肝炎病毒

Ⅱ型鴨肝炎病毒（DHV typeⅡ）屬于星狀病毒科（Astrovirus），在電子顯微鏡下，病毒顆粒形狀呈特征性的帶有頂角的形狀，直徑約28～30nm?？赡褪苈确?，pH3.0和50℃6min，甲醛等消毒劑對其有效。Ⅱ型DHV經(jīng)尿囊腔接種雞胚盲傳幾代后，可在雞胚中增殖，但不能在鴨和雞的細(xì)胞培養(yǎng)物中增殖。

1.3 Ⅲ型鴨肝炎病毒

Ⅲ型鴨肝炎病毒（DHV typeⅢ）在鴨腎細(xì)胞中呈晶格狀排列，病毒粒子直徑約30nm。Ⅲ型DHV同樣耐受氯仿，pH3.0，但50℃6min能殺滅一定量的病毒。鴨胚初次接種，死亡無規(guī)律性，一般在接種后8～9d死亡，傳代可是毒力增強(qiáng)，死亡時(shí)間縮短。被感染鴨胚絨毛尿囊膜水腫，比正常時(shí)增厚約10倍，病灶表面有干酪樣物質(zhì)，胚體發(fā)育不良，水腫皮膚表面出血，肝，腎和脾腫脹，鴨胚或雛鴨的肝或腎可以用于增殖病毒。

2 鴨病毒性肝炎的流行病學(xué)特征

2.1 Ⅰ型DVH

在自然條件下，I型DVH僅發(fā)生于雛鴨。即使在污染的環(huán)境中，成年的種鴨也無臨診癥狀，產(chǎn)蛋率不受影響。經(jīng)研究又發(fā)現(xiàn)，在感染后出現(xiàn)癥狀未死的雛鴨直腸糞便和肝臟中未檢測到DHV，而出現(xiàn)癥狀死亡雛鴨的腸道和肝臟均檢出DHV，在感染后的雛鴨腦組織中均能檢測出DHV。雛鴨從出現(xiàn)典型癥狀到死亡一般只有幾分鐘到幾個(gè)小時(shí)，因此認(rèn)為被感染的雛鴨從出現(xiàn)癥狀即向外排毒。DHV強(qiáng)毒在肝臟中大量繁殖并損傷肝臟，經(jīng)膽道進(jìn)入腸道并排出體外，成為重要傳染源。無論是接種或同居感染DHV強(qiáng)毒的成年鴨，在其直腸糞便和肝臟中均能測出DHV。這是成年鴨與雛鴨感染DHV的一個(gè)重大區(qū)別。認(rèn)為DHV強(qiáng)毒對雛鴨有致病能力是因?yàn)椴《灸苓M(jìn)入雛鴨腦組織。成年鴨感染DHV強(qiáng)毒不發(fā)病是由于病毒不能進(jìn)入腦組織。該病一年四季均可發(fā)生，雛鴨的發(fā)病率為100%，1周齡雛鴨的發(fā)病率可達(dá)95%，而1～3周齡的雛鴨病死率為50%或更低，4～5周齡雛鴨的發(fā)病率和死亡率都很低。Toth等證實(shí)該病一般不經(jīng)垂直感染。

2.2 Ⅱ型DVH

Ⅱ型DVH只能感染鴨，感染可通過口腔、泄殖腔和皮下注射發(fā)生。雛鴨感染后ld內(nèi)死亡，幸存鴨感染后至少排毒1周。野禽、鷗和其它野鳥可能是其媒介。

2.3 Ⅲ型DVH

Ⅲ型DVH不如Ⅰ型DHV感染嚴(yán)重，病死率很少超過30%。Ⅲ型DHV一般只感染雛鴨。

流行病學(xué)調(diào)查研究表明，在中國廣泛流行的毒株絕大多數(shù)為DHV-1及其變異株和N-DHV，二者之間基本沒有交叉保護(hù)，用于制作疫苗或抗體的毒株一般仍為DHV-1，可能是當(dāng)前鴨病毒性肝炎得不到有效控制的主要原因。加之細(xì)菌病和病毒病并發(fā)的情況不斷發(fā)生，鴨肝炎發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢，養(yǎng)鴨比較集中的地區(qū)都遭受了巨大的經(jīng)濟(jì)損失和嚴(yán)重的威脅。

3 鴨病毒性肝炎的診斷

3.1 臨床診斷

本病多發(fā)于1～3周齡雛鴨，以發(fā)病快、傳播快、死亡率高為主要特點(diǎn)，典型的角弓反張死征和特征性的肝臟出血可作初步診斷。近年來，臨床上出現(xiàn)在較大日齡鴨群或已免疫接種的鴨群發(fā)生本病時(shí)，常缺乏典型的病理變化，僅見肝臟稍腫大、瘀血，表面有末梢毛細(xì)血管擴(kuò)張破裂而無嚴(yán)重的斑點(diǎn)狀出血，易造成誤診漏診，須經(jīng)病原分離與鑒定來確診。臨床上診斷鴨病毒性肝炎還應(yīng)注意與曲霉菌病、雛鴨副傷寒、禽霍亂等鑒別。

3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.2.1 病原分離

采病死雛鴨肝臟經(jīng)處理后接種于10日齡鴨胚、14日齡番鴨胚、9日齡的雞胚以及雞鴨胚的成纖維細(xì)胞進(jìn)行病毒分離。但是Ⅰ型DHV不能凝集任何動(dòng)物的紅細(xì)胞，在成纖維細(xì)胞中可以增殖又不容易引起細(xì)胞病變，因此必須通過一系列的實(shí)驗(yàn)室檢測來確定是否分離到該病毒。

3.2.2 抗原檢測

用于檢測DHV抗原最直接的方法是利用電鏡檢測，該方法對病毒純度要求非常高?？捎锰荻入x心方法，把含病毒的尿囊液先1000rpm離心30min，取上清液再25000rpm離心90min，沉淀后用雙蒸水重懸得到較高純度病毒。此外，血清學(xué)方法也可以進(jìn)行抗原檢測，如ELISA、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、熒光抗體等。

3.2.3 抗體檢測

采用血清學(xué)方法檢測DHV抗體。秦智鋒等建立了雞胚中和試驗(yàn)和雛鴨中和試驗(yàn)，結(jié)果表明高免血清中和保護(hù)率為100%。周學(xué)利等（1998）利用SPA能與鴨血清中IgG分子Fc段結(jié)合的特點(diǎn)，用酶標(biāo)SPA分別進(jìn)行斑點(diǎn)免疫，斑點(diǎn)ELISA及雞胚中和試驗(yàn)，該方法的進(jìn)一步研究有較大的應(yīng)用價(jià)值。楊奎等采用過碘酸鈉法將辣根過氧化酶標(biāo)記純化的DHV上，建立檢測DHV抗體的Dot—ELISA法，該方法特異性好，與鴨瘟和小鵝瘟血清沒有交叉反應(yīng)，重復(fù)性高，與間接ELISA方法的符合率達(dá)100%。

4 防治

4.1 被動(dòng)免疫

在此病開始發(fā)生時(shí)可用抗血清及卵黃抗體進(jìn)行緊急被動(dòng)免疫及治療。抗血清可利用將屠宰的廢鴨作二次免疫后采集。卵黃抗體來自高免種鴨所產(chǎn)的蛋的卵黃以生理鹽水制成1：2的懸液。以上制品及供制造制品的鴨需嚴(yán)格檢疫，以免制品帶有病原微生物。

4.2 主動(dòng)免疫

康復(fù)鴨具有堅(jiān)強(qiáng)的免疫力，在一定時(shí)期內(nèi)帶毒。

4.2.1 弱毒疫苗

這類疫苗一般是將DHV通過雞胚或鴨胚傳代而使其對鴨的毒力減弱而成。當(dāng)本病開始發(fā)生時(shí)，在抗血清缺乏的情況下，可將其用于緊急預(yù)防。弱毒苗有排毒現(xiàn)象。存在的問題是疫苗毒株通過雛鴨傳代可使其毒力返強(qiáng)。

4.2.2 滅活疫苗

是將病毒滅活加佐劑而成。滅活疫苗用于第二次免疫。使用疫苗免疫的目的是使其后代能獲得被動(dòng)免疫。很多學(xué)者對種鴨的免疫程序進(jìn)行研究，總的意見是種鴨必須進(jìn)行2次或者3次疫苗注射。鴨齡較小對疫苗的免疫應(yīng)答較高。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)的程安春等使用研制出的鴨瘟、鴨病毒性肝炎二聯(lián)弱毒疫苗給28～30日齡的小鴨進(jìn)行首免，產(chǎn)蛋前，即23～30周齡進(jìn)行三免，這樣在60周齡內(nèi)，可以使種鴨不發(fā)生鴨瘟和下一代雛鴨不發(fā)生鴨病毒性肝炎。他們認(rèn)為，對于1～30日齡階段的小鴨鴨瘟和病毒性肝炎的防治主要依靠母源抗體和環(huán)境的隔離、消毒來實(shí)現(xiàn)。

薛琳琳（1980-），女，碩士，副教授，主要從事家禽飼養(yǎng)繁育及動(dòng)物解剖生理教學(xué)及科研工作。