楊韻，徐波

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南 250355；2.山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院，山東 濟(jì)南 250021)

·綜述·

牡蠣的化學(xué)成分及其生物活性研究進(jìn)展

楊韻，徐波2*

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東 濟(jì)南250355；2.山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院，山東 濟(jì)南250021)

牡蠣肉味鮮美，營養(yǎng)價值高，為藥食同源。牡蠣肉中含有多種氨基酸、糖原、大量的活性微量元素及小分子化合物，其殼中含有大量碳酸鈣。牡蠣具有增強免疫力、抗疲勞、抗病毒、保護(hù)肝臟、降糖、抗腫瘤、抗氧化、抑菌等作用。本文綜述了近年來牡蠣肉、牡蠣殼的化學(xué)成分、生物活性研究進(jìn)展，旨在為牡蠣的進(jìn)一步研究和開發(fā)利用提供依據(jù)。

牡蠣；化學(xué)成分；生物活性

牡蠣，俗稱蠔，全世界有100多種，我國沿海有20多種。現(xiàn)入藥的牡蠣主要有近江牡蠣OstrearivularisGould、長牡蠣OstreagigasThunberg、大連灣牡蠣OstreatalienwhanensisCrosse等。牡蠣肉味道鮮美，營養(yǎng)價值高，素有“海底牛奶”之美稱，是沿海一種重要的海洋經(jīng)濟(jì)貝類[1]。牡蠣含有豐富的糖原、蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素及維生素等，除食用外，其作為治病強身的海洋藥物，吸引越來越多的關(guān)注。貝殼是牡蠣入藥的部分，具有重鎮(zhèn)安神，潛陽補陰、軟堅散結(jié)的功能，用于驚悸失眠、眩暈耳嗚、瘰疬痰核、癥瘕痞塊。煅牡蠣收斂固澀，制酸止痛，用于自汗盜汗、遺精滑精、崩漏帶下、胃痛吞酸。近年來對牡蠣的化學(xué)成分和生物活性的研究較多，筆者對此進(jìn)行綜述，旨在為牡蠣的進(jìn)一步開發(fā)利用提供資料。

1 牡蠣的化學(xué)成分研究

1.1牡蠣肉的化學(xué)成分研究

1.1.1牡蠣肉中氨基酸的提取和分離 牡蠣肉中含有多種氨基酸，其為構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位，是生物體內(nèi)重要的活性物質(zhì)。牛磺酸是一種含硫氨基酸，為中樞神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，是人類一種極為重要的必需營養(yǎng)素。陳申如等[2]采用水煮法提取牡蠣中的?；撬幔酶咝б合嗌V法測定牡蠣中?；撬岬暮?。?；撬豳|(zhì)量濃度在5～60μg·mL-1具有良好的線性關(guān)系(r=0.9946)。檢出下限為0.02μg·mL-1，定量下限為0.07μg·mL-1，平行樣品的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.31%～4.48%，提取溫度為100℃時，牡蠣中牛磺酸的提取率達(dá)2.1942mg·g-1。劉亞南等[3]研究了中性蛋白酶酶解法從牡蠣中提取牛磺酸，溫度為40℃、加酶量為1000ug·g-1(鮮肉)、pH7.2、料液比為1∶9(g·L-1)、水解5h時，?；撬崽崛×繛?.623mg·g-1(鮮肉)，為最佳工藝條件。鄭惠娜等[4]采用pH調(diào)節(jié)法提取分離牡蠣分離蛋白，并對其氨基酸組成進(jìn)行分析。在最佳提取條件下，分離牡蠣蛋白各種氨基酸約占總氨基酸的42.44%，高于聯(lián)合國糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO)的推薦值。陳艷輝等[5]用乙酸乙酯萃取牡蠣勻漿上清液，經(jīng)硅膠柱色譜分離，采用紅外分光光度法(IR)、核磁共振波譜法(NMR)、質(zhì)譜法(MS)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，得到3種組分：scalar dial、色氨酸和苯丙氨酸。程慶紅等[6]用高效液相色譜法測定出牡蠣中含有次黃嘌呤、黃嘌呤、腺嘌呤等嘌呤類物質(zhì)。

1.1.2牡蠣肉中多糖的提取和分離 李志[7]對牡蠣進(jìn)行單因素試驗和正交試驗，在溫度為90℃、料液比為1∶80、時間為3h的條件下，采用苯酚-硫酸法測得牡蠣中總糖含量為72.43%。田振華等[8]對多糖提取溫度、pH、時間、次數(shù)、料液比進(jìn)行了正交試驗，得出提取多糖的最佳條件：pH為8.0、溫度為65℃、時間4h、次數(shù)為3次、料液比為1∶15(mg·mL-1)，得到多糖含量為77.14%。高蒙蒙等[9]對太平洋牡蠣進(jìn)行多糖的提取分離純化，得到3種牡蠣粗多糖。單糖組分只有葡萄糖，粗多糖經(jīng)DEAE Sepharose FF陰離子交換樹脂色譜后，獲得了5種純化組分。對其中MC-1組分采用Sephacryl S-400凝膠柱色譜純化，得到了1種具有較高純度的多糖組分MC-11，其總糖含量為95.1%，是一種吡喃葡聚糖。

1.1.3牡蠣肉中的脂溶性有毒物質(zhì) 劉仁沿等[10]采用小鼠生物法在廣西北海的緣齒牡蠣中檢測出12μg·Kg-1的螺旋形亞胺(GYM)毒素成分。GYM是腹瀉性貝毒(DSP)的一種。DSP是脂溶性多環(huán)醚類生物活性物質(zhì)，可在貝等濾食性動物體內(nèi)富集，危害食用者的健康。

1.2牡蠣殼的化學(xué)成分研究

牡蠣殼是有機質(zhì)通過生物礦化調(diào)節(jié)形成，即以少量有機質(zhì)大分子(蛋白質(zhì)、糖蛋白或多糖)為框架，以碳酸鈣為單位進(jìn)行分子操作，組成高度有序的多重微層結(jié)構(gòu)。牡蠣殼的物質(zhì)組成分為無機質(zhì)和有機質(zhì)兩部分：無機質(zhì)以碳酸鈣為主，占牡蠣殼質(zhì)量的90%以上，其中鈣元素占(39.78±0.23)%，此外還含有銅、鐵、鋅、錳、鍶等20多種微量元素；有機質(zhì)又分為可溶性有機質(zhì)和不溶性有機質(zhì)，其含量隨貝殼種類和生長期不同而異[11]。趙玉英等[12]研究了牡蠣殼與煅制牡蠣殼物理性質(zhì)、化學(xué)性質(zhì)的差異。用原子吸收光譜儀測得牡蠣殼和煅制牡蠣殼粉末中Ca的含量分別為34.59%和35.10%，Ca含量以CaCO3計分別為86.48%和87.75%。牡蠣殼和煅制牡蠣殼蛋白質(zhì)的提取量分別為1.19%和1.21%。采用凱氏定氮法測得的牡蠣殼和煅制牡蠣殼蛋白提取物中的N含量分別為0.0374%和0.0116%。王行美[13]采用二乙基二硫代氨基甲酸銀(DDC-Ag)法對遼寧大連、河北滄州、山東青島、浙江臺州、福建福州、廣東湛江6個不同地區(qū)的生牡蠣和煅牡蠣中砷的含量進(jìn)行測定。生品牡蠣中都測出有害元素砷，其含量差異較大，福州的牡蠣砷含量最高，為1.626μg·mg-1，遼寧大連的牡蠣砷含量較低，為0.274μg·mg-1，其余產(chǎn)地的牡蠣砷含量相差不大。生品牡蠣經(jīng)煅制后其有害元素砷的含量均有不同程度的降低，含砷量約為生品的40.7%～83.7%。

2 牡蠣的生物活性研究

2.1牡蠣的降糖作用

胡建恩等[14]對大連灣牡蠣進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)牡蠣蛋白質(zhì)的胃蛋白酶酶解產(chǎn)物中具有α-葡萄糖苷酶(AGD)抑制活性組分，通過葡聚糖凝膠LH-20色譜柱分離得到混合物組分II的AGD抑制作用的半抑制濃度(IC50)值為40mg·mL-1。由于用HPLC所獲得的高活性組分的量極少，未能對其進(jìn)行IC50值的分析，但是其陽性對照藥物阿卡波糖的IC50值為8mg·mL-1，間接地說明了牡蠣蛋白水解產(chǎn)物在降血糖方面具有一定的應(yīng)用價值。雷丹青等[15]采用牛胰蛋白酶酶解的方法制備牡蠣活性肽，用氨基酸分析儀測定氨基酸組成，用苯酚-硫酸法測定糖原含量，用四氧嘧啶制作小鼠糖尿病模型，采用酶法、分光光度法測定小鼠血糖(FBG)，發(fā)現(xiàn)牡蠣酶解活性肽中含有較多的必需氨基酸及糖原等；牡蠣酶解活性肽能降低四氧嘧啶誘導(dǎo)的小鼠血糖。

2.2牡蠣的抗氧化作用

張澤等[16]采用鄰苯三酚自氧化法測太平洋牡蠣，發(fā)現(xiàn)其原血漿、粗蛋白、血漿純化蛋白均具有不同程度的抗氧化效果，以血漿純化蛋白的效果最優(yōu)，原血漿和粗蛋白次之。純化血漿蛋白在與原血漿和粗蛋白的蛋白含量之比為1∶10時，即可表現(xiàn)出與原血漿和粗蛋白相似的抗氧化活性。林海生等[17]制備了牡蠣蛋白酶解物，通過體外實驗測定抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)其還原性較強，對羥基自由基和超氧陰離子均有較好的清除能力。

2.3牡蠣的抗腫瘤活性

陳艷輝等[18]以廣西高發(fā)腫瘤鼻咽癌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞為研究對象，采用四氮唑藍(lán)還原法(MTT)觀察牡蠣多糖對細(xì)胞生長的作用。結(jié)果顯示，隨著牡蠣多糖濃度的增加，其對鼻咽癌細(xì)胞CNE-1和血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長抑制率也增加。胡雪瓊等[19]將近江牡蠣全臟器進(jìn)行酶解提取后，得粗提物近江牡蠣糖胺聚糖SG1，得率為2.40%。采用MTT法研究粗提物SG1對Hela細(xì)胞的體外抗腫瘤活性，發(fā)現(xiàn)其具有較明顯的抗腫瘤活性，且存在一定的量效關(guān)系。血管發(fā)生、新血管的形成是腫瘤生長及其轉(zhuǎn)移形成的根本原因，因此抗血管生成治療已成為目前一種極具潛能的腫瘤治療策略。王振華等[20]利用雞胚胎絨毛尿囊膜血管發(fā)育研究體內(nèi)牡蠣多肽(OPP)對血管形成的作用。結(jié)果表明，OPP能明顯抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)的增殖。平板劃痕法、侵蝕、官腔形成等實驗方法表明，在OPP作用下，隨著OPP濃度升高，其對HUVECs的抑制率明顯升高。此外，電鏡結(jié)果顯示，質(zhì)量濃度為400μg·mL-1的OPP對HUVECs作用48h能明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，說明OPP可通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、管腔形成和促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡而具有顯著抗血管生成作用。廖共山等[21]研究了牡蠣活性肽(BPOG50-Ⅱ)對人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞增殖和凋亡的影響。用不同濃度BPOG50-Ⅱ作用于體外培養(yǎng)的人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞，作用24、48、72h時計拒染活細(xì)胞數(shù)，計算生長抑制率(IR)；采用光鏡、電鏡觀察48h后細(xì)胞形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)變化；熒光染色法觀察BPOG50-Ⅱ作用后的凋亡情況。結(jié)果顯示，BPOG50-Ⅱ作用后IR明顯降低，呈劑量與時間依賴性；電鏡觀察細(xì)胞出現(xiàn)明顯凋亡，熒光顯微鏡下細(xì)胞出現(xiàn)凋亡改變，表明牡蠣活性肽對人舌鱗癌細(xì)胞株Tca8113體外增殖具有抑制作用，可引起細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變并能誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡。吳紅棉等[22]對近江牡蠣糖胺聚糖(CG)體內(nèi)外抗腫瘤作用進(jìn)行研究，實驗顯示CG對K562、CNE-2Z、Hela細(xì)胞的生長均有抑制作用，且對抗腫瘤藥物5-Fu具有增敏作用；CG對移植性S180肉瘤抑瘤率可達(dá)到44.66%，與注射環(huán)磷酰胺(CTX)合用后抑瘤率可提高至67.96%，且對CTX損傷的小鼠免疫功能有一定的修復(fù)作用。

2.4牡蠣抑制病毒增殖

李江濱等[23]采用血凝滴度法測定牡蠣多糖，發(fā)現(xiàn)其能明顯抑制犬腎細(xì)胞(MDCK)培養(yǎng)的甲型流感病毒增殖。通過聯(lián)合用藥試驗研究牡蠣多糖對利巴韋林抗流感病毒的協(xié)同效應(yīng)，發(fā)現(xiàn)其具有相加效應(yīng)。范巧云等[24]對牡蠣多糖體外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用進(jìn)行研究。以HepG2.2.15細(xì)胞為體外細(xì)胞模型，給予不同濃度牡蠣多糖進(jìn)行混合培養(yǎng)，用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)測定上清液中乙肝表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)的水平，觀察藥物對HepG2.2.15細(xì)胞分泌病毒抗原的影響。牡蠣多糖質(zhì)量濃度在10～1000μg·mL-1時，以MTT法檢測到藥物在體外對HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBsAg、HBeAg均有較明顯的抑制作用。

2.5牡蠣增強免疫作用

江長優(yōu)等[25]采用小鼠免疫器官指數(shù)測定、淋巴細(xì)胞體外增殖實驗、巨噬細(xì)胞吞噬實驗、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)來比較牡蠣多糖對正常和免疫抑制小鼠免疫功能的影響。研究發(fā)現(xiàn)，牡蠣多糖對小鼠的非特異性免疫和細(xì)胞免疫功能有較顯著的增強作用。李萌等[26]采用巨噬細(xì)胞體外培養(yǎng)方法，觀察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)的變化，結(jié)果表明，牡蠣多糖能顯著提高Ⅰ型單純皰疹病毒感染小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，增強腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力，具有免疫增強作用。華巖等[27]通過建立力竭性游泳運動損傷模型，發(fā)現(xiàn)牡蠣提取液對力竭訓(xùn)練小鼠的免疫系統(tǒng)有正向調(diào)節(jié)作用，能提高其造血功能和循環(huán)功能，促進(jìn)血液中溶菌酶的再生與合成，降低酸性磷酸酶(ACP)活性，提高小鼠胸腺、脾臟組織中抗氧化酶活性，降低丙二醛(MDA)含量。過度訓(xùn)練導(dǎo)致機體的免疫功能受到抑制，華巖等[28]研究發(fā)現(xiàn)運動訓(xùn)練組小鼠免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量顯著降低，而服用牡蠣多糖后小鼠IgG、IgA、IgM的含量顯著升高，說明牡蠣多糖能提高B淋巴細(xì)胞的免疫功能。

2.6牡蠣的解酒作用及對酒精性肝損傷的防治作用

秦小明等[29]以小鼠血清中乙醇濃度為指標(biāo)，對牡蠣肉中含有的蛋白質(zhì)、糖原以及牛磺酸等生理活性成分的醒酒效果進(jìn)行探討。研究發(fā)現(xiàn)，牡蠣肉中的糖原和牛磺酸均具有明顯的醒酒效果，牡蠣肉蛋白質(zhì)無醒酒作用。楊勇進(jìn)等[30]給予大鼠酒精灌胃制造酒精性肝損傷模型，發(fā)現(xiàn)牡蠣提取物可以有效地降低由酒精引起的白介素17(IL-17)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及轉(zhuǎn)氨酶的升高，有明顯的保肝降酶作用。張博等[31]通過觀察牡蠣提取物(東易牌牡蠣肝寶)對乙醇性肝病的臨床療效，將23例乙醇性肝病病人隨機分為治療組(12例)和對照組(11例)，觀察兩組治療前后效果，發(fā)現(xiàn)牡蠣肝寶治療乙醇性肝病效果較好，且其為藥食同源的食品，安全可靠，無副作用。候麗等[32]利用水提醇沉法提取牡蠣粗多糖，動物實驗發(fā)現(xiàn)其能抑制急性酒精肝損傷小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乙醛脫氫酶(ALDH)活性的升高，并能顯著提高肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、乙醇脫氫酶(ADH)的活性，降低MDA含量，減輕酒精對肝細(xì)胞的病理傷害。

2.7牡蠣的抗疲勞作用

吉宏武等[33]研究發(fā)現(xiàn)，近江牡蠣水解物中含有粗蛋白質(zhì)、糖原等，氨基酸組成完善，并含有大量的?；撬?、礦物質(zhì)鋅等多種具有抗疲勞作用的營養(yǎng)成分。以小鼠為實驗對象，發(fā)現(xiàn)近江牡蠣肉水解物有較好的抗疲勞效果。長期大負(fù)荷運動訓(xùn)練會導(dǎo)致血紅蛋白(HGB)、血清T水平降低，進(jìn)而導(dǎo)致體能下降、運動能力降低或產(chǎn)生疲勞。羅齊軍等[34]通過研究牡蠣多肽對長期大負(fù)荷訓(xùn)練大鼠血睪酮、黃體生成激素(LH)和類固醇合成快速調(diào)節(jié)蛋白(StAR)信使RNA(mRNA)表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)補充牡蠣多肽可以提高長期大負(fù)荷訓(xùn)練大鼠HGB和血睪酮水平。方富永等[35]以長牡蠣肉為原料，并用優(yōu)化的三酶復(fù)合工藝水解。力竭游泳、耐低壓缺氧能力的動物實驗結(jié)果表明，長牡蠣肉水解物具有良好的抗運動性疲勞作用。

2.8牡蠣的其他生物活性

蘇開鑫等[36]通過建立類固醇性骨質(zhì)疏松大鼠模型，發(fā)現(xiàn)牡蠣提取物可有效防治潑尼松引起的骨代謝紊亂。馬永臻[37]通過建立維甲酸(RA)致小鼠胚胎神經(jīng)管缺陷畸形模型(NTDs)，采用免疫組織化學(xué)方法及圖像分析技術(shù)，從分子水平探討RA致NTDs的機理及牡蠣提取物拮抗RA致畸的作用。認(rèn)為Cx43蛋白的過度表達(dá)可能是RA誘導(dǎo)NTDs的機理之一，牡蠣可以通過改善Cx43基因的表達(dá)而拮抗RA對胎鼠的致畸作用。田振華等[38]對牡蠣多糖的抑菌效果進(jìn)行探討，采用紙片瓊脂法檢測抑菌效果。研究發(fā)現(xiàn)牡蠣多糖對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌生長都有抑制作用，其中對金黃色葡萄球菌抑制效果最佳，其次是枯草芽孢桿菌，最弱的是大腸桿菌。

3 總結(jié)與展望

牡蠣肉中含有多種氨基酸、糖原、大量的活性微量元素及小分子化合物，牡蠣殼中主要成分是碳酸鈣。牡蠣的化學(xué)成分研究中關(guān)于?；撬岬难芯枯^多，其他類的氨基酸研究近幾年有所增加。在?；撬岬奶崛》矫?，試驗方法的改變使提取率有所提高，對提高生物利用率有重大意義。牡蠣殼中含有90%以上的碳酸鈣，是良好的鈣源，對其開發(fā)利用很有現(xiàn)實意義。

牡蠣中含有多種化學(xué)成分，因此其生物活性范圍較廣。牡蠣有增強免疫、抗疲勞、抗病毒、保護(hù)肝臟、降糖、抗腫瘤、抗氧化、抑菌等作用。在目前研究中，牡蠣抗腫瘤、降糖、增強免疫力等方面的研究較多。牡蠣的抗腫瘤作用不只是單一針對某一類癌細(xì)胞，對肺癌細(xì)胞、舌鱗癌細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞等都有作用，可以進(jìn)行更多更深入的研究，更好地利用牡蠣的抗腫瘤活性。近幾年關(guān)于牡蠣對酒精肝損傷的防治作用研究比較多，酒文化在現(xiàn)實中覆蓋面很廣，所以牡蠣的這種生物活性有很大的價值。牡蠣多糖含有抗菌作用，能明顯抑制多種致病菌的生長，這方面研究還較少，值得深入探討。

近年來，環(huán)境污染使得部分海域中牡蠣體內(nèi)的一些重金屬如砷、鉛、鎘、汞的含量上升，甚至還出現(xiàn)了危害食用者健康的腹瀉性貝毒，提示我們保護(hù)環(huán)境的重要性，同時對牡蠣研究時應(yīng)注意對其來源產(chǎn)地進(jìn)行篩選。在醫(yī)藥、食品等方面對牡蠣進(jìn)行多用途、高效、高值化的綜合開發(fā)利用是值得深入研究的問題，這對海洋貝類中藥的開發(fā)和貝類養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展都具有重要的意義。

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ResearchProgressonChemicalCompositionofOysterandItsBiologicalActivity

YANGYun1，XUBo2*

(1.ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine,Jinan250355,China；2.TheAffiliatedProvincialHospitalofShandongUniversity,Jinan250021,China)

This paper reviews the research progress of chemical constituents of oyster meat，oyster shells and the research progress of oyster’s biological activities in recent years，in order to provide the basis for the further research，development and utilization of oyster.

Oyster；chemical composition；biological activity

*

徐波，副主任藥師，研究方向：中藥制劑及臨床藥學(xué)；Tel：(0531)68776573，E-mail：xbjnsd@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.12.028

2015-03-15)