熊劍華

我國乳腺癌以每年3%～4%的增長速度上升[1]。含蒽環(huán)類化療方案是乳腺癌綜合治療的重要組成部分，但患者的敏感性存在個體差異，在治療過程中根據(jù)體外腫瘤藥敏試驗(yàn)結(jié)果，有針對性地使用敏感的藥物，可避免其充血性心力衰竭、誘發(fā)其它腫瘤的不良反應(yīng)，使患者得到最大的獲益。TopoⅡα為催化DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)改變的酶系，是多種抗腫瘤藥如蒽環(huán)類的靶分子，其表達(dá)將影響腫瘤對化療的敏感性，本文探討TopoⅡα在乳腺癌組織中的分布規(guī)律暨臨床多因素對其表達(dá)的影響，以及對預(yù)后和化療的觀察。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2009年1月～2012年6月江西省新干縣人民醫(yī)院行乳腺癌改良根治術(shù)女性患者的手術(shù)標(biāo)本共78例，患者年齡32～68歲，其中45歲以下25例，45歲以上53例，左側(cè)38例，右側(cè)40例，伴同側(cè)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的36例，無轉(zhuǎn)移的42例；均為原發(fā)腫瘤，術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)為乳腺癌。

1.2 臨床因素 病理情況：浸潤性導(dǎo)管癌49例，乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌12例，乳腺黏液癌5例，導(dǎo)管原位癌4例，鱗癌3例，浸潤性小葉癌3例，髓樣癌2例。TNM分期：Ⅰ期10.26%（8/78），Ⅱ期 50%（39/78），Ⅲ期 26.92%（21/78），Ⅳ期 12.82%（10/78）。腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率 64.1%（50/78）；ER（+）48.72%（38/78），ER（-）46.15%（36/78），Her-2 高表達(dá) 37.18%（29/78）。

1.3 化療方案 患者化療前血常規(guī)、肝腎功能正常范圍內(nèi)，心電圖正常。入選患者均未行含蒽環(huán)類藥物化療。所有患者給予CAF方案化療，具體為CTX（山西普德藥業(yè)公司生產(chǎn)，0.2g/支，批號 H14023686）400mg～600mg/m2靜滴，第 1 天；THP（浙江海正藥業(yè)公司，10mg/支，批號H20045983）45～55mg/m2靜滴，第 1天；5-Fu（天津金耀藥業(yè)公司，0.25g/支，批號H12020959）400～500mg/m2靜滴，第 1、8天。3周為 1周期，并且每人均用兩周期以上。共用226周期，平均每人用2.9周期。

1.4 療效評價 按WHO統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)評價。有效患者為完全緩解（CR）+部分緩解（PR），療效持續(xù)時間定義：TTP指從本次治療開始到腫瘤進(jìn)展的時間，TTF為治療開始到病變進(jìn)展時間，還包括任何原因中斷治療日期為止。

1.5 免疫組織化學(xué)分析 TopoⅡα濃度測定采用SP免疫組織化學(xué)法，所有乳腺癌標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，再連續(xù)切片4μm厚，常規(guī)用3%H2O2溶液作用10min，微波修復(fù)抗原，依次加入Ⅰ抗（抗TopoⅠα）和Ⅱ抗（抗TopoⅡα），最后DAB顯色，蘇木素復(fù)染后封片觀察，以TBS液代替Ⅰ抗作陰性對照，用已知扁桃體作陽性對照。

1.6 在光學(xué)顯微鏡下觀察 在腫瘤細(xì)胞核內(nèi)有黃色或棕黃色著色顆粒判斷為陽性，相反如觀察無明顯變化則判斷為陰性。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，TopoⅡα mRNA的表達(dá)水平與預(yù)后和含蒽環(huán)類療效的關(guān)系用χ2檢驗(yàn)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TopoⅡα的表達(dá) 78例患者組織中有41例（52.56%）TopoⅡα mRNA呈陽性表達(dá)。

2.2 TopoⅡα表達(dá)和臨床病例資料關(guān)系 根據(jù)臨床特征包括月經(jīng)情況、年齡（＜35和≥35歲）、病理學(xué)類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER表達(dá)、PR表達(dá)、Her-2表達(dá)等特性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。見表1。

表1 78例晚期乳腺癌患者的臨床特性與TopoⅡα表達(dá)的關(guān)系

2.3 TopoⅡα表達(dá)與臨床療效、預(yù)后及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系見表2。

表2 78例乳腺癌TopoⅡα表達(dá)和臨床療效、預(yù)后及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系

3 討論

目前乳腺癌的發(fā)病率明顯上升，在城市更加明顯，輔助化療是乳腺癌綜合治療的重要組成部分，經(jīng)統(tǒng)計(jì)表明含蒽環(huán)類藥物的方案要優(yōu)于不含蒽環(huán)類藥物。但蒽環(huán)類藥物不是對所有乳腺癌病人有效，有些開始治療有效的患者在多次治療后耐藥，這提示乳腺癌對化療藥物的敏感性存在個體差異。

拓?fù)洚悩?gòu)酶II是一個已知蒽環(huán)類抗生素作用的點(diǎn)[2]，能調(diào)節(jié)核酸空間結(jié)構(gòu)的動態(tài)變化，其蛋白水平的變化能一定程度上反映細(xì)胞的增殖情況[3]。TopoII在人類體內(nèi)有二種同工酶：TopoIIα和TopoIIβ，前者在乳腺癌、肺癌和頭頸部腫瘤中表達(dá)明顯高于正常組織，具有細(xì)胞周期特異性，而后者在腫瘤細(xì)胞和正常組織中無差異，在細(xì)胞周期中保持恒定。TopoIIα主要有兩種生理方式：一是直接參與打斷后重新連接DNA分子鏈的生物過程；二是以調(diào)節(jié)DNA的螺旋結(jié)構(gòu)以及打節(jié)或解節(jié)DNA的環(huán)聯(lián)體狀態(tài)的方式間接參與。蒽環(huán)類藥物是通過抑制TopoIIα和DNA的結(jié)合，引起DNA的斷裂最終導(dǎo)致細(xì)胞殺滅，如果TopoⅡα表達(dá)低下將影響藥物起效形成耐藥。

本文研究通過免疫組織化學(xué)分析檢測了78例乳腺癌組織中TopoIIα表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TopoIIα與月經(jīng)情況、年齡、病理學(xué)類型、臨床分期、ER表達(dá)、PR表達(dá)均無關(guān)，但在術(shù)后腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)、Her-2表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)越多TopoIIα陽性表達(dá)越高，TopoIIα而且和Her-2表達(dá)呈正相關(guān)。

在腫瘤患者接受含蒽環(huán)類藥物聯(lián)合化療的療效分析中，TopoIIα陽性組有效率58.54%（24/41）高于TopoIIα陰性表達(dá)組的 40.54%（15/37），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。從藥物療效持續(xù)時間來看，TopoIIα陽性組中位TTF 16周高于TopoIIα陰性表達(dá)組的12周，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示TopoIIα陽性顯示患者對于含蒽環(huán)類藥物化療療效持續(xù)時間更長。同時本實(shí)驗(yàn)分析了TopoIIα陽性組腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為75.61%（31/41）高于TopoIIα陰性組遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率51.35%（19/37），兩者之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，TopoIIα陽性表達(dá)出現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險高于陰性表達(dá)患者。

大量研究表明TopoIIα表達(dá)和預(yù)后有關(guān)[4-5]，對其發(fā)生、發(fā)展、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[6-7]，可預(yù)測蒽環(huán)類藥物對乳腺癌化療敏感程度的指標(biāo)[8]。

[1] 肖海鳳，于國華,劉淑真，等.TopoⅡα在乳腺癌中的表達(dá)與蒽環(huán)類藥物敏感性的分析[J].維坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2013,35（5）:389.

[2] 杜文娟，王冬，秦文星，等.拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα表達(dá)與蒽環(huán)類化療藥遠(yuǎn)期療效[J].中國藥物應(yīng)用與監(jiān)測，2012,9（3）:125.

[3] 況麗萍，王媛媛，管慧紅，等.TopoⅡa和Ki-67在不同分子亞型乳腺癌組織中的表達(dá)及意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2014,30（5）:778.

[4] O′Malley FP,Chia S,Tu D,et al.Topoisomerase II alpha and responsiveness of breast cancer to adjuvant chemotherapy?[J].J Natl Cancer Inst,2009,101(9):644-650.

[5] 何奇，徐國萍，王杰，等.TopoⅡα在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].中國癌癥雜志，2011,21（1）:41.

[6] 張志生.TopoⅡα在青年乳腺癌中的表達(dá)及對新輔助化療療效的影響[J].河北醫(yī)藥，2011,33（21）:3264.

[7] 馬平.TopoⅡ、p53、Ki-67、c-erbB-2 在乳腺癌組織中的表達(dá)[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011,19（8）:1546.

[8] 肖華武，歐陽取.TopoⅡα在乳腺癌組織中表達(dá)及其與蒽環(huán)類藥物敏感性的關(guān)系[J].實(shí)用癌癥雜志，2013,28（6）:590.