劉曉，何穎綜述，樸正根審校

（暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院口腔系廣東廣州510632）

·綜述·

干細胞技術(shù)與牙齒再生的研究進展

劉曉，何穎綜述，樸正根審校

（暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院口腔系廣東廣州510632）

牙齒是一個復(fù)雜的生物器官，由多種組織組成，包括牙釉質(zhì)、牙本質(zhì)、牙骨質(zhì)和牙髓，牙齒脫落是最常見的器官衰竭［1］。牙齒及其支持組織是由上下頜突和額鼻突的外胚層及外胚間葉細胞發(fā)育而來，其發(fā)育是一個長期、復(fù)雜的生物學(xué)過程，包括細胞與細胞、上皮與間充質(zhì)的相互作用，細胞分化，形態(tài)發(fā)生，組織礦化和牙齒的萌出，而牙胚的分化和發(fā)育過程是依賴于特定牙齒發(fā)生部位的上皮組織及其下方的間充質(zhì)組織相互作用而形成的，故對于再生的牙齒來說，其發(fā)育至少需要兩種細胞，即牙源性上皮細胞及牙源性間充質(zhì)細胞，而牙齒再生研究的方向多半是尋找這兩種細胞的替代物。

干細胞是一類特殊的細胞，其生物學(xué)特征既具有自我更新的能力，又具有多向分化的潛能，可以在機體生命過程中無限期分裂，并在合適的條件或給予恰當?shù)臈l件后，能分化產(chǎn)生多種不同的細胞類型；根據(jù)干細胞的不同發(fā)育階段，目前可將其劃分為：①胚胎干細胞；②成體干細胞，包括造血干細胞、骨髓間質(zhì)干細胞、肌肉干細胞、脂肪干細胞等。某些干細胞可定向分化，發(fā)育成熟為一種特定細胞或限于某種功能的細胞，如：心肌細胞、皮膚細胞、神經(jīng)細胞等；某些干細胞定向性不強，但具有分化成多種類型細胞的潛能［2］。干細胞技術(shù)，又稱為再生醫(yī)療技術(shù)，是指通過對干細胞進行分離、體外培養(yǎng)、定向誘導(dǎo)、甚至基因修飾等過程，在體外繁育出全新的、正常的甚至更年輕的細胞、組織或器官，并最終通過細胞組織或器官的移植實現(xiàn)對臨床疾病的治療。本文就幾個典型的干細胞在牙齒再生中的應(yīng)用作一綜述，為牙齒再生研究提供新的思路。

1　胚胎干細胞與牙齒再生

胚胎干細胞（embryonic stem cell，ESc）是早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，它具有一種內(nèi)在的自我更新能力并能分化成各種各樣的功能性組織細胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性［3］。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ESc都能被誘導(dǎo)分化為機體幾乎所有的細胞類型。人類ESc是由美國生物學(xué)家Thomson［4］第一次所分離出來。ESc是一種多能性細胞，來源于三個胚胎層的衍生物?？紤]到未來的臨床應(yīng)用，ESc可分化為神經(jīng)元，心肌細胞和許多其他類型的細胞［5］。大量的研究證明小鼠的ESc可以分化為心肌細胞、造血細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、神經(jīng)細胞［6-10］等。在上皮分化方面，ESc可分化為角膜上皮細胞、腎上皮細胞、色素上皮細胞［11-13］等。人類ESc對于人類疾病的細胞治療也有著巨大的潛力，如：糖尿病，神經(jīng)元退化性紊亂等［14］。

ESc在牙齒再生方面的研究早期主要是集中在誘導(dǎo)其形成神經(jīng)嵴樣細胞，由于其廣泛的潛力，已有成功從人類ESc中產(chǎn)生出神經(jīng)嵴樣細胞的報道，神經(jīng)嵴樣細胞已成為一個研究干細胞生物學(xué)和疾病發(fā)展的理想的模型系統(tǒng)［15］。神經(jīng)嵴細胞是一個多能的ESc細胞群，它對顱面部的各種結(jié)構(gòu)包括牙齒的形成有重要作用，現(xiàn)在已經(jīng)普遍認為牙釉質(zhì)是它外胚層的衍生物，而牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體以及其周圍的支持組織是源自神經(jīng)嵴細胞衍生物的間質(zhì)［16］。故ESc對于牙齒的形成與再生有著重要的意義。而ESc對于牙周組織的再生也有重要作用，牙周組織需要牙根表面新的牙骨質(zhì)的形成，新的牙槽骨以及能使兩礦化組織之間進行功能連接的牙周韌帶纖維［17-18］。

上皮和間充質(zhì)是牙齒器官再生所需的組分。有研究表明，小鼠的ESc和小鼠骨髓細胞可以分化為成釉樣細胞。這些小鼠干細胞的研究表明，人類ESc可成為牙源性上皮細胞再生的一個可行的細胞來源。研究的確定因素包括了人牙源性間質(zhì)可以促進ESc來源的上皮細胞進一步分化，并將進一步促進ESc在牙齒組織再生中的作用［19］。研究者Fang Ning［20］開發(fā)了一種有效的培養(yǎng)方式誘導(dǎo)小鼠ESc分化為牙源性上皮細胞。通過將小鼠ESc放入無造釉細胞血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)，可以誘導(dǎo)分化出牙源性上皮細胞；并可觀察到將小鼠ESc植入免疫功能不全小鼠中會顯示出組織再生的能力，形成牙源性上皮樣結(jié)構(gòu)。還有國內(nèi)學(xué)者Jiang［21］研究通過在體外將ESc誘導(dǎo)分化為成牙本質(zhì)樣細胞，發(fā)現(xiàn)將ESc誘導(dǎo)分化為擬胚體后，再將擬胚體細胞與牙髓成纖維細胞共培養(yǎng)，可以促進擬胚體細胞向成牙本質(zhì)樣細胞分化。

從理論上講，ESc比ASc更具有分化潛能，在一定的誘導(dǎo)條件下，即可發(fā)育分化為所有組織器官具有特定功能的細胞，這一成就將會給移植治療、藥物的發(fā)現(xiàn)與篩選、基因治療和生物發(fā)育等基礎(chǔ)研究等帶來深遠的影響，打開在體外生產(chǎn)人體所有類型可供移植治療的細胞、組織乃至器官的大門［22］。但是ESc的倫理爭議，在疾病治療中存在的免疫排斥問題以及形成畸胎瘤的風險制約著它的應(yīng)用。

2　誘導(dǎo)多能干細胞與牙齒再生

隨著干細胞技術(shù)的發(fā)展，早在2006年，日本的兩位科學(xué)家KazutoshiTakahashi和Shinya Yamanaka［23］發(fā)現(xiàn)向小鼠皮膚成纖維細胞里轉(zhuǎn)入四個基因（Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4）后，這些細胞能被誘導(dǎo)成為具有ESc特征的細胞，因其具有多能性，能分化產(chǎn)生體內(nèi)任何類型的細胞，故稱之為誘導(dǎo)多能干細胞（inducedpluripotentstemcell，iPSc）。其具有自我復(fù)制、自我更新和多向分化的能力，現(xiàn)已有研究證實，iPSc可以向人體內(nèi)三個胚層的細胞分化，如外胚層分化為神經(jīng)細胞、中胚層分化為心血管和造血細胞、內(nèi)胚層分化為肝、腎等細胞。至此，揭開了體細胞重編程的序幕，即從任何一個胚層發(fā)育分化而來的細胞都可重編程成為iPSc，而且不同階段的細胞重編程的難易程度不同［24］。由于安全、易獲取以及有大量的細胞來源，外周血的使用促進了iPSc的研究?，F(xiàn)在iPSc已經(jīng)被用于細胞療法，疾病模型和藥物發(fā)現(xiàn)。小鼠iPSc能夠分化成任何類型的細胞，甚至具有種系傳播的能力［25］。這一技術(shù)是干細胞研究領(lǐng)域的一項重大突破，它回避了ESc的倫理爭議，使干細胞向臨床應(yīng)用又邁進了一大步。

隨著iPSc研究在醫(yī)學(xué)各個領(lǐng)域的興起和發(fā)展［26-28］，2009年以來口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也開始關(guān)注iPSc?，F(xiàn)在把成體牙源細胞誘導(dǎo)成iPSc的技術(shù)相對成熟，Oda等［29］從拔牙后被丟棄的智齒中得到間充質(zhì)干細胞，通過反轉(zhuǎn)錄OCT3/4，SOX2，KLF4這三個基因而獲得了iPSc，在不使用原癌基因c-Myc基因的情況下，其產(chǎn)生的效率高于皮膚的成纖維細胞，使得這一研究在獲得iPSc上又有了新的突破。另外，Xing Yan等［30］把牙齒干細胞，如：脫落乳牙干細胞、根尖牙乳頭干細胞和牙髓干細胞進行細胞核重組而誘導(dǎo)成iPSc，因牙髓干細胞和脫落乳牙干細胞能低水平地表達與胚胎干細胞有關(guān)的基因，故和誘導(dǎo)成纖維細胞相比，顯示出更高的效率。人牙齦纖維細胞和牙周膜纖維細胞衍生出的iPSc與人ESc表現(xiàn)出相似的特性，這些結(jié)果說明牙齦纖維細胞、牙周膜纖維細胞［31］、口腔黏膜纖維細胞［32］也可被誘導(dǎo)成iPSc。許多類型的細胞已經(jīng)成功地在鼠身上完成了向iPSc的重組；然而重組人類細胞卻變得更加困難。

近年來，iPS牙向分化及參與牙齒再生的研究成果開始被相繼報道，iPSc在適當?shù)臈l件下可分化為神經(jīng)嵴樣細胞［33］，它能表達諸如STRO-1、Lhx6和Msx1等牙源間充質(zhì)干細胞的標志，通過與鼠牙源性上皮的相互作用神經(jīng)嵴樣細胞可誘導(dǎo)分化為牙源性間充質(zhì)細胞（主要是成牙本質(zhì)前體細胞），從而顯現(xiàn)出iPSc在牙齒再生方面的潛能，但是相對于ESc，iPSc存在著分化效率低的問題。通過iPSc與牙源性上皮細胞的相互作用，可誘導(dǎo)其分化為表達p63、CK14和成釉蛋白的上皮［34］，這是第一次報道iPSc通過與牙源性上皮交互作用而分化為成釉細胞。但是，目前這些研究成果仍停留在相關(guān)標記分子的檢測階段，未真正獲得再生牙。然而，Cai［35］課題組最新的研究結(jié)果顯示，尿液來源的iPSc經(jīng)過BMP-4、RA誘導(dǎo)后能形成表達p63的上皮組織，將上皮組織與鼠的間充質(zhì)重組形成的重組牙胚移植入腎包膜下后能形成完整牙齒，這是首例運用iPSc產(chǎn)生再生牙。雖然在文章中提及有牙齒產(chǎn)生的概率問題，但iPSc在牙再生中的應(yīng)用已開始嶄露頭角，其應(yīng)用前景不容小覷。

iPSc的來源更方便、更豐富，可以通過有限的幾個轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)染并直接誘導(dǎo)胎兒、新生兒和成年動物或人的體細胞來獲取多能性干細胞。其次，iPSc的產(chǎn)生再也不需要早期胚胎或者其他配子的參與，克服了使用傳統(tǒng)方法的倫理問題，可見iPSc必然成為未來相當長一段時間內(nèi)的研究熱點［36］。由于iPSc具有與ESc相類似的特性和功能，其成功地繞開了免疫排斥問題和倫理道德問題的困擾，是再生醫(yī)學(xué)理想的種子細胞，也可作為臨床藥物篩選細胞模型和人類疾病治療細胞模型［37］。

3　成體干細胞與牙齒再生

成體干細胞（adult stem cell，ASc）指存在于發(fā)育成熟機體組織中的具有高度自我更新和分化潛能的未分化細胞，ASc具有自我更新，不斷增殖和分化轉(zhuǎn)移的能力，它有廣泛的來源，不涉及倫理問題。ASc在組織工程中將起到非常重要的作用，如在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的修復(fù)，重建以及神經(jīng)組織的再生［38］。目前已在幾乎所有機體組織中發(fā)現(xiàn)ASc的存在，其特有的生物學(xué)特性及潛在的生物醫(yī)學(xué)價值，使之成為近年來生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中最受關(guān)注的熱點課題之一。ASc定位在特定的器官可以分化成巨噬細胞和骨細胞等功能性實體，造血干細胞和間充質(zhì)干細胞是兩種最重要的ASc，它們有能力去通過血液循環(huán)、遷移到損傷部位以及增強再生的過程［39］。

ASc與牙髓、牙齒的再生，Ishizeki［40］將完整分離的鼠牙牙髓移植于脾臟，發(fā)現(xiàn)40d后有類似于天然的管狀牙本質(zhì)形成，尚有骨性牙本質(zhì)的形成；而Yamada［41］將25d鼠牙胚體外連續(xù)培養(yǎng)10d，結(jié)果形成了牙本質(zhì)和釉質(zhì)的細胞外基質(zhì)。ASc與牙周組織再生，不少學(xué)者認為牙周膜是一個自我更新的系統(tǒng)，存在原始的能產(chǎn)生不同表型的干細胞或稱為牙周膜前體細胞，這種干細胞就是牙周膜干細胞，它具有不定向分化潛能，在不同的生長因子微環(huán)境條件下，可分化為成牙骨質(zhì)細胞、牙周膜成纖維細胞及成骨細胞，分別形成牙骨質(zhì)、牙周膜和牙槽骨，是牙周組織工程化理想的種子細胞。牙髓干細胞［42］（dental pucp stem cells，DPSCs）是一種成體干細胞，DPSCs重要的特征之一是一定條件下能形成牙本質(zhì)牙髓復(fù)合體，這將為其應(yīng)用于組織工程中重建牙本質(zhì)牙髓復(fù)合體展示了巨大的優(yōu)越性和可行性，也為其在牙髓生理、病理、牙髓病生物治療方面的研究提供了重要的應(yīng)用價值。

ASc由于具有較長期的自我更新能力，在一定條件下，可分化為不同類型的細胞，并形成相應(yīng)的組織，被認為是組織工程與再生醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域最有價值的種子細胞。不僅口腔來源的ASc作為組織工程的種子細胞，成功構(gòu)建了牙本質(zhì)、牙髓、牙周膜、牙骨質(zhì)再生甚至全牙；而且其他組織起源的ASc，如：造血干細胞、骨髓基質(zhì)細胞、皮膚干細胞、神經(jīng)干細胞、血管內(nèi)皮細胞、肌肉干細胞等也可能在口腔頜面部血管、骨、皮膚、神經(jīng)、肌肉等組織的損傷與修復(fù)治療中發(fā)揮重要作用。早在2005年，Modino和Sharpe［43］的實驗就已表明，利用非牙源性的ASc是可以誘導(dǎo)牙的發(fā)生以及形成牙齒的，同時也指出可將發(fā)育中的牙胚成功植入到患者的牙齦中。目前對ASc研究的深入，尤其是ASc用于牙本質(zhì)、牙髓、骨、軟骨組織的再生，將為牙再生奠定可靠的基礎(chǔ)。

ASc的優(yōu)點，獲取相對容易，源于患者自身的ASc在應(yīng)用時不存在組織相容性的問題，避免了移植排斥反應(yīng)和使用免疫抑制劑。理論上，ASc致瘤風險很低，而且所受倫理學(xué)爭議較少，ASc還具有多向分化潛能。因此，人們對ASc在臨床治療中的應(yīng)用寄予很高的期望［44］。

4　展望

目前，干細胞的研究幾乎涵蓋了基礎(chǔ)與臨床醫(yī)學(xué)的各個領(lǐng)域。這一方面有助于我們認識細胞生長、分化和器官形成等基本生命規(guī)律，另一方面，也為治療某些疾病開辟了一條新的途徑。隨著口腔醫(yī)學(xué)日新月異的發(fā)展，干細胞在口腔方面的應(yīng)用研究正在迅速深入開展。現(xiàn)在研究最多的就是上述的ESc，iPSc和ASc。

ESc具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性，對于牙齒的形成與再生有著重要的意義。但由于ESc的獲得和研究涉及到復(fù)雜的倫理問題，它的相關(guān)研究受到了極大的限制。ASc是具有高度自我更新和分化潛能的未分化細胞，在誘導(dǎo)牙的發(fā)生以及形成牙也有著舉足輕重的作用。ASc因離成熟細胞近、來源廣泛、可塑性強、無免疫排斥等優(yōu)勢，已展示了誘人的臨床應(yīng)用前景。ASc的研究進展也必將為口腔基礎(chǔ)和臨床研究打開新的突破口。

iPSc不僅在細胞形態(tài)、表面抗原、基因表達、增殖及分化潛能方面類似于ESc，而且，擺脫了圍繞人類ESc使用問題的政治和倫理爭論，避免了患者異體干細胞移植引起的免疫排斥反應(yīng)等優(yōu)點。iPSc僅僅出現(xiàn)了兩年，便已在提高效率和應(yīng)用到各種模式生物上取得了很大進展［45］。而且，Cai課題組最新的研究結(jié)果顯示，尿液來源的iPSc經(jīng)過BMP-4、RA誘導(dǎo)后能形成表達p63的上皮組織，將上皮組織與鼠的間充質(zhì)重組形成的重組牙胚移植入腎包膜下后能形成完整牙齒，這是首例運用iPSc產(chǎn)生再生牙。這說明iPSc在牙再生中的應(yīng)用已開始嶄露頭角，其應(yīng)用前景不容小覷，其發(fā)展前景已逐見曙光。

［1］YildirimS,FuSY,KimK,etal.Toothregeneration：a revolution in stomatology and evolution in regenerative medicine［J］.Inter J Oral Sci,2011,03（3）：107-116.

［2］唐佩弦.干細胞基礎(chǔ)研究的新進展［J］.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2006,1：1-11.

［3］Fei T,Chen YG.Regulation of embryonic stem cell selfrenewal and differentiation by TGF-β family signaling［J］. Science China（Life Sciences）,2010,53（4）：497-503.

［4］Prikrylová T,PacherníkJ,Kozubek S,et al.Epigenetics and chromatin plasticity in embryonic stem cells［J］.World J Stem Cells,2013,5（3）：73-85.

［5］Ma M,Sha J,Zhou Z,et al.Generation of patient-specific pluripotentstemcellsanddirecteddifferentiationof embryonic stem cells for regenerative medicine［J］.J Nanjing Med Univ,2008,22（8）：135-142.

［6］Mujoo K,Sharin VG,Bryan NS,et al.Role of nitric oxide signaling components in differentiation of embryonic stem cells into myocardial cells［J］.Proceed Nation Acad Sci, 2008,105（48）：18924-18929.

［7］Kouskoff V,Lacaud G,Schwantz S,et al.Sequential developmentofhematopoieticandcardiacmesoderm duringembryonicstemcelldifferentiation［J］.Proceed NationAcad Sci,2005,102（37）：13170-13175.

［8］PhillipsBW,VernochetC,DaniC.Differentiationof embryonic stem cells for pharmacological studies on adipose cells［J］.Pharmacolog Res,2003,47（4）：263-268.

［9］KoayEJ,AthanasiouKA.Hypoxicchondrogenic differentiation of human embryonic stem cells enhances cartilage protein synthesis and biomechanical functionality［J］.Osteoarthritis&Cartilage,2008,16（12）：1450-1456.

［10］CorralesCE,PanL,LiH,etal.Engraftmentand differentiation of embryonic stem cell-derived neural progenitor cells in the cochlear nerve trunk：Growth of processes into the organ of corti［J］.J Neurobiol,2006,66（13）：1489-1500.

［11］Aoki H,Hara A,Motohashi T,et al.Iris as a recipient tissue for pigment cells：organized in vivo differentiation of melanocytesandpigmentedepitheliumderivedfrom embryonic stem cells in vitro.［J］.Developmental Dynamics, 2008,237（9）：2394-2404.

［12］KimD,DresslerGR.Nephrogenicfactorspromote differentiation of mouse embryonic stem cells into renal epithelia［J］.J Am Soci Nephrol Jasn,2005,16（12）：3527-3534.

［13］Wang Z,Ge J,Huang B,et al.Differentiation of embryonic stem cells into corneal epithelium［J］.Sci China,2005,48（5）：471-480.

［14］HaoJ,ZhuW,ShengC,etal.Humanparthenogenetic embryonic stem cells：one potential resource for cell therapy［J］.Sci China,2009,52（7）：599-602.

［15］Lee G,Kim H,Elkabetz Y,et al.Isolation and directed differentiation of neural crest stem cells derived from human embryonic stem cells［J］.Nature Biotechnology, 2007,25（12）：1468-1475.

［16］Wang SK,Komatsu Y,Mishina Y.Potential contribution of neural crest cells to dental enamel formation［J］.Biochem Biophy Res Communications,2011,415（1）：114-119.

［17］Grzesik WJ,Narayanan AS.Cementum and periodontal woundhealingandregeneration.［J］.CriticRevOral Biology Med,2002,13（6）：474-484.

［18］Foster BL,Popowics TE,Fong HK,et al.Advances in definingregulatorsofcementumdevelopmentand periodontal regeneration.［J］.Current Topics Develop Biol, 2007,78（4）：47-126.

［19］Zheng LW,Linthicum L,DenBesten PK,et al.The similarity between human embryonic stem cell-derived epithelial cells andameloblast-lineagecells［J］.InteJOralSci,2013,5（1）：1-6.

［20］Ning F,Guo Y,Tang J,et al.Differentiation of mouse embryonicstemcellsintodentalepithelial-likecellsinduced byameloblastsserum-freeconditionedmedium［J］.Biochemi BiophyResCommunications,2010,394（2）：342-347.

［21］江中明,季佩紅,劉軍,等.小鼠胚胎干細胞向成牙本質(zhì)樣細胞的誘導(dǎo)分化［J］.上?？谇会t(yī)學(xué),2006,15（6）：653-656.

［22］方廠云,翦新春.干細胞技術(shù)應(yīng)用于口腔醫(yī)學(xué)的希望與困惑［J］.醫(yī)學(xué)與哲學(xué),2005,26（2）：47-49.

［23］Takahashi K,Yamanaka S.Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors［J］.Cell,2006,126（4）：663-676.

［24］毛潤一,王璟,林云鋒.誘導(dǎo)多能干細胞研究現(xiàn)狀及展望［J］.國際口腔醫(yī)學(xué)雜志,2012,39（4）：510-512.

［25］Zhao J,Jiang WJ,Sun C,et al.Induced pluripotent stem cells：origins,applications,andfutureperspectives.［J］.J Zhejiang University Sci B,2013,14（12）：1059-1069.

［26］Cai J,Li W,Su H,et al.Generation of human induced pluripotent stem cells from umbilical cord matrix and amniotic membrane mesenchymal cells［J］.J Biolog Chemi, 2010,285（15）：11227-11234.

［27］AlipioZ,LiaoW,RoemerEJ,etal.Reversalof hyperglycemia in diabetic mouse models using inducedpluripotent stem（iPS）-derived pancreatic beta-like cells［J］. Proc NatlAcad Sci USA,2010,107（30）：13426-13431.

［28］Martinez-Fernandez A,Nelson TJ,Yamada S,et al.iPS programmedwithoutc-MYCyieldproficient cardiogenesis for functional heart chimerism［J］.Circulation Res,2009,105（7）：648-656.

［29］OdaY,YoshimuraY,OhnishiH,etal.Inductionof pluripotentstemcellsfromhumanthirdmolar mesenchymal stromal cells［J］.J Biolog Chem,2010,285（38）：29270-29278.

［30］Yan X,Qin H,Qu C,et al.iPS Cells Reprogrammed From HumanMesenchymal-LikeStem/ProgenitorCellsof Dental Tissue Origin［J］.Stem Cells&Development,2010, 19（4）：469-480.

［31］Wada N,Wang B,Lin NH,et al.Induced pluripotent stem cell lines derived from human gingival fibroblasts and periodontal ligament fibroblasts［J］.J Periodont Res,2011,46（4）：438-447.

［32］Miyoshi K,Tsuji D,Kudoh K,et al.Generation of human induced pluripotent stem cells from oral mucosa［J］.J Biosci Bioengineer,2010,110（3）：345-350.

［33］Otsu K,Kishigami R,Oikawa-Sasaki A,et al.Differentiation of induced pluripotent stem cells into dental mesenchymal cells.［J］.Stem Cells&Development,2011,21（7）：1156-1164.

［34］Arakaki M,Ishikawa M,Nakamura T,et al.Role of epithelialstem cell interactions during dental cell differentiation［J］.J BiologChem,2012,287（13）：10590-10601.

［35］CaiJ,Zhang Y,LiuP,etal.Generationoftooth-like structures from integration-free human urine induced pluripotent stem cells［J］.Cell Regen,2013,2（1）：6.

［36］程晉,侯文文,曹鴻國,等.一種嶄新的獲取多能性干細胞的技術(shù)--誘導(dǎo)多能性干細胞［J］.畜牧與獸醫(yī),2009,41（8）：101-103.

［37］成德,雷蕾,盧智娟,等.誘導(dǎo)多能干細胞（iPS）的誘導(dǎo)培養(yǎng)與鑒定［J］.生物工程學(xué)報,2010,26（4）：421-430.

［38］Lihong P,Wei W.Application of adult stem cells in neural tissue engineering［J］.Neural Regeneration Res,2006,1：557-559.

［39］金巖,賀慧霞,王亦菁,等.成體干細胞在口腔再生醫(yī)學(xué)的研究進展［J］.牙體牙髓牙周病學(xué)雜志,2004,14（10）：539-543.

［40］Ishizeki K,Fujiwara N,Nawa T.Morphogenesis of mineralized tissues induced by neonatal mouse molar pulp isografts in the spleen.［J］.Arch Oral Biolog,1989,34（6）：465-473.

［41］Yamada M,Bringas PJr,Grodin M,et al.Chemically-defined organ culture of embryonic mouse tooth organs：morphogenesis,dentinogenesis and amelogenesis［J］.J De Biologie Buccale,1980,8（2）：127-139.

［42］賀慧霞,史俊南,金巖.成體干細胞在組織工程化牙本質(zhì)牙髓復(fù)合體中的應(yīng)用研究與展望［J］.牙體牙髓牙周病學(xué)雜志,2004,14（12）：696-700.

［43］Modino SA,Sharpe PT.Tissue engineering of teeth using adult stem cells［J］.Arch Oral Biolog,2005,50（2）：255-258.

［44］習(xí)佳飛,王韞芳,裴雪濤.成體干細胞及其在再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用［J］.生命科學(xué),2006,18（4）：328-332.

［45］PeiD.Regulationofpluripotencyandreprogrammingbytranscriptionfactors［J］.JBiologChem,2009,284（6）：3365-3369.

The research of stem cell technology in tooth regeneration

2015-04-07

2015-05-11

編輯/李陽利

注：劉曉、何穎均為暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)學(xué)在讀碩士

中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院再生生物學(xué)重點實驗室開放課題資助（編號：KLRB201217）

樸正根，博士，副教授，碩士研究生導(dǎo)師；E-mail：pzg430@126.com