肖二彬

IL-9在慢性鼻-鼻竇炎合并鼻息肉患者中的檢測及意義

肖二彬1

目的探討慢性鼻-鼻竇炎合并鼻息肉（CRSwNP）患者檢測白介素9（IL-9）的臨床意義。方法選取2010年12月至2013年12月收治的116例CRSwNP患者作為實(shí)驗(yàn)組，以109例鼻中隔偏曲或鼻腔血管瘤等鼻部非炎性疾病患者作為對(duì)照組，比較兩組患者靜脈血和鼻黏膜組織中的IL-9水平。結(jié)果IL-9在CRSwNP患者血漿和鼻黏膜中的含量明顯增加，且IL-9 mRNA在鼻黏膜組織中的光密度值也明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論IL-9在CRSwNP患者高表達(dá)，可作為一個(gè)潛在的臨床檢測指標(biāo)。

白介素9；慢性鼻竇炎；鼻息肉

慢性鼻-鼻竇炎（chronic rhinosinusitis，CRS）是發(fā)生于鼻腔和鼻竇黏膜的一組慢性炎癥性疾病，包括合并鼻息肉（CRSwNP）和不合并鼻息肉（CRSsNP）兩個(gè)類型[1,2]。CRS的發(fā)生是一系列炎性細(xì)胞激活和細(xì)胞因子共同作用的結(jié)果。已有研究證明CRS患者存在過度免疫現(xiàn)象，但其具體過程尚不清楚[3]。在慢性炎癥發(fā)生發(fā)展過程中，細(xì)胞因子之間的關(guān)系錯(cuò)綜復(fù)雜，目前對(duì)CRSwNP發(fā)病中各種細(xì)胞因子的作用尚知之甚少。白介素9（interleukin-9，IL-9）作為一種促炎細(xì)胞因子，在慢性氣道炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用[4]。本研究通過測定IL-9在CRSwNP和非炎性鼻腔疾病患者中的含量，探討檢測IL-9的臨床意義。

資料與方法

1 一般資料

選取自2010年12月~2013年12月我院收治的116例CRSwNP患者作為實(shí)驗(yàn)組，109例鼻中隔偏曲或鼻腔血管瘤等鼻部非炎性疾病患者作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組男性66例，女性50例，年齡19~63歲，平均年齡（37.24±7.86）歲。對(duì)照組男性68例，女性41例，年齡19~67歲，平均年齡（38.14±7.97）歲。兩組患者年齡和性別均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），入組時(shí)均進(jìn)行前鼻鏡檢查、鼻內(nèi)鏡檢查（Lund-Kennedy評(píng)分法）、鼻竇CT掃描（Lund-Mackay評(píng)分法）和視覺模擬量表（VAS）癥狀評(píng)分。CRSwNP的診斷符合2008年版“慢性鼻-鼻竇炎診斷和治療指南”的標(biāo)準(zhǔn)[2]。所有患者均排除變應(yīng)性鼻炎[3]和哮喘[4]，也無其他慢性炎癥、近期手術(shù)外傷史和感染史，近4周未服用抗生素、免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素類藥物。

2 檢測方法

兩組患者在接受治療前采集外周靜脈血2ml并分離血漿，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA，Elabscience公司試劑盒）檢測血漿中的IL-9含量。術(shù)中實(shí)驗(yàn)組取病變明顯的鼻黏膜組織，對(duì)照組取正常鼻黏膜組織，置于—80℃的冰箱內(nèi)保存作為研究標(biāo)本。檢測時(shí)將標(biāo)本自然解凍，每份樣本稱取50mg組織用0.01 mmol/L的冰凍PBS（pH7.4）洗滌，去除液體，加0.5mL冰凍PBS并高速勻漿2min，然后在4℃條件下離心10min取上清液進(jìn)行檢測（ELISA）。所有患者取冰凍標(biāo)本300mg，利用Trizol法提取總RNA（天根生物公司試劑盒），逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA（Fermentas公司試劑盒），并對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增，測定兩組患者IL-9 mRNA在凝膠塊上的光密度值。PCR試劑盒為北京康為世紀(jì)生物公司產(chǎn)品。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析，數(shù)據(jù)資料用t檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

本研究對(duì)所有患者進(jìn)行基本病情評(píng)估，結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組的鼻內(nèi)鏡檢查評(píng)分、鼻竇CT評(píng)分和VAS癥狀評(píng)分均明顯高于對(duì)照組；血漿和鼻黏膜組織中IL-9檢測結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組的含量均明顯高于對(duì)照組；鼻黏膜組織IL-9mRNA的光密度值比較，實(shí)驗(yàn)組也明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表1）。

討論

CRS是鼻科的多發(fā)病和常見病，其發(fā)病率較高，有研究表明可達(dá)10%~15%[5]。目前認(rèn)為CRS是一個(gè)多因素、多途徑、多種炎性細(xì)胞和炎性因子參與的病理生理過程，其主要病理改變?yōu)楸瓲罴?xì)胞大量增生，黏膜充血水腫，黏膜下腺體增生，分泌黏液增加，從而導(dǎo)致鼻塞、流涕、嗅覺異常和頭痛等癥狀。CRS可分為CRSwNP和CRSsNP兩種臨床類型[2]。

研究表明，多種細(xì)胞因子在CRSwNP的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，但其具體調(diào)控機(jī)制尚未完全清楚，有待進(jìn)一步研究[6,7]。趨化因子通過增加局部組織炎性細(xì)胞的浸潤，介導(dǎo)巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子參與局部炎性反應(yīng)及變態(tài)反應(yīng)[8]。自1986年有學(xué)者提出T輔助細(xì)胞分為Th1和Th2兩種亞型[9]，人們發(fā)現(xiàn)Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的失衡與很多疾病相關(guān)。研究顯示，鼻息肉組織中Th1細(xì)胞因子和Th2細(xì)胞因子的表達(dá)均比正常組織增加，并且發(fā)現(xiàn)Th2細(xì)胞因子表達(dá)的程度與疾病的嚴(yán)重度呈正相關(guān)[10,11]。

IL-9能夠促進(jìn)T淋巴細(xì)胞因子和增殖，其在CD4+T細(xì)胞的表達(dá)受IL-4和TGF-β的調(diào)節(jié)[12]。已有研究表明，IL-9與自身變態(tài)反應(yīng)的關(guān)系密切相關(guān)，特別表現(xiàn)在與支氣管哮喘的發(fā)病過程中淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞分泌IgE相關(guān)[13]。鼻竇炎是一個(gè)有大量炎性細(xì)胞和炎性因子參與的局部炎癥反應(yīng)性疾病。研究發(fā)現(xiàn)，無論是CRS還是真菌性鼻-鼻竇炎患者，病變的鼻黏膜中均有IL-9蛋白和mRNA表達(dá)增加[14]。目前認(rèn)為，IL-9作為一種炎性趨化因子，使參與慢性炎癥的炎性細(xì)胞在黏膜及黏膜下層聚集，從而使炎癥持續(xù)存在。

本研究通過測定IL-9在CRSwNP患者和其他非炎性鼻腔疾病患者血漿和鼻黏膜中的濃度，以及IL-9在鼻黏膜組織中的mRNA水平，發(fā)現(xiàn)IL-9在CRSwNP患者中的表達(dá)明顯增加，與對(duì)照組相比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示IL-9在CRSwNP發(fā)生發(fā)展中起一定作用，可作為一個(gè)潛在的臨床檢測指標(biāo)。但是，IL-9在CRSwNP的作用機(jī)制尚不清楚。有研究顯示[15,16]，Th9細(xì)胞的主要效應(yīng)因子是IL-9，而Th9細(xì)胞可由Th2細(xì)胞在TGF-β的刺激下分化而來，特異轉(zhuǎn)錄因子GATA-3在Th2細(xì)胞誘導(dǎo)分化成Th9細(xì)胞中起關(guān)鍵作用。在CRS中，Th2細(xì)胞因子的表達(dá)與疾病的嚴(yán)重度呈正相關(guān)，可能的原因是與Th2細(xì)胞轉(zhuǎn)化為Th9細(xì)胞有關(guān)，但具體作用還有待深入研究。

1 Fokkens W,Lund V,Mullol J.European position paper on rhinosinusitis and nasal polyps 2007.Rhinol Suppl, 2007,(20):1-136.

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（收稿:2015-03-12）

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2015.02.014

1 河北大學(xué)附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科（河北保定，071000）

肖二彬，副主任醫(yī)師. Email: 869195836@qq.com