【摘 要】 本文主要探討干式熒光免疫分析儀校準(zhǔn)方法，為干式熒光免疫分析儀的監(jiān)管提供技術(shù)支持。

【關(guān)鍵詞】 干式熒光免疫分析儀 校準(zhǔn)方法

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2015.10.010

1 概述

干式熒光免疫分析儀是基于光電檢測原理的免疫熒光檢測系統(tǒng)，可體外定量檢測人血清、血漿、全血或尿液中肌鈣蛋白I、N-端腦利鈉肽前體、超敏C反應(yīng)蛋白、肌紅蛋白、肌酸激酶同工酶、D-二聚體、降鈣素原、微量白蛋白等的含量，檢測結(jié)果用于臨床輔助診斷，具有檢測精度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、檢測速度快、成本低廉等特點(diǎn)，在疾病檢測、醫(yī)療保健、疫情監(jiān)測、食品檢驗(yàn)檢疫等多個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

本文通過對干式熒光免疫分析儀檢測原理的深入分析，探討干式熒光免疫分析儀的校準(zhǔn)方法，為干式熒光免疫分析儀的監(jiān)管提供技術(shù)支持，保證各參數(shù)計(jì)量性能準(zhǔn)確可靠，為人們身體健康提供保障。

2 結(jié)構(gòu)和工作原理

干式熒光免疫分析儀是通過檢測試紙條上激光激發(fā)的熒光來定量檢測標(biāo)志物。檢測系統(tǒng)由一個(gè)熒光讀數(shù)儀和檢測板組成。檢測板使用的是層析法，分析物在移動(dòng)的過程中形成免疫復(fù)合物的形式。通過檢測區(qū)域或者質(zhì)控區(qū)域的值與分析物不同的濃度獲得的定標(biāo)曲線可檢測樣本中的分析物的濃度。

3 性能指標(biāo)

3.1 外觀

（1）分析儀的外觀應(yīng)平整、色澤應(yīng)均勻、無明顯傷痕、劃痕、鋒棱、毛刺。

（2）各調(diào)節(jié)按鈕、按鍵和開關(guān)均能正常工作，連接線的接插件應(yīng)接觸良好。

（3）樣品室應(yīng)密封良好，無漏光現(xiàn)象。

（4）閱讀器應(yīng)正常工作，數(shù)字顯示清晰、完整。

3.2 性能要求

（1）測量重復(fù)性。測量重復(fù)性（CV%）≤10%。

（2）線性相關(guān)性。在相差至少一個(gè)數(shù)量級的濃度范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)（r）≥0.9。

（3）功能性。分析儀具有開機(jī)自檢功能；分析儀具有檢驗(yàn)結(jié)果輸出功能；分析儀可導(dǎo)入/導(dǎo)出文件；分析儀斷電后能存儲、記憶測試數(shù)據(jù)。

（4）噪聲。分析儀的工作噪聲應(yīng)不大于85dB。

（5）電氣安全要求。應(yīng)符合GB 4793.1-2007和YY 0648-2008的要求。

4 校準(zhǔn)方法

4.1 外觀

以目力和實(shí)際操作檢查，結(jié)果應(yīng)符合3.1的要求。

4.2 性能試驗(yàn)

4.2.1 試驗(yàn)條件

預(yù)熱時(shí)間30分鐘。

4.2.2 樣品準(zhǔn)備

（1）稀釋原濃度微球，配制以下濃度微球：0.8，0.5，0.4，0.2，0.1，0.05，0.02，0.01。

配制方法如下：

①配制0.8濃度微球：取8ul原濃度微球，加2ul純化水，混勻。

②配制0.5濃度微球：取5ul原濃度微球，加5ul純化水，混勻。

③配制0.4濃度微球：取4ul原濃度微球，加6ul純化水，混勻。

④配制0.2濃度微球：取4ul原濃度微球，加16ul純化水，混勻。

⑤配制0.1濃度微球：取9ul0.2濃度微球，加9ul純化水，混勻。

⑥配制0.05濃度微球：取10ul0.1濃度微球，加10ul純化水，混勻。

⑦配制0.02濃度微球：取2ul0.2ul濃度微球，加18ul純化水，混勻。

⑧配制0.01濃度微球：取5ul0.02濃度微球，加5ul純化水，混勻。

（2）將上述各濃度微球稀釋10倍。

（3）大卡組裝：吸水紙、NC膜貼在PVC背板上。

（4）劃線：使用噴金劃線儀將各濃度微球劃在已組裝好的大卡相應(yīng)位置，放入45℃烘箱3h后取出。

（5）切卡裝條壓板：用切割機(jī)將烘干后取出的大卡切為4mm寬度的試紙條并裝入卡殼中，使用壓板機(jī)壓緊。

4.2.3 測量重復(fù)性

4.2.4 線性相關(guān)性

不同微球測試劑盒，上機(jī)測試已知濃度的且濃度差至少為一個(gè)數(shù)量級的十個(gè)不同濃度的微球，繪制對應(yīng)曲線，其相關(guān)系數(shù)應(yīng)該滿足3.2.2的要求。

上機(jī)檢測微球線性結(jié)果

4.2.5 功能性

按說明書操作驗(yàn)證，結(jié)果應(yīng)符合3.2.3的要求。

4.2.6 噪聲

在離分析儀1m，離地1m處用聲級計(jì)（A計(jì)權(quán)網(wǎng)絡(luò)）分別測試其前、后、左、右四個(gè)方向的聲壓級，取最大值，結(jié)果應(yīng)符合3.2.4的要求。

4.2.7 電氣安全性能

按附錄A的要求進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果應(yīng)符合3.2.5的要求。

干式熒光免疫分析儀校準(zhǔn)方法的研究，為干式熒光免疫分析儀的校準(zhǔn)提供了技術(shù)依據(jù)，保證了干式熒光免疫分析儀校準(zhǔn)結(jié)果的科學(xué)性和準(zhǔn)確性，經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)證明，該校準(zhǔn)方法可為制定相關(guān)校準(zhǔn)規(guī)范奠定基礎(chǔ)。

作者簡介

萬卓，工程師，目前于沈陽計(jì)量測試院從事計(jì)量檢測工作。

（責(zé)任編輯：張曉明）