鄭召召，趙春清

（承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000）

C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因在大腸癌組織中的表達(dá)及意義

鄭召召，趙春清

（承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000）

目的研究C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因在大腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法選取50例大腸癌標(biāo)本及50例癌旁正常大腸黏膜組織進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，并分析C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因在兩者中的表達(dá)及三種基因之間相關(guān)性研究。結(jié)果（1）C-erbB-2、Bmi-1基因在大腸癌組織中的表達(dá)均明顯高于在正常大腸組織中的表達(dá)，PTEN基因在大腸癌組織中表達(dá)顯著低于在正常大腸組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）C-erbB-2、Bmi-1基因與大腸癌的淋巴轉(zhuǎn)移、分化程度、浸潤(rùn)深度、Ducks分期呈正相關(guān)，其與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展及生物學(xué)行為具有促進(jìn)作用；而PTEN基因與大腸癌的淋巴轉(zhuǎn)移、分化程度、浸潤(rùn)深度、Ducks分期呈負(fù)相關(guān)，與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展及生物學(xué)行為具有抑制作用。（3）大腸癌組織中C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因之間具有相關(guān)性，其中C-erbB-2、Bmi-1基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中成正相關(guān)；C-erbB-2、PTEN基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中呈負(fù)相關(guān)；Bmi-1、PTEN基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展中呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論C-erbB-2、Bmi-1和PTEN基因在大腸癌發(fā)生發(fā)展中起一定作用，聯(lián)合檢測(cè)可能成為預(yù)后、靶向治療的標(biāo)志物。

C-erbB-2；Bmi-1；PTEN；基因；大腸癌；免疫組化

本文引用：鄭召召,趙春清.C-erbB-2、Bmi-1及 PTEN基因在大腸癌組織中的表達(dá)與意義[J].醫(yī)學(xué)研究與教育,2015,32(3): 11-15.

大腸癌是常見(jiàn)對(duì)人類(lèi)生命健康與生活質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重威脅的惡性腫瘤，在全球所有種類(lèi)惡性腫瘤中，按發(fā)病率的高低順序進(jìn)行排列，大腸癌高居第3位[1]。近20年，大腸癌的發(fā)病率與死亡率逐年升高，且發(fā)病年齡年輕化，這引起了人們的重視[2]。研究旨在對(duì)腫瘤經(jīng)由免疫組織化學(xué)染色方法的檢測(cè)，總結(jié)出在大腸癌組織中基因C-erbB-2、Bmi-1及PTEN的表達(dá)特點(diǎn)及其規(guī)律，并進(jìn)行相關(guān)性分析，以其更深入地了解大腸癌的生物學(xué)行為，更深入地了解大腸癌的發(fā)病和轉(zhuǎn)移機(jī)制，為其檢測(cè)治療提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 材料

選擇保定市第二醫(yī)院2011年1月至2013年12月大腸癌根治術(shù)切除并經(jīng)由組織病理學(xué)證實(shí)的大腸癌組織蠟塊及正常大腸組織黏膜（距癌組織邊緣≥5 cm)蠟塊各50份，其中男性23例，女性27例； 年齡31～79歲；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者33例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者17例；按組織學(xué)分級(jí)，其中高分化23例，中分化16例，低分化為11例。按Ducks分期：A期9例，B期8例，C期29例，D期4例。所有患者術(shù)前未經(jīng)任何抗腫瘤治療，例如化療、放療及藥物等。

1.2 方法

所有石蠟塊組織經(jīng) 4μm厚連續(xù)切片。免疫組織化學(xué)SP法染色，鼠抗人C-erbB-2單克隆抗體（1∶100稀釋?zhuān)?、鼠抗人PTEN/MMACI單克隆抗體（1∶100稀釋?zhuān)?、DAB顯色試劑盒及免疫組化SP法檢測(cè)試劑盒，兔抗人多克隆抗體Bmi-1（1∶100稀釋?zhuān)?/p>

1.3 采用雙評(píng)分法

（1）根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分，染色強(qiáng)度以多數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞呈現(xiàn)的染色特性計(jì)分，設(shè)定：無(wú)色計(jì)為0分， 淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。（2）選用Thomas綜合計(jì)分法，隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡視野，（組織切片中）陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)在全部細(xì)胞數(shù)的比率平均數(shù)設(shè)定：陽(yáng)性細(xì)胞＜10%為0分，11%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，76%～100%為4分。將2個(gè)指標(biāo)的計(jì)分相加≤2分為陰性，＞2分為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。應(yīng)用χ2檢驗(yàn)處理計(jì)數(shù)資料、Spearman法處理等級(jí)相關(guān)性分析，P＜0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因的表達(dá)

基因C-erbB-2在大腸癌組織中的表達(dá)率（82%）遠(yuǎn)高于其在正常大腸組織的表達(dá)率（10%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.034，P＜0.05）； 基因Bmi-1在大腸癌組織中的表達(dá)率（74%）明顯高于其在正常大腸組織中表達(dá)率（26%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.046,P＜0.05）；基因PTEN在大腸癌組織中的表達(dá)率（32%）明顯低于其在正常大腸組織中的表達(dá)率（88%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001,P＜0.05）。

2.2 C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因表達(dá)率與大腸癌組織病理特征關(guān)系

C-erbB-2、Bmi-1基因在大腸癌組織中表達(dá)率呈現(xiàn)以下特點(diǎn)：有淋巴轉(zhuǎn)移者高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者，高分化低于低分化，浸潤(rùn)深度侵及漿膜組織中表達(dá)高于浸潤(rùn)肌層者，Ducks分期高者低于分期低者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PTEN基因在大腸癌組織中表達(dá)率呈現(xiàn)以下特點(diǎn)：有淋巴轉(zhuǎn)移者低于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者，高分化高于低分化，浸潤(rùn)深度侵及漿膜組織中表達(dá)低于浸潤(rùn)肌層者， Ducks分期高者高于分期低者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1—3。

表1 C-erbB-2的表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系

表2 Bmi-1的表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系

表3 PTEN的表達(dá)與大腸癌臨床病理特征的關(guān)系

2.3 C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因之間相關(guān)性

大腸癌組織中C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因之間具有相關(guān)性，其中C-erbB-2、Bmi-1基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中成正相關(guān)（r=0.316，P=0.026）；C-erbB-2、PTEN基因大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中呈負(fù)相關(guān)（r=-0.571，P=0.000）；Bmi-1、PTEN基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)中呈負(fù)相關(guān)（r=-0.571，P=0.000），見(jiàn)表4—6。

表4 C-erbB-2與Bmi-1基因相關(guān)性

表5 C-erbB-2與PTEN基因相關(guān)性

表6 Bmi-1與PTEN基因相關(guān)性

3 討論

3.1 C-erbB-2基因與大腸癌相關(guān)研究結(jié)論

C-erbB-2基因是一種處于人類(lèi)基因順序排列位點(diǎn)中17號(hào)染色體q11-22的基因片段[3]，產(chǎn)物為單鏈跨膜糖蛋白P185，具有促使細(xì)胞按其正常規(guī)律生長(zhǎng)及分化的功能[4]。本研究發(fā)現(xiàn)C-erbB-2在大腸癌組織中的表達(dá)率（82%）遠(yuǎn)高于其在正常大腸組織的表達(dá)率（10%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.034，P＜0.05）；其中有淋巴轉(zhuǎn)移者高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者， 高分化低于低分化，浸潤(rùn)深度侵及漿膜組織中表達(dá)高于浸潤(rùn)肌層者，Ducks分期高者低于分期低者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。有關(guān)報(bào)道顯示，C-erbB-2癌基因既與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[5]，在大腸癌癌變，癌細(xì)胞增殖等過(guò)程中發(fā)揮著極為重要的作用，又與腫瘤的局部浸潤(rùn)、癌細(xì)胞的遷移、腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)[6]。本研究結(jié)論與之相符，可作為大腸癌表達(dá)及惡性程度的一項(xiàng)基因指標(biāo)。

3.2 Bmi-1基因與大腸癌相關(guān)研究結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)基因Bmi-1在大腸癌組織中的表達(dá)率（74%）高于其在正常大腸組織中表達(dá)率（26%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.046）。其表達(dá)率呈現(xiàn)以下特點(diǎn)：有淋巴轉(zhuǎn)移者高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者， 高分化低于低分化，浸潤(rùn)深度侵及漿膜組織中表達(dá)高于浸潤(rùn)肌層者，Ducks分期高者低于分期低者，這與相關(guān)報(bào)道[7]結(jié)論一致。

3.3 PTEN基因與大腸癌相關(guān)研究結(jié)論

PTEN基因：位于10q23.3，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為515kb mRNA， 其屬于PTP（protein tyrosine phosphatases）基因家族成員[8]。本研究發(fā)現(xiàn)PTEN基因在大腸癌組織中的表達(dá)率（32%）明顯低于其在正常大腸組織中的表達(dá)率（88%）（P=0.001）。在大腸癌組織中表達(dá)率特點(diǎn)為：有淋巴轉(zhuǎn)移者低于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移者，高分化高于低分化，浸潤(rùn)深度侵及漿膜組織中表達(dá)低于浸潤(rùn)肌層者， Ducks分期高者高于分期低者。PTEN基因可以通過(guò)轉(zhuǎn)錄合成來(lái)控制一種特異蛋白質(zhì)產(chǎn)物，通過(guò)調(diào)控細(xì)胞分裂周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)阻止不受控制的細(xì)胞生長(zhǎng)，進(jìn)而達(dá)到限制腫瘤形成的結(jié)果[9]，支持以上研究結(jié)論。

3.4 相關(guān)性分析

大腸癌組織中C-erbB-2、Bmi-1及PTEN基因之間具有相關(guān)性，其中C-erbB-2、Bmi-1基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中成正相關(guān)（r=0.316，P=0.026）；C-erbB-2、PTEN基因大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中呈負(fù)相關(guān)（r=-0.571，P=0.001）； Bmi-1、PTEN基因在大腸癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)中呈負(fù)相關(guān)（r=-0.571，P=0.000）。聯(lián)合檢測(cè)C-erbB-2、Bmi-1和PTEN基因是判斷大腸癌生物學(xué)行為的重要指標(biāo)，對(duì)評(píng)估預(yù)后及指導(dǎo)術(shù)后化療或進(jìn)行靶向治療具有一定的臨床意義。

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（責(zé)任編輯：高艷華）

Expression of C-erbB-2,Bmi-1 and PTEN gene in colorectal carcinoma and its clinical signifcance

ZHENG Zhaozhao1,ZHAO Chunqing2
(Chengde Medical Colloage,Chengde 066000,China)

ObjectiveTo study expression of C-erbB-2,Bmi-1 and PTEN gene in colorectal carcinoma and its clinical significance.Methods50 cases of colorectal carcinoma tissues and 50 cases of adjacent normal colorectal mucosa were detected by immunohistochemical method,and the expression of C-erbB-2,Bmi-1 and PTEN gene in the study of the correlations and three genes were examined.Results(1) The expression of C-erbB-2,Bmi-1 gene in colorectal cancer tissues were signifcantly higher than the expression in normal colorectal tissues,the expression of PTEN gene in colorectal carcinoma was significantly lower than the expression in normal colorectal tissues,the difference was statistically signifcant.(2) C-erbB-2,Bmi-1 gene in colorectal cancer and lymph node metastasis,degree of differentiation,depth of invasion,Ducks stage were positively correlated,and the incidence of colorectal cancer,the development and biological behavior had a role.While PTEN gene in colorectal cancer and lymph node metastasis,degree of differentiation,depth of invasion,Ducks staging were negatively related with colorectal cancer,the occurrence,development andbiological behavior of inhibitory effect.(3) There was a correlation between C-erbB-2,Bmi-1 and PTEN genes in 3 colorectal cancer tissues,where C-erbB-2 and Bmi-1 genes in the development of colorectal cancer was related to the occurrence and development process.C-erbB-2 and PTEN genes of colorectal carcinoma was negatively correlated.Bmi-1 and PTEN gene in colorectal cancer development was negatively correlated.ConclusionC-erbB-2,Bmi-1 and PTEN gene in the occurrence play a role in the development of colorectal cancer,combined detection may be a prognostic marker and targeted therapy.

C-erbB-2; Bmi-1; PTEN; gene; colorectal cancer; immunohistochemistry

10.3969/j.issn.1674-490X.2015.03.003

R73

A

1674-490X(2015)03-0011-05

2015-03-27

鄭召召（1986—），女，河北石家莊人，在讀碩士。

趙春清（1964—），男，河北保定人，主任醫(yī)師，教授，碩士，碩士生導(dǎo)師，主要從事基因在胃腸癌中的表達(dá)相關(guān)研究。E-mail: Zhaochunqing2010@163.com