范惠霞， 鄧志鵬， 王福文， 徐曉婷， 姚慶強(qiáng)*

（1.山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，山東濟(jì)南250062；2.濟(jì)南大學(xué)山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山東濟(jì)南250022；3.山東省罕少見病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東濟(jì)南250062）

刺五加注射液在正常大鼠與腦缺血-再灌注損傷疾病大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)比較

范惠霞1，2，3， 鄧志鵬1，3， 王福文1， 徐曉婷1，2，3， 姚慶強(qiáng)1，3*

（1.山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，山東濟(jì)南250062；2.濟(jì)南大學(xué)山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，山東濟(jì)南250022；3.山東省罕少見病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東濟(jì)南250062）

目的比較刺五加注射液 （紫丁香苷、刺五加苷E、異嗪皮啶等）在正常大鼠與腦缺血-再灌注損傷大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)行為。方法采用longa法建立大鼠局灶性腦缺血-再灌注損傷疾病模型，采用液相色譜-串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜法測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血漿中紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶的含有量，用藥代動(dòng)力學(xué)軟件DAS 2.0非房室模型計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)并用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行比較。結(jié)果與正常大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)相比較，腦缺血-再灌注損傷對(duì)刺五加注射液中紫丁香苷產(chǎn)生蓄積，對(duì)異嗪皮啶的消除發(fā)生改變，對(duì)刺五加苷E無影響。結(jié)論初步推測(cè)腦缺血-再灌注損傷大鼠體內(nèi)，紫丁香苷及異嗪皮啶與血漿蛋白結(jié)合能力發(fā)生改變，有待進(jìn)一步研究。

腦缺血-再灌注損傷；大鼠；五加注射液；紫丁香苷；刺五加苷E；異嗪皮啶；藥動(dòng)學(xué)

刺五加注射液是刺五加經(jīng)過提取制得的滅菌注射液，在我國(guó)臨床用于治療心腦血管疾病已經(jīng)多年，主要用于肝腎不足所致的短暫性腦缺血發(fā)作、腦動(dòng)脈硬化、腦血栓形成、腦栓塞等。紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶是刺五加的主要活性成分，也是刺五加注射液發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，具有廣泛的藥理活性［1-4］。研究表明，刺五加提取物可減緩大鼠大腦海馬趾CA1區(qū)神經(jīng)死亡，減弱腦缺血-再灌注引起的COX-2，GFAP及OX-42因子的活化，實(shí)現(xiàn)對(duì)腦缺血大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用［5］。此外，刺五加苷B、E可通過抑制iNOS活性，減少一氧化氮生成，減少缺血性神經(jīng)元凋亡［6］。上述研究表明，紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶可能在刺五加注射液治療缺血性腦血管疾病時(shí)發(fā)揮重要作用。

目前，已有文獻(xiàn)報(bào)道刺五加注射液中紫丁香苷、刺五加苷E在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究［7-8］。然而，該研究主要局限于正常大鼠體內(nèi)，對(duì)病理狀態(tài)大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究未見報(bào)道。為進(jìn)一步明確刺五加注射液的藥動(dòng)學(xué)，更好地指導(dǎo)臨床用藥，本課題組對(duì)刺五加注射液中3個(gè)主要活性成分在腦缺血-再灌注損傷大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為進(jìn)行研究，比較刺五加注射液中主要有效成分在正常大鼠及腦缺血-再灌注損傷大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為差異。

1 儀器與試藥

1.1 試藥與試劑 紫丁香苷 （LPZ022）、刺五加苷E（LPC031）、異嗪皮啶 （LPQ069）、牡荊苷（內(nèi)標(biāo)物質(zhì)LPM041），均購(gòu)自沈陽(yáng)瀧浦科技有限公司，純度＞98%；刺五加注射液 （批號(hào)20120112，規(guī)格250 mL/支，黑龍江烏蘇里江制藥有限公司），并采用高效液相色譜法測(cè)定其中紫丁香苷、刺五加苷E、異嗪皮啶的質(zhì)量濃度，結(jié)果分別為139.9、126.6、13.6μg/m L。色譜級(jí)甲醇（美國(guó)TEDIA公司）；色譜級(jí)乙腈（美國(guó)Burdick&Jackson公司）；其他試劑均為分析純 （國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；水為娃哈哈純凈水。新鮮大鼠空白血漿為本實(shí)驗(yàn)自制。

1.2 儀器 Agilent1200高效液相色譜儀、Agilent 6410三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀 （美國(guó)安捷倫公司）；氮?dú)鉂饪s儀 （北京普利泰科技儀器有限公司）；TGL-16G高速臺(tái)式離心機(jī)、SK-1快速混勻器渦流混懸儀 （常州澳華儀器有限公司）；KQ5200型超聲波清洗儀 （昆山市超聲波儀器有限公司）。

1.3 動(dòng)物 雄性健康Sprague-Dawley大鼠，體質(zhì)量220～250 g，由山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào) SCXK（魯）2011-0003。實(shí)驗(yàn)前于本室動(dòng)物房飼養(yǎng)10 d，給藥前禁食12 h，自由飲水。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 大鼠腦缺血-再灌注損傷模型的建立 12只大鼠隨機(jī)分為模型組與正常組。模型組大鼠參照l(shuí)onga［9］法，用2.5%戊巴比妥鈉（25 mg/kg）腹腔注射麻醉，使其在手術(shù)臺(tái)仰臥固定，切開頸部正中皮膚，鈍性分離出右頸總動(dòng)脈及分支和頸內(nèi)、外動(dòng)脈，穿線結(jié)扎頸外動(dòng)脈，進(jìn)而分離并結(jié)扎頸內(nèi)動(dòng)脈進(jìn)耳分支。在頸總動(dòng)脈 （近內(nèi)、外頸動(dòng)脈分叉處）上作一小切口，由此沿頸內(nèi)動(dòng)脈插入一根頭端加工成圓珠狀 （直徑＜0.30 mm）尼龍線，插入約17 mm（由頸內(nèi)、外動(dòng)脈分叉處起算），用縫線固定尼龍線，造成局灶性大腦中動(dòng)脈梗塞，記錄梗塞時(shí)間。該模型成功的標(biāo)志為大鼠蘇醒后出現(xiàn)同側(cè)Homer征和對(duì)側(cè)以前肢為重的偏癱。2 h后輕輕提拉出插線，實(shí)現(xiàn)對(duì)缺血腦組織的再灌注，結(jié)扎殘端并逐層縫合肌肉、皮膚。

2.2 給藥及血樣采集 模型組大鼠實(shí)現(xiàn)再灌注后立即經(jīng)尾靜脈注射刺五加注射液（10 mL/kg），正常組大鼠按同等劑量給藥。分別于給藥后2、5、10、15、20、30、40、60、90、120、150、180 min眼底靜脈叢取血約300μL，置于肝素抗凝管中。經(jīng)8 000 r/min離心5 min，取上清液，置于-20℃冷凍保存待測(cè)。

2.3 測(cè)定條件

2.3.1 色譜條件 Diamonsil C18色譜柱（4.6mm× 150 mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇（A相）-0.1%甲酸水溶液 （B相），梯度洗脫（0～4.0 min，A相20%～70%；4.0～12.0 min，A相70%）；體積流量0.6 mL/min；進(jìn)樣量20μL，柱溫30℃。

2.3.2 質(zhì)譜條件 采用電噴霧離子源 （ESI），多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM），正負(fù)離子同時(shí)監(jiān)測(cè)；紫丁香苷、刺五加苷E、異嗪皮啶及牡荊苷 （內(nèi)標(biāo)）的監(jiān)測(cè)離子對(duì)分別為m/z 395.0/232.0、765.1/765.1、223.0/162.0、431.0/311.1，優(yōu)化的碎裂電壓分別為150、150、135、150V；碰撞能量分別為20、0、25、20 eV；毛細(xì)管電壓 （±）4.0 kV；干燥氣體積流量10 L/min；干燥氣溫度325℃；霧化氣壓力35 psi；碰撞氣為高純氮?dú)猓瑝毫?.15MPa。

2.4 血漿樣品的處理 50μL血漿樣品，依次加入50μL內(nèi)標(biāo)溶液 （1.0μg/mL），50μL乙腈作為沉淀試劑，渦流混合1 min，于1.2×104r/min條件下離心5 min，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2.5 方法學(xué)考察

2.5.1 線性關(guān)系考察 取7份180μL的空白血漿，置離心管中并加入不同質(zhì)量濃度梯度混合對(duì)照品溶液 （紫丁香苷、刺五加苷E質(zhì)量濃度為30.0、100.0、300.0、1 000.0、3 000.0、10 000、30 000 ng/m L，異嗪皮啶質(zhì)量濃度為10.0、30.0、100.0、300.0、1 000.0、3 000.0、10 000 ng/mL）各20μL，制成含有紫丁香苷、刺五加苷E質(zhì)量濃度為3.0、10.0、30.0、100.0、300.0、1 000、3 000 ng/m L；異嗪皮啶質(zhì)量濃度為1.0、3.0、10.0、30.0、100.0、300.0、1 000 ng/mL的含藥血漿樣品。將含藥血漿按 “2.4”項(xiàng)下樣品處理方法處理并進(jìn)樣測(cè)定。以目標(biāo)化合物與內(nèi)標(biāo)化合物峰面積之比y為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣質(zhì)量濃度x（ng/m L）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，權(quán)重因子選擇1/x2。

2.5.2 精密度與準(zhǔn)確度 取18份空白血漿180μL，分為3組，每組6樣本。向每組中分別加入3種不同質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液 （紫丁香苷、刺五加苷 E質(zhì)量濃度為 100.0、1 000.0、27 000 ng/mL；異嗪皮啶質(zhì)量濃度為 300.0、3 000.0、9 000 ng/mL）20μL，制成含有紫丁香苷、刺五加苷E質(zhì)量濃度為10.0、100.0、2 700 ng/mL；異嗪皮啶質(zhì)量濃度為3.0、30.0、900 ng/mL的低、中、高3種質(zhì)量濃度質(zhì)控血漿樣品。將質(zhì)控血漿樣品按 “2.4”項(xiàng)下樣品處理方法處理，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算日內(nèi)精密度 （RSD）。如此操作，連續(xù)測(cè)定3 d。計(jì)算日間精密度。綜合上述測(cè)定結(jié)果，計(jì)算準(zhǔn)確度（RE）。

2.5.3 回收率 按 “2.5.2”項(xiàng)下制備含有紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶的低、中、高3種質(zhì)量濃度質(zhì)控血漿樣品各3份。將質(zhì)控血漿樣品按“2.4”項(xiàng)下處理方法處理，進(jìn)樣測(cè)定記錄峰面積（用A表示）；取50μL大鼠空白血漿9份，分為3組，每組3樣本，分別加入100μL乙腈沉淀蛋白，取全部上清液經(jīng)氮?dú)獯蹈?。分別向每組加入低、中、高3種質(zhì)量濃度 （紫丁香苷、刺五加苷E質(zhì)量濃度為10.0、100.0、2 700 ng/mL；異嗪皮啶質(zhì)量濃度為3.0、30.0、900 ng/mL）的混合對(duì)照品溶液50μL，內(nèi)標(biāo)50μL，乙腈50μL。經(jīng)超聲、渦流、離心后，取上清液進(jìn)樣分析，記錄被分析物及內(nèi)標(biāo)的峰面積（用B表示）；另取50μL純水9份，分為3組，每組3樣本，加入100μL乙腈渦流離心，氮?dú)獯蹈伞７謩e依次加入低、中、高3種質(zhì)量濃度混合對(duì)照品溶液50μL，內(nèi)標(biāo)溶液50μL，乙腈50μL，經(jīng)超聲、渦流、離心后，取上清液進(jìn)樣測(cè)定，記錄被分析物及內(nèi)標(biāo)的峰面積 （用C表示）。計(jì)算A/B，得目標(biāo)化合物及內(nèi)標(biāo)的回收率；計(jì)算A/C比值，得基質(zhì)效應(yīng)。

2.6 血藥濃度的測(cè)定及數(shù)據(jù)處理 參照血漿樣品處理方法處理，采用測(cè)定條件依法測(cè)定，按當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)內(nèi)的血藥濃度。所得血藥濃度采用DAS 2.0軟件進(jìn)行擬合，擬合得到的參數(shù)采用SPSS 17.0組間t檢驗(yàn)進(jìn)行比較，以P＜0.05為顯著性差異判斷標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)果

3.1 色譜行為 大鼠空白血漿、空白血漿加目標(biāo)化合物的對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)及正常大鼠、模型大鼠給藥后血漿的色譜圖如圖1。由圖可知，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾目標(biāo)化合物及內(nèi)標(biāo)化合物的測(cè)定。

圖1 紫丁香苷、刺五加苷E、異嗪皮啶及內(nèi)標(biāo)牡荊苷的色譜圖Fig.1 MRM chromatogram s of syringin，eleutheroside E，isofraxidin，and vitexin

3.2 方法學(xué)考察

3.2.1 線性范圍及最低定量下限 以目標(biāo)化合物與內(nèi)標(biāo)化合物峰面積之比y為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣質(zhì)量濃度x（ng/mL）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，紫丁香苷、刺五加苷E、異嗪皮啶線性回歸方程分別為y= 0.001 30 x+0.002 25（r=0.996 2）；y= 0.007 48 x+0.007 59（r=0.995 1）；y= 0.000 89 x+0.003 67（r=0.999 4）。紫丁香苷、刺五加苷 E及異嗪皮啶分別在3.00～3 000、3.00～3 000、1.00～1 000 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。目標(biāo)化合物的最低定量下限為3.00、3.00、1.00 ng/mL。

3.2.2 精密度與準(zhǔn)確度 低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度下，紫丁香苷日內(nèi)RSD≤7.3%，日間RSD≤14.4%；刺五加苷E日內(nèi)RSD≤8.2%，日間RSD≤11.5%；異嗪皮啶日內(nèi)RSD≤6.4%，日間RSD≤10.5%。3種質(zhì)量濃度下紫丁香苷RE≤ 6.0%，刺五加苷E RE≤8.6%，異嗪皮啶RE≤10.1%，表明該方法日內(nèi)、日間精密度及準(zhǔn)確度良好，滿足方法學(xué)要求。

3.2.3 回收率及基質(zhì)效應(yīng) 低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度下，紫丁香苷的提取回收率分別為 （82.5± 7.3）%、（82.3±4.5）%、（84.5±2.3）%；刺五加苷E的提取回收率分別為 （70.3±5.9）%、（70.8±2.6）%、（73.7±2.8）%；異嗪皮啶的提取回收率分別為 （81.2±14.3）%、（80.8± 4.3）%、（83.3±2.1）%；內(nèi)標(biāo)化合物的提取回收率為 （88.0±6.8）%。表示回收率良好，滿足樣品測(cè)定要求。血漿基質(zhì)對(duì)各質(zhì)量濃度項(xiàng)下目標(biāo)化合物具有微弱的離子增強(qiáng)效應(yīng)，但均小于 （109.5± 4.3）%，對(duì)內(nèi)標(biāo)牡荊苷具有微弱的離子抑制作用，為（90.9±1.9）%。

3.3 藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 正常大鼠及模型組大鼠尾靜脈注射刺五加注射液后，紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶的藥-時(shí)曲線見圖2。擬合得到的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表1。得到的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)通過SPSS 17.0組間t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。在疾病模型大鼠體內(nèi)，紫丁香苷的藥-時(shí)曲線下面積［AUC（0→∞）］為 （979.5±224.3）（μg·h）/L，較正常大鼠體內(nèi)（692.7±71.5）（μg·h）/L顯著增大；清除率 （CL）為 （1.5±0.3） （L·kg）/h，較正常組顯著減??；半衰期 （t1/2）為 （0.7± 0.4）h，與正常組保持一致。異嗪皮啶AUC（0→∞）為（26.3±7.8） （μg·h）/L；CL為（5.5±1.6）（L·kg）/h，與正常組無顯著性差異；t1/2（0.17±0.06）h，較正常組（0.11±0.01）h顯著延長(zhǎng)。刺五加苷E在疾病模型大鼠體內(nèi)的AUC（0→∞）為 （1 421.9±360.5）（μg·h）/L；CL為（0.9±0.3）（L·kg）/h；t1/2為 （0.7±0.5）h，與正常組相比無顯著性差異。

圖2 刺五加注射液中紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶在正常大鼠及腦缺血-再灌注損傷大鼠體內(nèi)的半對(duì)數(shù)血藥濃度-時(shí)間曲線Fig.2 Sem i-logarithm ic concentration-time curves for syringin，eleutheroside E，and isofraxidin in norm al and model（cerebral ischem ia-reperfusion）rats

表1 紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶的在正常組大鼠及模型組大鼠體內(nèi)的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Tab.1 M ain pharm acokinetics parameters for syringin，eleu theroside E，and isofraxidin in normal and model rats

4 討論

為考察刺五加注射液在腦缺血-再灌注損傷疾病大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)行為，必須選擇與臨床接近的動(dòng)物模型。大腦中動(dòng)脈閉塞造成的局灶性腦缺血是臨床常見的缺血性腦血管疾病［10］。本研究采用改良Longa法，使用尼龍魚線閉塞大鼠大腦中動(dòng)脈建立局灶性腦缺血模型，缺血2 h后恢復(fù)血流灌注。該方法操作簡(jiǎn)單易行，避免開顱，動(dòng)物損傷小，為后續(xù)的藥代動(dòng)力學(xué)研究奠定良好的基礎(chǔ)。

本實(shí)驗(yàn)采用LC-MS/MS法對(duì)血漿樣品中3個(gè)目標(biāo)化合物進(jìn)行定量。質(zhì)譜采用電噴霧離子源和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式，通過對(duì)目標(biāo)化合物及內(nèi)標(biāo)化合物進(jìn)行全掃描、子離子掃描，確定紫丁香苷、異嗪皮啶及內(nèi)標(biāo)化合物的監(jiān)測(cè)離子對(duì)分別為m/z395.0/232.0、223.0/162.0、431.0/311.1。將刺五加苷E進(jìn)行全掃描，選擇豐度較高的［M+Na］+（m/z 765.1）峰作為刺五加苷E的母離子，對(duì)母離子做子離子掃描時(shí)發(fā)現(xiàn)，無論施加多大碎裂電壓及碰撞能量，仍難以裂解，因而同時(shí)選用m/z765.1的離子作為刺五加苷E的子離子，確定其監(jiān)測(cè)離子對(duì)為765.1/765.1。

藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果顯示，刺五加注射液中紫丁香苷及異嗪皮啶在疾病模型大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為發(fā)生改變，刺五加苷E的藥動(dòng)學(xué)行為與正常大鼠體內(nèi)保持一致。3個(gè)有效成分在疾病模型大鼠及正常大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)差異，是其在大鼠體內(nèi)分布、代謝及排泄過程綜合作用的結(jié)果。由半對(duì)數(shù)血藥濃度-時(shí)間曲線圖可以看出，較正常組，紫丁香苷在腦缺血疾病模型大鼠體內(nèi)發(fā)生蓄積，而異嗪皮啶在模型大鼠體內(nèi)的消除發(fā)生改變。研究顯示，紫丁香苷及異嗪皮啶可與血漿蛋白結(jié)合［11-12］實(shí)現(xiàn)其在大鼠體內(nèi)的分布及轉(zhuǎn)運(yùn)。初步推測(cè)腦缺血-再灌注損傷大鼠體內(nèi)，紫丁香苷及異嗪皮啶與血漿蛋白結(jié)合能力發(fā)生改變，從而使紫丁香苷及異嗪皮啶在疾病大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)行為發(fā)生改變。另有研究表明［13-15］，腦缺血-再灌注損傷使得大鼠體內(nèi)某些代謝酶的活性降低，生物膜轉(zhuǎn)運(yùn)能力下降，也可能是造成紫丁香苷及異嗪皮啶在模型大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為差異的原因。靜脈注射給藥后，紫丁香苷及異嗪皮啶主要經(jīng)尿液排泄，而腦缺血再灌注損傷引起血液流經(jīng)腎的血流量減少，可能使得兩目標(biāo)化合物經(jīng)尿液排泄減少，因而推測(cè)可能造成紫丁香苷及異嗪皮啶藥動(dòng)學(xué)行為的改變［16］。至于病理狀態(tài)下機(jī)體對(duì)紫丁香苷及異嗪皮啶的處置機(jī)制及過程，有待進(jìn)一步研究。

該項(xiàng)研究表明，藥物在疾病狀態(tài)機(jī)體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為發(fā)生改變。對(duì)臨床應(yīng)用而言，病理狀態(tài)下獲得的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)對(duì)于指導(dǎo)臨床用藥更有意義。本實(shí)驗(yàn)以紫丁香苷、刺五加苷E及異嗪皮啶3種不同結(jié)構(gòu)的活性成分為指標(biāo)，初步探索刺五加注射液在腦缺血-再灌注損傷疾病大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為，為刺五加注射液臨床安全用藥提供理論依據(jù)。

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Com paring pharmacokinetics of Acanthopanax Injection in normal and cerebral ischem ia-reperfusion rats

FAN Hui-xia1，2，3， DENG Zhi-peng1，3， WANG Fu-wen1， XU Xiao-ting1，2，3， YAO Qing-qiang1，3*
（1.Institute of Materia Medica，Shandong Academy of Medical Sciences，Jinan 250062，China；2.Schoolof Medicineand Life Sciences，University of Jinan and Shandong Academy of Medical Science，Jinan 250022，China；3.Key Laboratory of Rareand Uncommon Diseases of Shandong Province，Jinan 250062，China）

AIMTo compare the pharmacokinetics of the normal and the cerebral ischemia-reperfusion rats given Acanthopanax Injection（syringin，isofraxidin，and eleutheroside E）intravenously.METHODSLonga method was for establishing the ratmodel with cerebral ischemia-reperfusion；high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（LC-MS/MS）was for determination of the contents of syringin，isofraxidin，and eleutheroside E in rat plasma.The pharmacokinetic parameters and statistics were obtained through DAS 2.0 and SPSS softwares processing，respectively.RESULTSWhile eleutheroside E remained unchanged between the two groups，gradual in vivo syringin accumulation and elimination change of isofraxidin were observed in cerebral ischemia reperfusion rats，but not in normal rats.CONCLUSIONWe speculate from the study that the syringin and isofraxidin somehow combine with plasma proteins，but further study is needed.

cerebral ischemia-reperfusion；syringin；eleutheroside E；isofraxidin；pharmacokinetics

R969.1

：A

：1001-1528（2015）06-1215-07

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.06.013

2014-02-18

范惠霞（1988—），女，碩士，從事藥物分析研究。Tel：13156371500，E-mail：fan.hui.xia@163.com

*通信作者：姚慶強(qiáng) （1965—），男，博士，研究員，碩士生導(dǎo)師，從事天然藥物化學(xué)與藥物分析研究。Tel：（0531）82919960，E-mail：yao_imm@163.com