王艷，李孟欣，韓靜，黃明麗，陳婷，康云輝，解繼勝

（右江民族醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院，廣西 百色 533000 E－mali：1264326144＠qq.com）

葛根素是葛根的主要活性成分之一，與大豆甙元結(jié)構(gòu)極其相似，化學(xué)名為4，7－二氫基－8β－D 葡萄糖基異黃酮，其化學(xué)結(jié)構(gòu)與雌激素相似，能發(fā)揮雌激素樣效應(yīng)，但其優(yōu)點(diǎn)在于較雌激素毒不良反應(yīng)小。近年來，國內(nèi)外對(duì)葛根素在骨方面的研究日益上升。本文試圖運(yùn)用文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)和知識(shí)圖譜方法，分析我國十余年來葛根素對(duì)骨的研究成果，展望未來研究趨勢(shì)。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源 檢索中國 知網(wǎng)（http：／／www.cnki.net／）期刊文獻(xiàn)，按高級(jí)檢索“葛根素與骨”進(jìn)行檢索，時(shí)間跨度為2005年1月1日～2014年12月31日。

1.2 研究方法 ①采用利于人們挖掘、分析的網(wǎng)絡(luò)工具Pajek繪制科學(xué)知識(shí)圖譜，將最前沿領(lǐng)域或?qū)W科制高點(diǎn)知識(shí)和信息，以可視化的圖像直觀地展現(xiàn)出來。②論文引文頻次和下載頻次分析比較。一般說來，引文頻次多的論文，以及下載頻次多的論文，一定程度上反映該文獻(xiàn)的影響力。③根據(jù)科學(xué)共同體理論，研究方向相同的作者匯聚集成一個(gè)知識(shí)群，然后由共同的研究?jī)?nèi)容確定知識(shí)群的研究主題。

2 研究結(jié)果

2.1 檢索基本情況 共檢索到155篇文獻(xiàn)。來源數(shù)據(jù)庫為中國學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)絡(luò)出版總庫（104篇），特色期刊（2篇），中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫（32篇），中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫（9 篇），中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫（6篇），國際會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫（2篇）。按學(xué)科分類，絕大多數(shù)屬于“中藥學(xué)（108 篇）”，占總數(shù)的69.68%；其次為“內(nèi)分泌腺及全身性疾?。?4篇）”“中醫(yī)學(xué)（10篇）”；發(fā)表相關(guān)論文較多的機(jī)構(gòu)是南京中醫(yī)藥大學(xué)（10篇）、右江民族醫(yī)學(xué)院（7篇）、鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院（7篇）、鄭州大學(xué)（7篇）；獲基金資助排在前面的是國家自然科學(xué)基金（12篇）、廣西科學(xué)基金（7篇）、四川省衛(wèi)生廳科研基金（3篇）、江蘇省普通高校自然科學(xué)研究計(jì)劃（3篇）、廣東省中醫(yī)藥管理局基金（3篇）、中國工程物理研究院聯(lián)合基金（3篇）。

2.2 年度論文發(fā)表 自2005年1 月份起，葛根素對(duì)骨的影響研究受到關(guān)注，2006年出現(xiàn)躍升，2007年開始逐年上升并于2012年升至最高（23篇），見圖1。

圖1 年度論文數(shù)量

2.3 論文引用頻次和下載頻次比較 ①論文引用頻次最多的是《葛根素的藥理作用及其臨床應(yīng)用研究進(jìn)展》（江蘇中醫(yī)藥，2009），引用次數(shù)為49次。②下載頻次最多的是《葛根素的藥理作用及其臨床應(yīng)用研究進(jìn)展》（江蘇中醫(yī)藥，2009），下載頻次為1 422次，284次／年。接下來是《葛根對(duì)原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥患者臨床癥狀及骨代謝生化指標(biāo)影響的研究》（南京中醫(yī)藥大學(xué)，2006），下載頻次為766次。③從論文的引用頻次和下載頻次來看，人們更關(guān)注葛根素的藥理作用及在骨方面影響與應(yīng)用。這與日益嚴(yán)峻的老齡化社會(huì)情況相符，通過研究葛根素對(duì)骨的影響，以便更好地服務(wù)于大眾。

2.4 科學(xué)共同體的知識(shí)圖譜 采用Pajek軟件，繪制知識(shí)圖譜，通過人工調(diào)整得出作者共引分析圖譜，見圖2。

圖2 葛根素對(duì)骨影響的研究知識(shí)圖譜

2.4.1 葛根素對(duì)成骨細(xì)胞的影響 研究認(rèn)為，葛根素能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化及成熟，對(duì)骨具有重要意義。骨形成的常見指標(biāo)堿性磷酸酶能反映成骨細(xì)胞的活性，臧洪敏等［1］研究發(fā)現(xiàn)葛根素能提高堿性磷酸酶活性及礦化結(jié)節(jié)形成數(shù)量。ALP 的高活性和礦化結(jié)節(jié)量的增多表明成骨細(xì)胞增殖分化加速，發(fā)揮骨形成效應(yīng)。近年來，研究顯示葛根素對(duì)成骨細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)是經(jīng)ER 途徑，由ERα和ERβ共同介導(dǎo)［2］。進(jìn)一步研究表明，葛根素調(diào)控骨相關(guān)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及相關(guān)特征性蛋白mRNA 表達(dá)，影響成骨細(xì)胞的增殖與分化，可能是葛根素抗骨質(zhì)疏松的重要細(xì)胞分子機(jī)制。①通過Wnt／β－catenin 通路及P38MAPK 來調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的分化［3］。②通過影響OPG／RANKL 基因的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化［4］。③葛根素刺激成骨細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白Smad 2／3mRNA 的表達(dá)和TGF－β1的分泌與合成，從而促進(jìn)骨形成抑制骨吸收［5－6］。與此同時(shí)，研究表明葛根素對(duì)成骨細(xì)胞有黏附作用［7］，且與葛根素濃度密切相關(guān)，成骨細(xì)胞黏附率最大時(shí)葛根素濃度為1×108，此時(shí)成骨細(xì)胞顯露其生物效應(yīng)。綜上可見，葛根素影響成骨細(xì)胞的分子機(jī)制研究已成為葛根素在骨方面應(yīng)用的理論基礎(chǔ)，亦是研究熱點(diǎn)。

2.4.2 葛根素對(duì)骨代謝的影響 在去卵巢大鼠的試驗(yàn)中，葛根素素通過不斷調(diào)節(jié)血清生化指標(biāo)，使血清鈣磷比處于合適的骨形成水平；骨鈣含量和骨密度明顯增加；血清堿性磷酸酶和骨鈣素處于較活躍的水平，從而骨的重吸收受到抑制，骨鈣代謝得到改善［8］。此外，黃彤等［9］研究顯示除葛根素使骨的高轉(zhuǎn)換狀態(tài)得到改善，骨量丟失得到抑制外，也表明此作用隨葛根素劑量的增加而增加，對(duì)劑量有一定的依賴性。近年來，有氧運(yùn)動(dòng)與葛根素的聯(lián)合對(duì)骨的影響也受到人們的關(guān)注，在有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合葛根素的實(shí)驗(yàn)中［10］，有氧運(yùn)動(dòng)與葛根素配合組大鼠較安靜組腰椎第2～4骨、股骨和脛骨骨密度提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）；指標(biāo)TNF－α、TGF－β降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.01）；指標(biāo)IL－6顯著性降低（P ＜0.05）；血清骨代謝指標(biāo)鈣、磷和堿性磷酸酶均與安靜對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），由此看出有氧運(yùn)動(dòng)配合補(bǔ)充葛根素對(duì)增加去卵巢大鼠骨密度、降低骨代謝相關(guān)指標(biāo)的水平和血清細(xì)胞因子效果顯著。葛根素通過影響骨代謝，改善骨轉(zhuǎn)換狀態(tài)，對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥狀的抑制具有正向作用。

2.4.3 葛根素對(duì)骨組織的影響 去卵巢模型組骨密質(zhì)變薄，骨細(xì)胞排列紊亂、數(shù)量變少，骨小梁稀疏纖細(xì)、存在大片斷裂的現(xiàn)象，同時(shí)鈣鹽沉積明顯降低，髓腔相對(duì)擴(kuò)大。皮下注射雌二醇和／或葛根素的大鼠與去卵巢模型組比較，均出現(xiàn)骨密質(zhì)增厚明顯，骨小梁變粗，變密，橫向聯(lián)接增加的現(xiàn)象［11］，作者進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，小劑量葛根素＋雌二醇組與葛根素組或雌二醇組相比較發(fā)現(xiàn)，骨組織和血鈣、磷和堿性磷酸酶差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。小劑量的葛根素與雌二醇聯(lián)合較單獨(dú)使用較大劑量的雌二醇或較大劑量的葛根素對(duì)去卵巢大鼠的骨質(zhì)疏松癥的治療效果相近，可以減少大量應(yīng)用雌激素的副作用，由此預(yù)見葛根素聯(lián)合雌激素對(duì)骨組織有重要影響，將為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥帶來福音。

2.4.4 其它 葛根素促進(jìn)成骨細(xì)胞增值分化的同時(shí)，也對(duì)破骨細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用。郝鵬杰等［12］報(bào)道表明1，25－（OH）2D3是一種很強(qiáng)的骨吸收刺激因子，參與破骨細(xì)胞的激活與形成過程。劉浩等［13］研究顯示葛根素不是通過減少堿性磷酸酶的形成抑制破骨細(xì)胞骨吸收，并推測(cè)其抑制1，25－（OH）2D3促破骨細(xì)胞骨吸收功能與降低Ca2＋水平有關(guān)，最佳劑量在10～50μg／L 之間，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。葛根素對(duì)骨的影響是復(fù)雜多樣的，在影響骨生成代謝的同時(shí)，也會(huì)產(chǎn)生一些不良反應(yīng)。Malaivijitnond等［14］通過給去卵巢大鼠連續(xù)14d注射0.7mg／（kg·d）葛根素，發(fā)現(xiàn)葛根素不增加子宮重量，但子宮腺體的數(shù)量有所增加，這將存在潛在危險(xiǎn)。

3 討論

知識(shí)圖譜（Mapping Knowledge Domain）是在統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)上建立科學(xué)文獻(xiàn)之間的關(guān)系，并以可視化的圖形直觀全面展現(xiàn)出來，能夠把科學(xué)計(jì)量學(xué)、計(jì)算機(jī)圖形學(xué)和機(jī)器學(xué)習(xí)等綜合起來的一種新近興起的科研方法。該方法有利于發(fā)現(xiàn)和解釋科學(xué)文獻(xiàn)中隱藏的、潛在的規(guī)律以及學(xué)科演化的路徑。

隨著我國人口進(jìn)入老齡化，骨質(zhì)疏松成為熱門話題，尤其是中老年婦女雌激素分泌逐漸降低，骨質(zhì)疏松等疾病日益增加。由于雌激素缺乏是直接誘因，所以臨床上最肯定的是雌激素替代療法，但其替代治療的風(fēng)險(xiǎn)很高，使人們把焦點(diǎn)放在從植物中提取和篩選的安全有效不良反應(yīng)少的植物雌激素上。葛根素因具有雌激素樣效應(yīng)，逐漸成為研究的熱點(diǎn)。本組研究顯示，2006年相關(guān)文獻(xiàn)量出現(xiàn)躍升，2007～2011 年平穩(wěn)上升，2012年后，相關(guān)論文發(fā)表達(dá)到最高峰，2013年維持在高水平，2014年文獻(xiàn)數(shù)量減少但是逐漸深入到分子機(jī)制的研究。隨著老齡化社會(huì)的加重，學(xué)者在葛根素對(duì)骨方面的研究日益深入，定會(huì)取得更多的研究成果。

目前，葛根素對(duì)骨影響的研究主要集中在葛根素能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖分化，還集中在葛根素通過骨質(zhì)、骨細(xì)胞的數(shù)量，骨小梁的排列，骨密度、骨強(qiáng)度以及生化指標(biāo)等影響骨代謝與骨組織等方面。從本次研究可看出，葛根素對(duì)成骨細(xì)胞的影響與葛根素對(duì)骨代謝的影響是近年來的研究熱點(diǎn)，已形成緊密聯(lián)系的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，然而，葛根素對(duì)骨的影響研究仍以增加成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性、骨代謝變化特點(diǎn)為多，關(guān)于葛根素對(duì)骨的分子機(jī)制、安全劑量、最佳劑量，以及對(duì)其它組織器官影響的深入研究報(bào)道相對(duì)較少，更安全、更有效的臨床用藥途徑仍有待深究。由此可見，葛根素在骨方面具有大的研究前景。

葛根素在骨方面的深入研究是一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)，勢(shì)必為臨床用藥帶來福音。

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