王雁勇，曹輝彩，蔡會(huì)欣，戴冬雪，馬雅文

(保定市第一中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北保定071000)

探析利用“自上而下”方法對(duì)8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)定量檢測(cè)不確定度的評(píng)估

王雁勇，曹輝彩，蔡會(huì)欣，戴冬雪，馬雅文

(保定市第一中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北保定071000)

目的通過分析8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)定量檢測(cè)不確定的評(píng)估，探析其價(jià)值與意義。方法收集本實(shí)驗(yàn)室2013年4月至9月共6個(gè)月的室內(nèi)質(zhì)量控制(簡(jiǎn)稱室內(nèi)質(zhì)控)數(shù)據(jù)及2011年至2013年6次參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心特種蛋白室間質(zhì)量評(píng)價(jià)(簡(jiǎn)稱室間質(zhì)評(píng))的結(jié)果，參照《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室——測(cè)量不確定度的評(píng)定與表達(dá)》，采用“自上而下”方法評(píng)定免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、抗鏈球菌溶血素O(ASO)、類風(fēng)濕因子(RF)、C反應(yīng)蛋白(CRP)的相對(duì)測(cè)量不確定度(ucrel)和相對(duì)擴(kuò)展測(cè)量不確定度(urel)。結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，8項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的urel存在明顯的差異，C4的urel最大為16.01%，與美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法案(CLIA'88)的允許總誤差比較，除C4外，其它7項(xiàng)指標(biāo)均處于允許范圍之內(nèi)。結(jié)論利用室內(nèi)和室間質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，采用“自上而下”方法對(duì)免疫速率散射比濁法測(cè)定特種蛋白的測(cè)量不確定度的評(píng)價(jià)，方法簡(jiǎn)單、方便，能在進(jìn)行測(cè)量不確定度評(píng)定的同時(shí)充分了解實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)分析性能，具有很好的臨床應(yīng)用價(jià)。

不確定度;評(píng)估;室內(nèi)質(zhì)量控制;室間質(zhì)量評(píng)價(jià);特種蛋白

測(cè)量不確定度是于20世紀(jì)60年代提出[1]，直到90年代其評(píng)定和表示方式才逐步得到公認(rèn)[2]。測(cè)量不確定度是表征合理地賦予被測(cè)量之值的分散性，與測(cè)量準(zhǔn)確度為負(fù)相關(guān)[3]。它是測(cè)量結(jié)果質(zhì)量的指標(biāo)。不確定度愈小，所述結(jié)果與被測(cè)量的真值愈接近，質(zhì)量越高，水平越高，其使用價(jià)值越高;不確定度越大，測(cè)量結(jié)果的質(zhì)量越低，水平越低，其使用價(jià)值也越低。在ISO17025文件中也明確提出檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需要對(duì)結(jié)果的不確定度進(jìn)行評(píng)估。

在2005年，王治國(guó)等[4]首次介紹了“自上而下”評(píng)定不確定度的方法。中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)(China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS)于2012年發(fā)表了以“自上而下”方法評(píng)定醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室不確定度的技術(shù)報(bào)告[5]?！白陨隙隆狈椒ㄊ窃诳刂撇淮_定度來源或程序的前提下評(píng)定測(cè)量不確定度，即運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)原理直接評(píng)定特定測(cè)量系統(tǒng)的受控結(jié)果的測(cè)量不確定度。典型方法是依據(jù)特定方案(正確度評(píng)估和校準(zhǔn)方案)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)、QC數(shù)據(jù)或方法驗(yàn)證試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)定，正確度/偏移(b)和精密度/實(shí)驗(yàn)室內(nèi)復(fù)現(xiàn)性[s(Rw)]是兩個(gè)主要的分量?！白陨隙隆狈椒ㄔu(píng)定測(cè)量不確定度是基于正確度和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性進(jìn)行測(cè)量不確定度評(píng)定的方法。對(duì)于常規(guī)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，“自上而下”評(píng)定測(cè)量不確定度的方法是經(jīng)濟(jì)、實(shí)用和可接受的方法。我們利用室內(nèi)質(zhì)量控制(簡(jiǎn)稱室內(nèi)質(zhì)控)和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)(簡(jiǎn)稱室間質(zhì)評(píng))數(shù)據(jù)，采用“自上而下”方法探析測(cè)量不確定度評(píng)估在8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)定量檢測(cè)中的應(yīng)用。

材料和方法

一、儀器和試劑

IMMAGE 800特種蛋白分析儀及原裝試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品由美國(guó)Beckman-Coulter公司提供。

二、數(shù)據(jù)來源

1.室內(nèi)指控?cái)?shù)據(jù)收集本實(shí)驗(yàn)室2013年4月至9月共6個(gè)月的室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，計(jì)算其靶值、標(biāo)準(zhǔn)差(s)和變異系數(shù)。

2.室間質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)收集2011年至2013年6次參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心特種蛋白室間質(zhì)評(píng)的結(jié)果，取與室內(nèi)質(zhì)控中值水平接近的公認(rèn)值(Ccons)、每個(gè)參加實(shí)驗(yàn)室的測(cè)量值(xi)及由全部能力驗(yàn)證(proficiency testing，PT)數(shù)據(jù)得出的測(cè)量復(fù)現(xiàn)性(SR)。

三、方法

1.批內(nèi)重復(fù)性將特種蛋白的室內(nèi)質(zhì)控品重復(fù)測(cè)定20次，和臨床標(biāo)本一起測(cè)定，用雙側(cè)迪克遜檢驗(yàn)法(P=95%)剔除離群值，計(jì)算其均值()、標(biāo)準(zhǔn)差(s)及批內(nèi)變異系數(shù)(CVw)。

2.批間重復(fù)性統(tǒng)計(jì)2013年4月1日至9月30日6個(gè)月內(nèi)每天檢測(cè)的8項(xiàng)特種蛋白的室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，利用儀器繪制的質(zhì)控圖分別計(jì)算其、s及批間變異系數(shù)(CVb)。

3.方法偏倚(CVbias)的計(jì)算根據(jù)王治國(guó)等[4]建議的方法，收集本實(shí)驗(yàn)室2011年至2013年參加的衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心8項(xiàng)特種蛋白6次室間質(zhì)評(píng)結(jié)果。根據(jù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的靶值和本實(shí)驗(yàn)室的測(cè)定值，計(jì)算6次結(jié)果的百分偏差(dn%)及其均值(dm%)和標(biāo)準(zhǔn)差(sdr=，根據(jù)如下公式計(jì)算出

4.相對(duì)測(cè)量不確定度(ucrel)的計(jì)算(1)ucrel的計(jì)算公式為;(2)參照文獻(xiàn)[6]建議的以6次PT結(jié)果數(shù)據(jù)作為評(píng)定測(cè)量不確定度的依據(jù)，即用PT數(shù)據(jù)作為由偏移引入的不確定度進(jìn)行合成并進(jìn)行計(jì)算，為此Nordtest提出一個(gè)新的術(shù)語(yǔ)“方法和實(shí)驗(yàn)室偏移”，符號(hào)為RMSbias。RMSrel(bias)=，公式中bias為單次PT的偏移量值，n為PT次數(shù)。urel(Cref)，其中urel(cons，i)=，式中RSDR，i為單次PT的相對(duì)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性;m為參加單次PT的實(shí)驗(yàn)室數(shù)量。ucrel(bias)為偏移引入的相對(duì)測(cè)量不確定度分量，計(jì)算公式為。(3)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)量復(fù)現(xiàn)性引入的相對(duì)測(cè)量不確定度分量urel(Rw)，計(jì)算公式為urel(Rw)=[s(Rw)/||]×100%，其中urel(Rw)=RSD(Rw);s(Rw)= u(Rw)。s(Rw)和RSD(Rw)分別為室內(nèi)質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

5.相對(duì)擴(kuò)展測(cè)量不確定度(urel)的計(jì)算對(duì)于95%的置信水平，包含因子k=2，urel=2×ucrel。

結(jié)果

一、8項(xiàng)特種蛋白室內(nèi)質(zhì)控的CVw和CVb見表1。

表1 8項(xiàng)特種蛋白室內(nèi)質(zhì)控的CVw和CVb結(jié)果

二、偏倚計(jì)算

以IgA為例，選擇與室內(nèi)質(zhì)控最接近的值計(jì)算其偏倚，結(jié)果見表2。以同樣的方法計(jì)算其它項(xiàng)目的偏倚。

表2 IgA室間質(zhì)評(píng)信息

三、8項(xiàng)指標(biāo)測(cè)量不確定度結(jié)果

以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案(CLIA'88)允許總誤差(TEa)為質(zhì)量目標(biāo)，7項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)的不確定度均符合目標(biāo)不確定度要求，外體C4不符合目標(biāo)不確定度要求，見表3。

表3 8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)測(cè)量不確定度結(jié)果

討論

誤差多數(shù)情況下是指測(cè)量誤差，它的傳統(tǒng)定義是測(cè)量結(jié)果與被測(cè)量真值之差。誤差是客觀存在的，它應(yīng)該是一個(gè)確定的值。但由于在絕大多數(shù)情況下，真值是不知道的，所以真誤差也無法準(zhǔn)確知道。我們只是在特定的條件下尋求最佳的真值近似值，并稱之為約定真值。因此可能確定的誤差只是其估計(jì)值。經(jīng)典的誤差理論并不完全適用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的實(shí)際工作，并具有一定的不確定度。測(cè)量不確定度是目前對(duì)于誤差分析最新的理解和闡述，是誤差理論發(fā)展到一定程度的產(chǎn)物。測(cè)量不確定度無須對(duì)隨機(jī)和系統(tǒng)誤差進(jìn)行分類，提供了一種包括測(cè)量真值在內(nèi)的一組測(cè)量結(jié)果范圍，表征被測(cè)量值的分散性，使檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量的衡量成為可能，可行性更高，是與測(cè)量水平密切相關(guān)的參數(shù)。楊振華[7]認(rèn)為可以考慮將經(jīng)驗(yàn)方法評(píng)定測(cè)量不確定度應(yīng)用到臨床化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。張曉紅等[8-9]依據(jù)Nordtest準(zhǔn)則，利用室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)評(píng)估臨床生化檢驗(yàn)中的測(cè)量不確定度。CNAS的技術(shù)報(bào)告也對(duì)Nordtest準(zhǔn)則建議方法進(jìn)行了詳盡的說明。

本研究利用室內(nèi)和室間數(shù)據(jù)對(duì)8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)的不確定度進(jìn)行了評(píng)估。結(jié)果顯示，7項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)的不確定度均符合目標(biāo)不確定度要求，外體C4不符合目標(biāo)不確定度要求。分析其原因，外體C4不精密度和偏倚對(duì)合成不確定度的構(gòu)成比分別為59.4%和70.4%。提示引起測(cè)量不確定度高的主要原因在于正確度較差，可以通過提高檢測(cè)項(xiàng)目的準(zhǔn)確性來降低RMSbias，減小其擴(kuò)展不確定度。由此可見，不同的檢測(cè)項(xiàng)目若要改進(jìn)其擴(kuò)展不確定度，需對(duì)分量貢獻(xiàn)的大小進(jìn)行質(zhì)量改進(jìn)。

本研究利用室內(nèi)和室間質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)對(duì)免疫速率散射比濁法檢測(cè)8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)的測(cè)量不確定度。在評(píng)估過程中我們發(fā)現(xiàn)，因?yàn)槭褂昧?個(gè)月的室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)和3年6次室間質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的不確定度進(jìn)行評(píng)定，所以能更真實(shí)地反映實(shí)驗(yàn)室每日檢測(cè)的不確定度情況，最大化地找出不確定度潛在來源的概率。

綜上所述，我們通過評(píng)估8項(xiàng)特種蛋白指標(biāo)的不確定度，發(fā)現(xiàn)了影響擴(kuò)展不確定度的主要因素，為改善臨床檢測(cè)質(zhì)量提供科學(xué)的依據(jù)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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1673-8640(2015)07-0747-03

R446.1

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.07.018

2014-12-26)

(本文編輯:龔曉霖)

王雁勇，1970年生，男，學(xué)士，副主任技師，從事臨床生化、微生物檢驗(yàn)工作。

蔡會(huì)欣，聯(lián)系電話:0312-5976674。