陳 炳，吳此玲，徐金霞，譚正鋒，陳正博，魏邦香

（榆中縣動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 榆中730100）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄動物為主的急性、熱性、高度傳染性疫病，對養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重，目前防治本病的基本方法就是注射疫苗。為了科學(xué)合理實施免疫，有效防控重大動物疫病，2014年筆者選擇中小規(guī)模養(yǎng)豬場進(jìn)行口蹄疫O 型（O ∕MYA ∕98∕BY ∕2010株）滅活苗免疫抗體消長檢測試驗，探究最佳免疫時間點，為生產(chǎn)實踐提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

高崖鎮(zhèn)樹梓溝村某養(yǎng)殖戶28日齡仔豬45頭，分三組進(jìn)行試驗。

1.2 免疫疫苗

口蹄疫O 型（O ∕MYA ∕98∕BY ∕2010株）滅活疫苗由中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)，按照疫苗說明書要求每頭注射2 mL，疫苗批號H130934J。

1.3 診斷試劑

口蹄疫抗體檢測液相阻斷ELISA 診斷試劑盒，購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.4 檢測方法

采用口蹄疫抗體檢測液相阻斷ELISA 試驗，嚴(yán)格按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行操作。

1.5 結(jié)果判定

1.5.1 試驗認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn) 每次試驗的每塊反應(yīng)板都設(shè)病毒抗原、陰、陽性血清對照。病毒抗原對照孔的OD值應(yīng)在1.0～2.0范圍內(nèi)；陽性對照抗體效價在1：1 024±1滴度以內(nèi)；陰性對照抗體效價應(yīng)﹤1∶8。

1.5.2 豬O 型口蹄疫血清學(xué)免疫抗體效價與保護(hù)力的關(guān)系 抗體效價≧1∶64，99%以上保護(hù)；﹤1∶4為不保護(hù)；1∶4～45，50%保護(hù)；農(nóng)業(yè)部規(guī)定抗體效價≧1∶64且群體免疫達(dá)到70%以上為免疫合格。

2 結(jié)果與分析

挑選母源抗體符合要求（抗體﹤1：4）的45 頭28d的仔豬注射免疫口蹄疫O 型滅活苗后，按14 d、21d、28d再強化免疫一次的方法將試驗豬分三組進(jìn)行試驗，強化免疫后7d、14d檢測免疫抗體，探究免疫抗體峰值產(chǎn)生時間，然后每月按組檢測抗體水平，探究免疫抗體水平峰值維持水平及消長期變化。

從試驗結(jié)果來看，第一組（14d強化免疫組）口蹄疫O 型滅活苗注射免疫14d后，免疫抗體合格率13.3%（2／15），強化免疫7d后抗體合格率40%（6／15），強化免疫14d后抗體合格率66.67%（10／15），第一月免疫抗體合格率66.67%，第二月免疫抗體合格率40%（6／15），第三月免疫抗體合格率13.3%（2／15）；第二組（21d強化免疫組）口蹄疫O 型滅活苗注射免疫21d 后，免疫抗體合格率33.3%（5／15），強化免疫7d后抗體合格率100%（15／15），強化免疫14d后抗體合格率100%（15／15）且抗體水平很高，第一月免疫抗體合格率93.3%，第二月免疫抗體合格率66.6%（10／15），第三月免疫抗體合格率66.6%，第四月免疫抗體合格率50%；第三組（28d強化免疫組）口蹄疫O 型滅活苗注射免疫28 d后，免疫抗體合格率100%（15／15），強化免疫7d后抗體合格率100%（15／15）且抗體水平很高，第一月免疫抗體合格率100%，第二月免疫抗體合格率100%（15／15），第三月免疫抗體合格率100%（15／15），第四月免疫抗體合格率86.66%（13／15）。

圖1 第一組抗體滴度分布圖

圖2 第二組抗體滴度分布圖

圖3 第三組抗體滴度分布圖

圖4 三組免疫抗體消長期變化曲線圖

3 討論

3.1 仔豬在出生28d首次注射免疫口蹄疫滅活疫苗后，不同時間進(jìn)行強化免疫抗體消長期變化存在明顯的差異。14d強化免疫半月后抗體合格率才能達(dá)到66.67%（10／15），抗體水平偏低且維持近一月后免疫抗體迅速消減，到第二個月后抗體合格率已降至40%；21d強化免疫時7d后免疫抗體合格率就達(dá)到了100%，14d后免疫抗體雖然達(dá)到了較高的水平，但維持時間短，抗體消減快，在出欄時豬群體免疫合格率只有50%；28d強化免疫時7d后免疫抗體水平就升到了很高的水平，高抗體水平維持近三月后才開始消減，出欄時豬群體免疫合格率還能達(dá)到86.66%。

3.2 仔豬口蹄疫滅活疫苗的注射時間很關(guān)鍵，14d強免疫時抗體水平低且消減迅速，21d強免時抗體水平升高快但維持二個月后就發(fā)生明顯的消減而達(dá)不到免疫合格標(biāo)準(zhǔn)（抗體效價≧1：64且群體免疫達(dá)到70%以上為免疫合格），28d強免時抗體水平迅速升高且抗體水平維持時間長，在豬出欄時群體免疫合格率還能達(dá)到86.66%。

3.3 斷奶仔豬注射免疫口蹄疫滅活疫苗28d后再強化免疫一次后，作為肉豬到出欄時再不需要對口蹄疫進(jìn)行免疫，留作種用的后備母豬強免第四個月時再免疫一次，以后按母豬免疫程序進(jìn)行免疫；仔豬免疫時間點十分關(guān)健，免疫時間點越是靠前抗體消減越快免疫效果越差；斷奶仔豬注射免疫口蹄疫滅活疫苗后再次強化免疫才能產(chǎn)生堅強的免疫力，從不同時間點的強化免疫的抗體消長期變化不難看出，如果不強化免疫（14d強化免疫消長期變化圖）免疫抗體在一月后消減到很低水平達(dá)不到應(yīng)有的保護(hù)作用；注射口蹄疫疫苗在動物機體沒有產(chǎn)生免疫應(yīng)達(dá)時進(jìn)行強化免疫時，起不到強免效果。

3.4 新生仔豬斷奶后注射免疫口蹄疫疫苗，一月后再強化免疫一次效果最佳；21d強化免疫時，雖然縮斷了免疫空白期，但群體免疫保護(hù)期相對較短（根據(jù)農(nóng)業(yè)部規(guī)定核算）；14d強化免疫時效果最差，一般不予提倡。

雖然經(jīng)過大量的系統(tǒng)試驗來探究仔豬最佳免疫時間點，提出了一些建議，但動物免疫工作是一個復(fù)雜的過程，制約免疫效果的因素很多，這也是動物防疫工作者的一項長期性的工作，需要不斷的探索和研究。