謝楠楠 謝小燕

血型不規(guī)則抗體即除A、B、O型系統(tǒng)外的其他抗體，它可以通過注射、母嬰血型不合妊娠等多種途徑產(chǎn)生[1]。不規(guī)則抗體不僅能引發(fā)免疫溶血性輸血反應(yīng)及增加交叉配血難度，還可以經(jīng)由胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，造成新生兒溶血病[2]。因此加強(qiáng)孕婦產(chǎn)前不規(guī)則抗體檢測具有十分重要的意義。為探討不規(guī)則抗體檢測在孕婦產(chǎn)前檢查中的價值，本研究比較分析行/不行不規(guī)則抗體檢測的孕婦新生兒溶血情況，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月～2013年1月來揭陽市人民醫(yī)院進(jìn)行產(chǎn)前檢查的200例夫婦血型不合孕婦為研究對象行不規(guī)則抗體檢測，年齡22～39歲，平均（26.7±1.4）歲，孕次 1～5 次，平均（2.3±0.3）次。溶血新生兒納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）出生后3 d內(nèi)出現(xiàn)黃疸癥狀，癥狀慢慢加重；（2）足月新生兒1～4 d內(nèi)血清總膽紅素在220.6 μmol/L以上，早產(chǎn)兒則在256.5 μmol/L以上，且2周內(nèi)沒有下降；（3）排除藥物等其他原因引發(fā)溶血病。選擇同期未行不規(guī)則抗體檢測的200例夫婦血型不合孕婦為對照組。2組孕婦在年齡、妊娠情況等方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義，有可比性。

1.2 方法

1.2.1 準(zhǔn)備工作 （1）設(shè)備及試劑。不規(guī)則抗體檢測中應(yīng)用的設(shè)備及試劑包括離心機(jī)、漩渦混合器、抗A/B抗體、凝聚胺介質(zhì)試劑、巰基乙醇應(yīng)用液（0.2 mol/L）、標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞及廣譜抗人球蛋白等。（2）血液標(biāo)本準(zhǔn)備。①夫婦2人均分別采取凝血、抗凝血4 mL和2 mL，其中抗凝血和抗凝劑混合均勻；②于37℃環(huán)境中孵育至凝血45～60 min，離心血清備用；③利用抗凝血生理鹽水清洗3次，配制紅細(xì)胞懸液（濃度為3%～5%）；④酶處理紅細(xì)胞。先準(zhǔn)備好酶溶液及抑制劑，均2 mL，A細(xì)胞懸液及B細(xì)胞懸液，均1 mL，37℃環(huán)境下孵育10 min，然后把1 mL的酶液分別加入到A、B細(xì)胞懸液中，37℃環(huán)境下處理5 min，之后利用抑制劑停止反應(yīng)，最后經(jīng)由生理鹽水清洗3次，配制酶（3%～5%）紅細(xì)胞懸液備用。

1.2.2 ABO血型及Rh血型檢測 （1）ABO血型。此類血型檢測方式包括2種：①玻片法。正定型：將抗A試劑、抗B試劑均在玻片（已標(biāo)記）上滴1滴，并把受檢者紅細(xì)胞分別滴入A、B試劑中，通過緩慢傾斜2 min讓其充足混合，若凝集提示陽性；反定型：將A紅細(xì)胞、B紅細(xì)胞試劑均在紙板（已標(biāo)記）上滴1滴，分別滴入1滴受檢者血清，混合觀察凝集情況。②試管法。于做好標(biāo)記的2支試管中分別滴入1滴抗A、B試劑，隨后把1滴受檢者紅細(xì)胞懸液加入2支試管中，然后進(jìn)行離心，速率為3400轉(zhuǎn)/min，離心1 min，觀察凝集情況。（2）Rh血型定型。采取玻片法，把1滴抗D滴在玻片上，并于其上加入1滴受檢者紅細(xì)胞懸液，若凝集提示陽性。

1.2.3 不規(guī)則抗體檢測 于3支試管中均加入2滴血清、1滴分型細(xì)胞、700 μL低離子介質(zhì)及2滴凝聚胺，然后進(jìn)行離心，3400轉(zhuǎn)/min，離心1 min，去掉上清，在3支試管中分別加入2滴重懸液，輕輕晃動觀察凝集情況，若凝集提示不規(guī)則抗體陽性。另外對于血型為Rh陰性血的孕婦來說，還要進(jìn)行抗人球蛋白檢查，以確定不規(guī)則抗體檢查結(jié)果。

1.2.4 IgG抗A/B效價測定 采取酶法測定方式，選取受檢者血清50 μL、2-Me應(yīng)用液50 μL，將其封閉，于37℃環(huán)境下孵育15 min，然后加入700 μL生理鹽水進(jìn)行稀釋。選擇1∶32、1∶42、1∶128、1∶256 4 管，在其中加入 1 滴應(yīng)酶處理紅細(xì)胞A/B，37℃環(huán)境下孵育 7 min，離心 1 min，3400轉(zhuǎn)/min，若效價在1∶64及以上提示陽性。對于孕婦血型為“O”、丈夫血型“AB”來說，行IgG抗A及抗B效價測定；對于夫婦血型相符者來說，則不用行IgG抗A/B效價測定。另外，對IgG抗A/B效價在1∶64及以上的孕婦進(jìn)行臨床干預(yù)。

1.3 觀察指標(biāo) 對200例受檢者不規(guī)則抗體檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。觀察和統(tǒng)計2組孕婦新生兒溶血病發(fā)生情況，包括溶血病發(fā)病率、新生兒血清總膽紅素濃度等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 對本組研究的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。計量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體檢出情況 200例受檢孕婦中，IgG抗A/B效價在1∶64及以上者103例，占51.5%；IgG抗A/B效價在1∶64以下者97例，占48.5%。不規(guī)則抗體檢測陽性12例，占6.0%；陰性188例，占94.0%。

2.2 2組新生兒溶血病發(fā)生情況比較 對照組200例孕婦新生兒溶血病發(fā)生30例（15.0%），受檢組新生兒溶血病發(fā)生8例（4%），2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=14.074，P＜0.05）。2組新生兒血清總膽紅素濃度比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=11.589，P＜0.05）。見表 1。

表1 2組新生兒溶血病發(fā)生情況比較［n（%）］

3 討論

近年來，血型不合引發(fā)的新生兒溶血病在臨床上比較常見，主要原因包括以下幾點(diǎn)：（1）母嬰血型不合，母體紅細(xì)胞缺乏胎兒紅細(xì)胞中含有的某種血型抗原，當(dāng)這種血型抗原經(jīng)由胎盤進(jìn)入母體后，會對母體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫性抗體[3]。（2）母體通過輸血等方式或天然存在于胎兒紅細(xì)胞血型抗原對應(yīng)的抗體，這些抗體經(jīng)由胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，與紅細(xì)胞出現(xiàn)反應(yīng)，導(dǎo)致其紅細(xì)胞被破壞，進(jìn)而出現(xiàn)溶血病[4]。溶血病主要表現(xiàn)為黃疸、貧血、血清總膽紅素濃度較高等，嚴(yán)重時導(dǎo)致新生兒智力下降[5]。因此，產(chǎn)前及時的進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測對預(yù)防新生兒溶血病具有十分重要的意義。

相關(guān)報道稱母體為“O”型血、新生兒為“A”型時，新生兒溶血病發(fā)生率比新生兒B型高，這是因?yàn)樘杭t細(xì)胞A位點(diǎn)比B位點(diǎn)多[6]。本研究中，200例孕婦經(jīng)不規(guī)則抗體檢測，檢出IgG抗A/B效價在1∶64及以上高達(dá)51.5%，不規(guī)則抗體檢測陽性率為6.0%[7-8]。對上述孕婦進(jìn)行臨床干預(yù)，結(jié)果顯示，受檢組新生兒溶血病發(fā)生率為4.0%。明顯低于對照組的15.0%（P＜0.05），且受檢組新生兒血清總膽紅素濃度明顯低于對照組（P＜0.05）?？梢姰a(chǎn)前進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測，能及時發(fā)現(xiàn)血型抗體效價異常孕婦，給予相應(yīng)的干預(yù)處理，以降低新生兒溶血病發(fā)生率，減輕溶血程度[9]。建議孕婦在妊娠16～20周開展第1次血型抗體檢查，于30周開始第2次檢查[10]。

綜上所述，產(chǎn)前不規(guī)則抗體檢測可作為預(yù)防孕婦產(chǎn)后新生兒溶血病診斷的重要指標(biāo)之一。

[1] 王蘭芳,蔡娟.孕婦產(chǎn)前血型不規(guī)則抗體檢測1450例臨床分析[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,12（1）:69-70.

[2] 林華峰,包廣杰.孕婦血型不規(guī)則抗體檢測在新生兒溶血病預(yù)防中的意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,2（6）:764-765.

[3] 彭靜.血型不合孕婦產(chǎn)前免疫性抗體檢測對產(chǎn)后新生兒溶血病的診斷研究[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐,2013,43（19）:2538-2540.

[4] 華敏玉,姜建,洪俊.不規(guī)則抗體檢測在預(yù)測Non-ABO-HDN中的作用[J].中國輸血雜志,2014,27（3）:257-258.

[5] 李就文，陳昌達(dá)，陳超群.微柱凝膠檢測在新生兒溶血性疾病中的臨床應(yīng)用[J].中外醫(yī)療，2011,3（13）：7-8.

[6] 吳勇，吳遠(yuǎn)軍，陳寶嬋，等.紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的檢測和分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2010,7（4）：343-346.

[7] 林甲進(jìn),朱碎永.孕婦血型不規(guī)則抗體檢測在診斷非ABO-HDN中的應(yīng)用價值[J].中國婦幼保健,2009,24(11):1488-1490.

[8] 王蘭芳,蔡娟.孕婦產(chǎn)前血型不規(guī)則抗體檢測1 450例臨床分析[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,36(1):69-70.

[9] 林華峰,包廣杰.孕婦血型不規(guī)則抗體檢測在新生兒溶血病預(yù)防中的意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(6):764-765.

[10] 鐘繼生,張志強(qiáng),陳翔,等.孕婦血型不規(guī)則抗體檢測對預(yù)防新生兒溶血病HDN的臨床意義[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2014,11(20):80-81.