陳忠仁，秦 篙

(海南省海口市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科 570208)

論著·臨床研究

SP-D、CCL18、CC16在慢性阻塞性肺疾病急性加重期血清和呼氣冷凝液中的變化及臨床價值

陳忠仁，秦 篙△

(海南省?？谑腥嗣襻t(yī)院呼吸內(nèi)科 570208)

目的 探討肺表面活性蛋白D(SP-D)、肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(CCL18)、Clara細(xì)胞蛋白(CC16)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期血清和呼氣冷凝液中的變化及臨床價值。方法選擇2010年1月至2013年12月被該院收治的COPD患者62例。將62例患者按照COPD嚴(yán)重程度分為COPD急性加重期32例(A組)，COPD緩解期30例(B組)。另選擇同期在該院體檢的健康人群36例為對照組。統(tǒng)計受試者血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCL18、CC16水平，并對各指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果A組呼氣冷凝液 SP-D、CCL18水平明顯高于B組和對照組(P<0.05)，且B組SP-D、CCL18水平高于對照組(P<0.05)。A組血清SP-D、CCL18、CC16水平明顯高于B組和對照組(P<0.05)，且B組SP-D、CCL18、CC16水平高于對照組(P<0.05)。血清SP-D、CCL18水平明顯高于呼氣冷凝液(P<0.01)。呼氣冷凝液SP-D與煙齡呈正相關(guān)(r=0.298，P<0.05)，與第1秒用力呼氣容積(FEV1%pred)、1秒率[FEV1/FVC(%)]呈負(fù)相關(guān)(r=-0.318、-0.402，P<0.05)；血清SP-D與煙齡呈正相關(guān)(r=0.297，P<0.05)，與FEV1%pred、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.278、-0.298，P<0.05)；血清CC16與FEV1%pred、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.358、-0.382，P<0.05)；呼氣冷凝液SP-D、CCL18及SP-D、CCL18、血清CC16之間兩兩均呈正相關(guān)(P<0.05)；其他指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素?zé)o相關(guān)性。結(jié)論呼氣冷凝液及血清中SP-D、CCL18、CC16與COPD急性加重密切相關(guān)，監(jiān)測上述指標(biāo)可對COPD病情及預(yù)后進(jìn)行監(jiān)測與判斷。

肺疾病，慢性阻塞性；肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白質(zhì)D；肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子；Clara細(xì)胞蛋白

慢性阻塞性肺疾病(COPD)為一種慢性進(jìn)行性肺部疾病，以氣流受限為主要特征，隨著人口老齡化程度的加劇，其發(fā)病有上升趨勢[1]。預(yù)計到2020年，COPD病死率將僅次于心腦血管疾病，給社會及家庭帶來沉重負(fù)擔(dān)[2]。有研究顯示，氧化應(yīng)激、感染、炎癥及生物標(biāo)志物表達(dá)變化等多種因素與COPD的發(fā)病關(guān)系密切，在COPD進(jìn)展過程中起重要作用[3-6]。肺表面活性蛋白D(surfactant protein D，SP-D)為膠原凝集素蛋白家族成員，肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(pulmonary and activation-regulated chemokine，CCL18)、Clara細(xì)胞蛋白(clara cell protein，CC16)主要在肺中表達(dá)，研究顯示，上述指標(biāo)在肺部疾病中均存在異常表達(dá)[7]。本研究通過檢測COPD急性加重期、臨床緩解期患者及健康人群血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18、CC16水平，旨在探討SP-D、CCL18、CC16在COPD急性加重期的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至2013年12月本院收治的COPD患者62例，年齡59～85歲，中位年齡62歲。將62例患者按照COPD嚴(yán)重程度分為COPD急性加重期32例(A組)，COPD緩解期30例(B組)。另選擇同期在本院體檢的健康人群36例為對照組。3組年齡、性別、吸煙狀況、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等數(shù)據(jù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；但3組在煙齡、第1秒用力呼氣容積(FEV1%pred，以測量值占預(yù)計值的百分比表示)、1秒率[FEV1/FVC(%)]方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合COPD、COPD急性加重期、COPD緩解期的診斷標(biāo)準(zhǔn)；無嚴(yán)重肝腎疾??；近期未接受激素治療；依從性佳；患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有其他呼吸系統(tǒng)疾病者；合并免疫系統(tǒng)疾病者；職業(yè)暴露者；有精神疾病者；吸入有害氣體者；未完成研究者。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本收集 于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取受試者外周靜脈血4 mL，3 500 r/min離心10 min，上清液-80 ℃保存待測。采用德國Jaeger公司呼氣冷凝液收集裝置Ecoscreen收集呼氣冷凝液。該裝置由制冷器和呼氣冷凝液收集管路構(gòu)成，受試者呼氣時，氣體由進(jìn)氣口進(jìn)入冷凝室，再由出氣口排出，氣體在冷凝室遇冷凝集成液體。

1.2.2 指標(biāo)檢測 采用ELISA法檢測血清和呼氣冷凝液中SP-A、SP-D、CCL18、CC16等指標(biāo)，試劑盒購自于上海華大基因，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。肺功能測定在上午進(jìn)行，使用比利時Medisoft-Hyp 肺功能儀進(jìn)行檢測，檢測指標(biāo)包括：FEV1/FVC(%)和FEV1%pred。

1.2.3 統(tǒng)計指標(biāo) 統(tǒng)計受試者血清和呼氣冷凝液中SP-D、CCL18、CC16水平，并對各指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 3組呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平分析 呼氣冷凝液中CC16水平極微，幾乎檢測不到，故只對呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平進(jìn)行了檢測。檢測結(jié)果顯示，A組呼氣冷凝液 SP-D、CCL18水平明顯高于B組和對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且B組SP-D、CCL18水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平比較

2.2 3組血清中SP-D、CCL18、CCL16水平分析 檢測結(jié)果顯示，A組血清SP-D、CCL18、CC16水平明顯高于B組和對照組(P<0.05)，且B組SP-D、CCL18、CC16水平高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 3組血清中SP-D、CCL18、CC16水平比較

2.3 血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平分析 對血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平進(jìn)行比較，血清SP-D、CCL18水平明顯高于呼氣冷凝液，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

表3 血清、呼氣冷凝液中SP-D、CCL18水平比較

2.4 各指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI的相關(guān)性分析 對呼氣冷凝液SP-D、CCL18，血清SP-D、CCL18、CC16等指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，呼氣冷凝液SP-D與煙齡呈正相關(guān)(r=0.298，P<0.05)，與FEV1%pred、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.318、-0.402，P<0.05)；血清SP-D與煙齡呈正相關(guān)(r=0.297，P<0.05)，與FEV1%pred、FEV1/FVC(%)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.278、-0.298，P<0.05)；血清CC16與FEV1%pred、FEV1/FVC(%)負(fù)相關(guān)(r=-0.358、-0.382，P<0.05)；呼氣冷凝液SP-D、CCL18與血清SP-D、CCL18、CC16之間兩兩均呈正相關(guān)(P<0.05)；其他指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素?zé)o相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

COPD是一種慢性全身性疾病，發(fā)病原因復(fù)雜，與多種因素相關(guān)，如吸煙、年齡、遺傳、炎癥等因素均可引起COPD[7]。COPD以氣流受限為特征，同時伴有氣道、肺組織等呼吸系統(tǒng)慢性炎性反應(yīng)，因此C反應(yīng)蛋白、IL等炎性介質(zhì)可作為COPD診斷、治療的參考指標(biāo)，但上述指標(biāo)在評判COPD嚴(yán)重程度方面效果欠佳[8-11]。新近研究發(fā)現(xiàn)，SP-D、CCL18、CCL16等指標(biāo)在COPD發(fā)病機(jī)制中起重要作用，與COPD的發(fā)病、進(jìn)展及嚴(yán)重程度相關(guān)[12-18]。Kelly等[3]研究發(fā)現(xiàn)，與健康人群相比，COPD患者血清CCL18水平明顯較高，且COPD急性加重期患者血清CCL18表達(dá)明顯增強(qiáng)。本研究顯示，COPD患者血清CCL18水平高于健康人群，且COPD急性加重期患者血清CCL18水平高于COPD緩解期患者，檢測呼氣冷凝液中CCL18亦有相似發(fā)現(xiàn)，與相關(guān)文獻(xiàn)基本一致。提示CCL18在不同嚴(yán)重程度COPD患者呼氣冷凝液及血清中表達(dá)狀況存在差異，因此可以作為COPD嚴(yán)重程度及預(yù)后評判的參考指標(biāo)。

SP-D為肺源性的膠原凝素，近年來研究發(fā)現(xiàn)其在一些慢性疾病的發(fā)病及進(jìn)展中起重要作用[11-15]。Liu等[11]研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者血清中SP-D表達(dá)水平明顯高于健康人群，且COPD在急性加重時SP-D表達(dá)水平可明顯增強(qiáng)。Güzel等[12]報道，COPD患者血清SP-D比基線水平高出95%以上時，COPD急性加重的發(fā)病風(fēng)險明顯增加。本研究顯示，COPD患者血清、呼氣冷凝液中SP-D水平明顯高于健康人群，且在COPD急性加重期，SP-D在血清、呼氣冷凝液中的表達(dá)強(qiáng)度高于COPD緩解期。與相關(guān)文獻(xiàn)報道基本一致。提示血清、呼氣冷凝液中SP-D可作為COPD急性加重風(fēng)險的預(yù)測指標(biāo)。COPD急性加重時血清、呼氣冷凝液中SP-D表達(dá)增強(qiáng)主要與COPD急性加重期患者炎性反應(yīng)加重、缺氧反應(yīng)明顯、肺泡毛細(xì)血管通透性增強(qiáng)等因素有關(guān)，上述因素可引起機(jī)體血清、呼氣冷凝液中SP-D表達(dá)增強(qiáng)。

CC16可抑制炎癥介質(zhì)的表達(dá)，因此具有較強(qiáng)的抗炎作用，且可拮抗外源性蛋白的抗原性。MacNee[5]研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者血清CC16檢測水平明顯高于健康人群，且COPD病情惡化時機(jī)體血清CC16水平明顯升高，即血清CC16水平與COPD病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。本研究顯示，COPD患者血清、呼氣冷凝液中CC16水平均明顯高于健康人群，且在COPD急性加重時，血清、呼氣冷凝液中CC16水平亦明顯上升，與文獻(xiàn)報道基本一致。COPD急性加重期患者受炎癥、氧化應(yīng)激、感染等因素影響，機(jī)體肺泡-毛細(xì)血管通透性明顯加強(qiáng)，進(jìn)而導(dǎo)致CC16表達(dá)增強(qiáng)，并釋放入血液及其他組織中，繼而引起機(jī)體血清、呼氣冷凝液中CC16水平明顯升高。

本研究對呼氣冷凝液SP-D、CCL18，血清SP-D、CCL18、CC16等指標(biāo)與年齡、煙齡、肺功能、BMI等因素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，呼氣冷凝液、血清中SP-D與煙齡呈正相關(guān)(P<0.05)，與肺功能呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清CC16與肺功能呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；呼氣冷凝液SP-D、CCL18與血清SP-D、CCL18、CC16之間兩兩均呈正相關(guān)(P<0.05)。吸煙是導(dǎo)致COPD和使其病情惡化的最常見危險因素，肺功能檢測中的FEV1%pred、FEV1/FVC(%)可反映COPD病情嚴(yán)重程度及預(yù)后情況，因此呼氣冷凝液、血清中SP-D、CC16與肺功能的相關(guān)性及上述指標(biāo)之間的相關(guān)性結(jié)果表明，上述指標(biāo)對監(jiān)測COPD病情具有重要意義。

與呼氣冷凝液比較，血清SP-D、CCL18、CC16的表達(dá)受諸多因素干擾。肝臟、淋巴結(jié)等器官組織均可表達(dá)SP-D、CCL18、CC16，因此SP-D、CCL18、CC16檢測結(jié)果受肺外器官SP-D、CCL18、CC16的表達(dá)狀況影響。而呼氣冷凝液中SP-D、CCL18、CC16隨呼出氣冷凝而成，檢測特異性高，受影響的因素較少，能可靠地反映肺部SP-D、CCL18、CC16水平的變化，結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠。

本研究不足之處是入組對象較少、規(guī)模較小，在一定程度上可能影響研究的結(jié)果和精確性。因此，仍然需要更大規(guī)模的臨床研究進(jìn)一步驗證。

綜上所述，呼氣冷凝液和血清中的SP-D、CCL18、CC16等指標(biāo)與COPD急性加重密切相關(guān)，監(jiān)測上述指標(biāo)可對COPD病情及預(yù)后進(jìn)行監(jiān)測與判斷。

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Change and clinical value of SP-D,CCL18 and CC16 in serum and in exhaled breath condensate in acute exacerbation of COPD

ChenZhongren,QinGao△

(DepartmentofRespiratoryMedicine,HaikouPeople′sHospital,Haikou,Hainan570208,China)

Objective To study the change and clinical value of SP-D,CCL18 and CC16 in serum and in exhaled breath condensate in acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease.Methods Sixty two cases of COPD patients admitted in our hospital from 2010 January to 2013 December were selected as the research object.All the 62 patients were divided into group A(32 patients with COPD in acute exacerbation) and group B(30 patients with COPD in remission stage) in accordance with the severity of COPD.Thirty six cases of health people were selected as the control group.Statistical subjects SP-D,CCL18,CC16 content in serum and in exhaled breath condensate,and the relations between the various indexes and age,smoking,pulmonary function and BMI were analyzed.Results The exhaled breath condensate SP-D,CCL18 content in group A was significantly higher than that of B group and the control group (P<0.05),and the SP-D,CCL18 in group B was higher than that in control group (P<0.05).The serum SP-D,CCL18,CC16 content in group A was significantly higher than that of B group and the control group (P<0.05),and the SP-D,CCL18,CC16 in group B was higher than that in control group (P<0.05).Serum SP-D,CCL18 levels were significantly higher than those in the exhaled breath condensate (P<0.01).Exhaled breath condensate SP-D was positively associated with smoking age (r=0.298,P<0.05),and FEV1% pred,FEV1/FVC (%) showed a negative correlation (r=-0.318,-0.402,P<0.05);the serum levels of SP-D was positively associated with tobacco (r=0.297,P<0.05),and FEV1% pred,FEV1/FVC (%) were negative correlated (r=-0.278,-0.298,P<0.05);serum CC16 and FEV1% pred,FEV1/FVC (%) were negatively correlated (r=-0.358,-0.382,P<0.05);Exhale breath condensate SP-D,condensate CCL18,SP-D,CCL18 serum,serum CC16 were are positively correlated in each two (P<0.05);and there was no significant correlation between other indexes and age,smoking,pulmonary function and BMI etc.Conclusion Exhaled breath condensate,serum SP-D,serum CCL18,exhaled breath condensate,exhaled breath condensate,serum CC16 are closely related to acute exacerbation of COPD,and monitoring the indicators can be judgment of the degree and prognosis of COPD.

pulmonary disease,chronic obstructive;pulmonary surfactant-associated protein D;pulmonary activation regulated chemokine;Clara cell protein

陳忠仁(1981-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病的研究。

△通訊作者，Tel:13807565790；E-mail:qinhe0202@sina.com。

:10.3969/j.issn.1671-8348.2015.19.016

R563.9

A

1671-8348(2015)19-2638-03

2014-12-11

2015-02-21)