史芳芳

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十二師農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，新疆烏魯木齊 830088）

生長(zhǎng)抑制劑對(duì)草莓莖尖離體保存的影響

史芳芳

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第十二師農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，新疆烏魯木齊 830088）

試驗(yàn)結(jié)果表明，培養(yǎng)基中添加濃度為1.0 mg·L-1的多效唑可保存草莓試管苗至6個(gè)月；6.0 mg·L-1脫落酸結(jié)合6℃低溫處理，可使試管苗保存20個(gè)月；2.1%的甘露醇結(jié)合6℃低溫處理，可使試管苗保存15個(gè)月。

草莓莖尖；多效唑；脫落酸；甘露醇；離體保存

為探討生長(zhǎng)抑制劑對(duì)草莓莖尖離體保存的影響，特進(jìn)行培養(yǎng)基添加多效唑、脫落酸、甘露醇3種生長(zhǎng)抑制劑對(duì)草莓紅顏試管苗生長(zhǎng)保存影響的試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)材料為紅顏草莓栽培品種，由新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)十二師農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)材料的建立

取匍匐莖的莖尖在流水下沖洗30 min，先用75%醫(yī)用酒精消毒30 s，然后再用0.1%升汞水消毒6 min，最后無菌水沖洗3～4次后剝?nèi)ネ鈱影?，將莖尖接種在MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1（pH值5.8）培養(yǎng)基上進(jìn)行芽分化培養(yǎng)，產(chǎn)生的叢生芽供試驗(yàn)用。

1.2.2 多效唑處理

采用250 m L的組培瓶，每瓶裝入附加不同濃度（0，0.1，0.3，0.5，1.0 mg·L-1）多效唑的MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培養(yǎng)基20 mL，每處理10瓶，每瓶接入5個(gè)單芽，在（25± 1）℃下每日光照14 h，光強(qiáng)1 500～2 000 lx條件下培養(yǎng)保存。

1.2.3 脫落酸處理

用250 m L的組培瓶，每瓶裝入附加不同濃度（0，0.1，0.3，0.9，2.7，4.5，6.0 mg·L-1）的MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培養(yǎng)基20 m L，每處理10瓶，每瓶接入5個(gè)單芽，在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)25～30 d后，置于低溫培養(yǎng)箱內(nèi)保存。培養(yǎng)室的培養(yǎng)條件：溫度為（25±l）℃，每日光照為14 h，光強(qiáng)為1 500～2 000 lx。低溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)條件：溫度為（6±2）℃，每日光照為15 h、光強(qiáng)為1 500～2 000 lx。保存結(jié)束后進(jìn)行繼代培養(yǎng)。

1.2.4 甘露醇處理

用250 m L的組培瓶，每瓶裝入附加不同濃度（0，0.3%，0.9%，1.8%和2.1%）甘露醇的MS +6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培養(yǎng)基20 m L，每處理10瓶，每瓶接入5個(gè)單芽，在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)25～30 d后，置于低溫培養(yǎng)箱內(nèi)保存，培養(yǎng)條件同上。保存結(jié)束后進(jìn)行繼代培養(yǎng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 多效唑的影響

由表1可知，當(dāng)保存至6個(gè)月時(shí)，對(duì)照與0.1，0.3 mg·L-1處理試管苗的根發(fā)黃，葉色黃綠（綠），而0.5，1.0 mg·L-1處理還有白色根，葉色深綠，對(duì)照成活率最低，為76%；當(dāng)保存至7個(gè)月時(shí)，對(duì)照與低濃度0.10 mg·L-1處理的芽全部死亡，而0.3，0.5，1.0 mg·L-1處理成活率分別為20%，33%和40%。

2.2 ABA的影響

2.2.1 常溫下的影響

由表2可見，當(dāng)保存7個(gè)月時(shí)，不含ABA的試管苗枯葉率為80%，隨著培養(yǎng)基中ABA含量的增加，枯葉率也隨之降低，說明ABA可延緩草莓試管苗的衰老。當(dāng)ABA濃度為6.0 mg·L-1時(shí)，枯葉率又達(dá)到70%，此時(shí)植株受到傷害，停止生長(zhǎng)。從每個(gè)月統(tǒng)計(jì)的試管苗的成活率來看，ABA濃度為4.5 mg·L-1時(shí)，保存效果最好，保存至12個(gè)月時(shí)，成活率可達(dá)88%，比對(duì)照的試管苗保存期延長(zhǎng)5個(gè)月以上。

2.2.2 低溫下的影響

由表3可見，保存到15個(gè)月，從試管苗的芽成活率及叢芽長(zhǎng)勢(shì)來看，ABA處理有利于草莓試管苗的保存，較高濃度（3.6，6.0 mg·L-1）ABA對(duì)草莓試管苗保存效果較好。在低溫下保存15個(gè)月后，試管苗轉(zhuǎn)移至常溫培養(yǎng)室中進(jìn)行再培養(yǎng)。觀察結(jié)果為：培養(yǎng)1個(gè)月后，濃度3.6，6.0 mg·L-1處理的試管苗生長(zhǎng)最好；培養(yǎng)2個(gè)月后，不含ABA的試管苗死亡，其他處理的試管苗生長(zhǎng)正常；培養(yǎng)3個(gè)月后，濃度3.6，6.0 mg·L-1處理的試管苗生長(zhǎng)較好；培養(yǎng)4個(gè)月后，0.1 mg·L-1處理的試管苗死亡；培養(yǎng)5個(gè)月后，0.3 mg·L-1處理的試管苗成活率為30%，其余處理的為100%。

表1 多效唑?qū)t顏早生草莓試管苗保存的影響

表2 ABA對(duì)不同保存時(shí)間草莓試管苗成活的影響

表3 低溫下ABA對(duì)試管苗保存效果的影響

2.3 甘露醇的影響

由表4可見，試管苗在低溫下保存到15個(gè)月時(shí)，經(jīng)甘露醇處理的試管苗成活率為100%，對(duì)照為40%，試管苗較壯。

表4 低溫下甘露醇對(duì)草莓試管苗保存效果的影響

3 小結(jié)與討論

多效唑是一種高效植物生長(zhǎng)延緩劑，在植物體內(nèi)抑制貝殼杉烯酶的活力，從而阻礙赤霉素的生物合成，使植株矮化。許多研究結(jié)果表明，多效唑可控制試管苗生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)生長(zhǎng)速度，延長(zhǎng)試管苗的保存時(shí)間。在本試驗(yàn)中，多效唑可延長(zhǎng)草莓試管苗的保存時(shí)間至6個(gè)月，這是因?yàn)槎嘈н虻囊种菩?yīng)在一定濃度范圍內(nèi)隨濃度的升高而加強(qiáng)，但高濃度的多效唑?qū)υ嚬苊缬卸竞ι踔林滤雷饔?。可見，適當(dāng)濃度的多效唑能達(dá)到壯苗的目的，但對(duì)于草莓紅顏來說，超過6個(gè)月，多效唑的加入則抑制其生長(zhǎng)。因此，多效唑應(yīng)針對(duì)不同物種適量添加。

培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)抑制物質(zhì)ABA具有調(diào)節(jié)植物發(fā)育、細(xì)胞分裂的作用，并使植物對(duì)干旱、寒冷等環(huán)境脅迫具有響應(yīng)能力，可延長(zhǎng)試管苗保存時(shí)間。本試驗(yàn)中，培養(yǎng)基中添加ABA后，常溫下試管苗的芽增殖及叢芽生長(zhǎng)明顯緩慢，根的發(fā)生也得到抑制，試管苗的保存時(shí)間得到延長(zhǎng)，濃度為4.5 mg· L-1的ABA對(duì)草莓試管苗的保存效果最好，比不添加ABA的試管苗延長(zhǎng)5個(gè)月以上，濃度為6.0 mg· L-1的ABA對(duì)草莓試管苗輕微傷害。而在低溫下，6 mg·L-1的ABA對(duì)草莓試管苗的保存效果最好，這是因?yàn)锳BA對(duì)逆境脅迫有防衛(wèi)作用，對(duì)逆境信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)?？蓡?dòng)植物體內(nèi)的應(yīng)激反應(yīng)，提高植物防御逆境因子脅迫能力。培養(yǎng)基中添加一些高滲化合物，如甘露醇，是一種常用的緩慢生長(zhǎng)保存手段。利用這一原理，甘露醇在多種植物種質(zhì)資源保存中得到應(yīng)用。研究表明，添加1%～5%甘露醇的MS培養(yǎng)基對(duì)莖尖的生長(zhǎng)有抑制作用。本試驗(yàn)中，2.1%的甘露醇結(jié)合低溫處理可使草莓試管苗種質(zhì)保存15個(gè)月，試管苗叢生芽長(zhǎng)勢(shì)最佳。

綜上分析認(rèn)為，在草莓紅顏莖尖離體保存中，培養(yǎng)基中添加ABA較多效唑、甘露醇更有利于延長(zhǎng)試管苗的保存時(shí)間。試管苗在低溫條件下保存效果比常溫下更好。

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（責(zé)任編輯：張瑞麟）

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：0528-9017（2015）10-1574-02

文獻(xiàn)著錄格式：史芳芳.生長(zhǎng)抑制劑對(duì)草莓莖尖離體保存的影響［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，56（10）：1574-1575，1657.

10.16178/j.issn.0528-9017.20151015

2015-05-05

史芳芳（1977-），女，山東昌邑人，助理研究員，碩士，從事農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣及科研工作。E-mail：451784039@qq.com。