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PRRS疫苗的安全性與豬場防疫的關(guān)系

賈志華，孟相秋，趙建增

（華威特（北京）生物科技有限公司北京100085）

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）又稱“豬藍(lán)耳病”，是由PRRS病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一種豬烈性傳染病，具有傳播速度快、傳染性強(qiáng)、流行范圍廣、長期持續(xù)存在、長期免疫抑制等特點(diǎn)。自2006年6月全國暴發(fā)的高致病性PRRS給養(yǎng)豬企業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，PRRSV的優(yōu)勢流行毒株發(fā)生了變化，致病強(qiáng)度普遍高于大疫情出現(xiàn)之前，已成為影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展的首要問題。

應(yīng)用PRRS弱毒疫苗免疫是主要的預(yù)防措施。盡管我國使用有各種PRRS弱毒疫苗，但每年仍有不同程度的PRRS暴發(fā)。近年來的實(shí)驗(yàn)室及臨床研究發(fā)現(xiàn)，使用多數(shù)PRRS疫苗后產(chǎn)生的免疫應(yīng)答不足以清除豬群的流行病毒，而流行野毒又與疫苗毒有高度親緣關(guān)系，提示傳統(tǒng)PRRS苗在安全性方面存在著一定的缺陷。本文就PRRS弱毒疫苗在使用過程中可能存在的安全隱患及新型疫苗的應(yīng)用進(jìn)行綜述，為PRRS的防控設(shè)計(jì)提供參考。

1 國內(nèi)PRRS疫苗的應(yīng)用

我國的PRRS在2006年以后以高致病性（變異）PRRS為主，PRRS滅活疫苗由于免疫效力不足且會加劇已存在的潛伏感染，目前已很少使用。但經(jīng)典毒株P(guān)RRS與變異毒株P(guān)RRS弱毒疫苗都在使用，效力差別并不明顯。

已在我國使用的PRRS活疫苗，據(jù)其遺傳學(xué)特點(diǎn)分為經(jīng)典PRRS弱毒疫苗和變異PRRS活疫苗，據(jù)疫苗毒父代病毒的分離地點(diǎn)不同又分為不同的毒株，如湖南株、江西株等，但相互間的免疫原性差異不大。

2 PRRS弱毒疫苗可能存在的安全隱患

近年來越來越多的案例表明，許多PRRS弱毒苗在使用后使種公豬精液帶毒、母豬繁殖障礙、仔豬呼吸道疾病、繼發(fā)感染增多、死亡率增多等現(xiàn)象。這些問題出現(xiàn)的時間較晚，因豬場的狀態(tài)而差異很大且隱蔽性極強(qiáng)，不易被人們注意。對于這類問題，從疫苗的生物學(xué)及臨床發(fā)生規(guī)律可分為以下幾種現(xiàn)象：

2.1疫苗直接致病

疫苗毒力相對較強(qiáng)，在有隱性感染存在的情況下，疫苗不能誘導(dǎo)有效的免疫保護(hù)，反而形成疫苗與野毒的合并感染，從而加劇臨床疾病。

2.2疫苗毒力返強(qiáng)

PRRS弱毒疫苗長期在豬群流行，變異成為高致病性毒株的機(jī)率大增，這可能是免疫豬群仍長期受PRRS困擾的潛在原因之一。Opriessnig等[1]從一個使用過Ingelvac PRRS MLV（Boehringer Ingelheim Vetmedica，Inc.）后暴發(fā)PRRS的豬場中分離出1株P(guān)RRSV（98-38803），該毒株來源于所使用的PRRS疫苗，能引起母豬流產(chǎn)和呼吸系統(tǒng)疾病，提示PRRS弱毒疫苗出現(xiàn)毒力返強(qiáng)。Nielsen等[2]的研究也證明了PRRS弱毒疫苗在田間可轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂休^高毒力的致病株，PRRSV的ORF1基因突變與毒力增強(qiáng)有關(guān)。Allende等[3]也證實(shí)，美洲型疫苗病毒可以毒力返強(qiáng)，而nsp2基因的某些位點(diǎn)突變與病毒的致病力相關(guān)。

2.3疫苗與野毒重組，形成新的毒株而維持感染

疫苗毒在豬群流行的后果之一是它與野毒株自然重組，形成新的流行強(qiáng)毒。陳煥春小組從武漢一個使用過CH-1R株疫苗豬場的病豬體內(nèi)分離到一株P(guān)RRSV，并證實(shí)其為CH-1R疫苗株與流行毒株WUH1株的自然重組體[4]。在遺傳學(xué)上，該變異株是在CH-1a和JXA1之間生出的一個獨(dú)立分支。病毒血癥持續(xù)時間和病毒載量水平分析表明，該變異株雖然比WUH1株減弱，但比CH-1a毒性強(qiáng)，更適合在豬場中長期流行。

2.4疫苗病毒通過種豬向其他豬場中擴(kuò)散

疫苗毒帶給豬場的危害可能是長遠(yuǎn)的，需要較長時間才能從臨床表現(xiàn)出來，但不能因?yàn)槲窗l(fā)現(xiàn)即時的影響，就忽視這一問題的嚴(yán)重性。童光志小組[5]最新發(fā)現(xiàn)，從江蘇一個未接種PRRS弱毒疫苗豬場的三只垂死仔豬中分離出了PRRSV，生物學(xué)鑒定及全基因組分析顯示所分離出的3株毒株均為HP-PRSSV，它們與疫苗株JXA1-80有很高的同源性（99.7%），且?guī)в蠮XA1-P80獨(dú)有的10-11個氨基酸（JXA1-P80獨(dú)有氨基酸總共只有12個）。分子遺傳學(xué)及回歸動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，它們可能是活疫苗JXA1-P80毒株的變異體，毒力得到返強(qiáng)。因此，疫苗安全性不但影響免疫豬場的生產(chǎn)，其副作用還可能波及到下游用戶。

2.5疫苗病毒能持續(xù)存在于公豬精液中導(dǎo)致其生產(chǎn)性能下降

Christopher-Hennings等[6]研究證實(shí)，公豬接種PRRS弱毒疫苗后約39 d從其精液中檢測到病毒，該疫苗毒在豬體中持續(xù)存在數(shù)周乃至數(shù)月，疫苗免疫豬精液質(zhì)量同時有所下降。鑒于人工授精技術(shù)的廣泛應(yīng)用，PRRS弱毒疫苗可通過公豬擴(kuò)散病毒及降低受孕率而影響生產(chǎn)。

3 疫苗病毒免疫抑制的特點(diǎn)

PRRSV在豬的巨噬細(xì)胞中復(fù)制，通過細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)破壞淋巴細(xì)胞，從而導(dǎo)致機(jī)體免疫功能降低，影響其他疫苗效果，可能引起繼發(fā)感染或加速其他疾病的進(jìn)程。PRRS弱毒疫苗的免疫抑制特性主要體現(xiàn)在兩方面：一是機(jī)體不能產(chǎn)生持久而高效的特異PRRS免疫力，二是其他疫苗效力受其影響而不能發(fā)揮。從PRRS免疫豬群豬瘟和偽狂犬的免疫保護(hù)情況及生產(chǎn)水平可以發(fā)現(xiàn)這一問題的重要性。

3.1接種PRRS疫苗后的豬瘟免疫狀態(tài)

豬瘟是豬的烈性傳染病，如果其免疫力不足就可能受到豬瘟病毒感染而發(fā)病乃至死亡。我國豬場普遍接種豬瘟弱毒疫苗，但實(shí)際保護(hù)率并不理想。在PRRS陽性豬場，一般給仔豬接種兩次豬瘟疫苗，但抗體應(yīng)答水平持續(xù)處于較低水平，免疫合格率在接種疫苗后有短暫提高但很快就下降，而豬群的發(fā)病與豬瘟免疫應(yīng)答低下有明顯的相關(guān)性（圖1～2，表1）。

圖2 平均豬瘟抗體水平及免疫合格率的變化

表1 PRRS免疫后豬場三大傳染病的免疫保護(hù)水平

3.2接種PRRS疫苗后偽狂犬的免疫狀態(tài)

在有PRRS存在的情況下，豬場偽狂犬gE抗體陽轉(zhuǎn)的比例極高，圖1中豬場在哺乳期間仔豬的偽狂犬野毒抗體率達(dá)到100%，提示母豬群的偽狂犬已完全失控。由于PRRS弱毒疫苗等免疫抑制因素的存在，偽狂犬免疫已受到干擾，在感染率如此高的情況下，重新對偽狂犬免疫凈化，需要數(shù)年的不懈努力才可以實(shí)現(xiàn)。

3.3接種PRRS疫苗后豬群的生產(chǎn)能力

在使用弱毒疫苗預(yù)防PRRS的豬場，存在一定程度未知原因的仔豬死亡或因病淘汰的情況。在調(diào)整疫苗后，這一狀態(tài)明顯改善，且隨著免疫水平的提高仔豬生產(chǎn)得到進(jìn)一步改善（表2）。由此可見，長期使用PRRS弱毒疫苗可能形成免疫抑制，因繼發(fā)感染率劇增而影響仔豬生長。

表2 不同水平PRRS免疫豬群的仔豬生存情況

4 對PRRS弱毒疫苗安全問題的應(yīng)對

4.1慎重選擇PRRS弱毒疫苗

PRRS弱毒疫苗確實(shí)能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生一定的免疫反應(yīng)，對豬體具有一定的保護(hù)作用。因此目前在無更好替代方法防控PRRS的情況下，需要在多個方面進(jìn)行研究，包括如何評價(jià)PRRS弱毒疫苗的效力和安全性、如何回避疫苗的生物安全風(fēng)險(xiǎn)、在PRRS陽性豬場如何通過制定和完善系統(tǒng)的防疫方案以便把PRRS的影響降到最低等?？梢钥隙ǖ氖牵煌呢i場情況不一樣，不能簡單套用別人的經(jīng)驗(yàn)。判斷PRRS疫苗的長期安全性需要在是否有疫苗毒的擴(kuò)散，是否引起接種豬的免疫抑制兩方面考慮。病毒血癥的時間長，擴(kuò)散病毒的風(fēng)險(xiǎn)就變大。公豬精液帶毒，PRRS弱毒疫苗的毒力就可能不理想。豬瘟的免疫應(yīng)答水平不理想，PRRS疫苗免疫抑制的隱患就不能簡單排除。

4.2更換PRRS弱毒疫苗時的考慮

更換PRRS弱毒疫苗時，應(yīng)使兩種疫苗接種間隔最少為一個月，以減少前一疫苗對后者的影響。同理，第一次更換PRRS弱毒疫苗一個月后，務(wù)必補(bǔ)充免疫一次，以防因個別豬只帶毒而出現(xiàn)免疫漏洞。另外有兩點(diǎn)需強(qiáng)調(diào)，第一，豬場PRRSV流行，是因?yàn)樨i的免疫力不足，如果接種新疫苗不能改變這種現(xiàn)象，更換的意義就不大。因而不建議一個場應(yīng)用不同毒株P(guān)RRS弱毒疫苗；第二，如果是多種傳染病合并感染，只改變PRRS防疫方案不能解決問題。

4.3免疫方案

由于PRRSV傳播速度快，全群同步免疫的效果最好。部分豬場為省成本，只免疫母豬而不免疫仔豬，這會給病毒傳播制造新的機(jī)會?；谕瑯拥睦碛?，除非在PRRS非常穩(wěn)定的豬場，全群一刀切的效果好于跟胎免疫。PRRS陽性豬場的仔豬在14日齡時免疫比較好，如果感染壓力大，首次免疫甚至可提前至7日齡左右。

4.4綜合防疫

在PRRS長期存在及PRRS疫苗毒流行后，許多豬群的免疫力受到不同程度的損害。其中最常見的問題是，豬瘟和偽狂犬免疫力極其脆弱，疫苗免疫效力無法充分體現(xiàn)，豬瘟和偽狂犬帶毒率趨于上升。在控制了PRRS后，這兩種免疫不足的問題依然存在，需要針對性改善。如果這兩種病毒在豬群中流行比較活躍，PRRS的防控是無法實(shí)現(xiàn)的?，F(xiàn)階段許多豬群的問題是多種問題的集合，需要針對性地系統(tǒng)解決。

5 PRRS弱毒疫苗的出路

PRRS疫苗的安全性問題存在已久，只因未得到技術(shù)突破而延緩至今。近年來的研究和應(yīng)用已在這方面看到曙光。武華小組[7]成功分離到一株自然基因缺失疫苗，其免疫抑制性被消除，對豬瘟、偽狂犬的免疫效力不再有抑制性，應(yīng)用該疫苗豬群的生產(chǎn)水平也有明顯改善。目前PRRS與豬瘟二聯(lián)弱毒疫苗已研制成功，確認(rèn)了該毒株的安全價(jià)值。在未來，找到免疫抑制相關(guān)基因并通過現(xiàn)代技術(shù)備用疫苗的免疫抑制性及其他致病性，將是開發(fā)真正安全PRRS疫苗的方向。

6 結(jié)語

疫苗散毒是關(guān)系到PRRS苗安全性的重大問題。疫苗毒在仔豬間、仔豬與母豬間形成長期循環(huán)感染、毒力不斷增強(qiáng)，最后形成臨床疾病。之所以能造成潛在危害，原因在于疫苗毒的免疫抑制特性。由于豬只免疫狀態(tài)會影響各種特異免疫力，PRRS疫苗的選擇影響系統(tǒng)的防疫安全。避免疫苗散毒、消除PRRS疫苗的免疫抑制是保證PRRS弱毒疫苗生物安全的關(guān)鍵?！觯ň庉嫞旱一郏?/p>

[1] Opriessnig T，Baker RB，Halbur PG．Use of an experimental model to test the efficacy of planned exposure to live porcine reproductive and respiratory syndrome virus．Clin Vaccine Immunol，2007，14（12）：1572-1577．

[2] Nielsen HS，Oleksiewicz MB，F(xiàn)orsberg R，et al． Reversion of a live porcine reproductive and respiratory syndrome virus vaccine investigated by parallel mutations．J Gen Virol，2001，82（Pt6）：1263-1272．

[3] Allende R，Kutish GF，Laegreid W，et al．Mutations in the genome of porcine reproductive and respiratory syndrome virus responsible for the attenuation phenotype． Arch Virol，2000，145（6）：1149-1161．

[4] Bin Li,Liurong Fang,Zuofei Xu,et al.Recombination in Vaccine and Circulating Strains of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Viruses.Emerging Infectious Diseases,2009,15: 2032-2035.

[5] Yi-feng Jiang,Tian-qi Xia,Yan-jun Zhou et al.Characterization of three porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates from a single swine farm bearing strong homology to a vaccine strain, Vet.Microbiol.2015,in press.

[6] Christopher-Hennings J，Nelson EA，Nelson JK，et al．Effects of a modified-live virus vaccine against porcine reproductive and respiratory syndrome in boars．Am J Vet Res，1997，58（1）：40-45．

[7] Leng X,Li Z,Xia M,et al.Evaluation of the efficacy of an attenuated live vaccine against highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus in young pigs.Clin Vaccine Immunol. 2012;19(8):1199-206.