摘要：豬流行性腹瀉疾病是世界上比較容易發(fā)生的疾病之一。這種病一旦發(fā)生，那將造成很嚴(yán)重的經(jīng)濟損失?，F(xiàn)在，在中國這種病的發(fā)生率依然很高，人們對這種病是非常關(guān)注和關(guān)心的。因為它對人們的生活會造成很大的影響。其實，豬流行性腹瀉疾病是一種病毒性疾病，這種病的發(fā)病率高，死亡率也高。那么本文就豬流行性腹瀉病毒的分離及間接ELISA的建立進行闡述，同時也介紹了豬流行性腹瀉疾病和這種病毒。

關(guān)鍵詞：豬流行性腹瀉病毒 分離 間接ELISA的建立

豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒引起的。這種病的主要癥狀是腹瀉，嘔吐和脫水。豬流行性腹瀉疾病是一種易感性疾病，任何年齡段的豬都易感，一年四季均可感染。豬流行性腹瀉疾病不僅會使豬本身受到損害，同時也給人們帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，這種病間接地也會影響到水資源，從而威脅到人們的健康。因此，我們必須找到一些方法來預(yù)防這種疾病的發(fā)生。那么，首先要做的就是學(xué)會一些方法將病毒進行分離，以了解它的結(jié)構(gòu)與特征，這樣可以采取一些措施來減輕該種病毒的毒性。

1.豬流行性腹瀉的簡介

1.1什么是豬流行性腹瀉病毒

豬流行性腹瀉疾病是由豬流行性腹瀉病毒引起的一種腸道傳染疾病，這種疾病發(fā)生率最高的是冬季，當(dāng)豬感染上這種疾病時，通常會表現(xiàn)為腹瀉，脫水，嘔吐以及精神沉郁。因此說，豬流行性腹瀉病毒就是能夠引起豬流行性疾病的一種傳染性病毒。這種病毒通常是從口鼻進入，作用在小腸，進而造成豬的腹瀉。

1.2豬流行性腹瀉的危害

豬流行性腹瀉疾病一旦感染了豬，尤其是仔豬，在短時期內(nèi)極容易死亡，并且死亡率也很高。這樣就直接的增加了豬的飼養(yǎng)成本，進而就會造成人們的經(jīng)濟損失。

1.3豬流行性腹瀉病毒的特點

通常來說，豬流行性腹瀉病毒具有一些特點。首先，這種病只發(fā)生在豬身上，其他動物不易感，也就是說這種病毒對宿主的選擇有特異型。其次，這種病毒的傳染性和感染性很高，它可以通過口鼻進入，然后再通過一些其他的途徑陸續(xù)的感染周圍的生活環(huán)境，進而使其它豬受到感染，這樣就會造成大片感染，從而成為流行性傳染疾病。另外，豬流行性腹瀉病毒大多發(fā)生于我國的冬季，也就是寒冷的季節(jié)，當(dāng)然我們也不排除夏季發(fā)病的可能性。豬流行性腹瀉病毒發(fā)病結(jié)果是非常嚴(yán)重，豬一旦感染上這種疾病將會影響到今后的正常生活，即使康復(fù)也會有發(fā)育不良的現(xiàn)象。如果病情嚴(yán)重，還會造成大量豬死亡。因此說這種疾病是很復(fù)雜的一種疾病，這種病毒的毒力也是很強的。

2.分離

2.1豬流行性腹瀉病毒的分離內(nèi)容

在分離之前，我們先要做好一些準(zhǔn)備，準(zhǔn)備好實驗器材，實驗材料。那么，選擇實驗材料也是很有講究的，我們需要選擇一些比較典型的病毒樣品，感染這種疾病的糞便就是非常好的實驗材料。具體的過程大體如下，在所獲取的糞便中加入一些胰蛋白酶處于室溫條件下，作用一段時間。然后將PK-15細胞單層在接種前也用同樣方法，用同樣使用量的胰蛋白酶的細胞維持液作用數(shù)分鐘，倒去細胞維持液，接入經(jīng)過處理的病毒分離物，置37℃吸附60mni后，加人細胞維持液置37℃培養(yǎng)，每天觀察細胞病變。

2.2豬流行性腹瀉病毒對于分離的結(jié)果

由于豬流行性腹瀉病毒的獨特性，所以這種病毒是很難分離的。但是，伴隨著我們對該種病毒的了解與研究，通過實驗方法發(fā)現(xiàn)，可以運用帶毒傳代法將病毒分離，然后用熒光抗體進行檢測，在第三代時就發(fā)現(xiàn)了少量的熒光顆粒，在第六代時這種顆粒就非常明顯了。

2.3對結(jié)果的分析和討論

這種方法打破了傳統(tǒng)的不能在細胞上培養(yǎng)豬流行性腹瀉病毒的觀念。實驗證明，病毒在經(jīng)過數(shù)次培養(yǎng)后，它的毒性會漸漸的減弱。根據(jù)這種特點，我們就可以使豬流行性腹瀉病毒的毒性減弱。從而，在一定程度上減輕豬流行性腹瀉疾病的發(fā)病率，減少人們的經(jīng)濟損失。

3豬流行性腹瀉病毒間接檢側(cè)ELISA的建立

3.1豬流行性腹瀉病毒間接檢測ELISA的方法

ELESA抗體的檢測方法，這種方法主要是用來檢測某一區(qū)域內(nèi)豬對流行性腹瀉病毒的抗體水平，這種方法和病毒的分離方法相同。也需要對實驗材料進行嚴(yán)格的選擇。

3.2豬流行性腹瀉病毒檢測ELISA的意義

我們通過一些實驗發(fā)現(xiàn)，ELESA檢測方法可以使檢測結(jié)果更加科學(xué)與精確。通過這種實驗方法，我們可以了解到豬對流行性腹瀉病毒的抵抗力。這樣，我們就可以采取一些好的方法來減輕豬流行性腹瀉病毒的毒性，這可以減少豬的感染率和死亡率。同時，減少人們的經(jīng)濟損失。這種檢測方法對預(yù)防豬流行性腹瀉疾病的發(fā)生有著重要的意義。

4.結(jié)語：

豬流行性腹瀉疾病在世界上具有普遍的流行性，很多豬都容易感染此病，甚至威脅到豬的生存，給人們的經(jīng)濟造成很大的損失，同時，也會威脅到人類的健康。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，我們有能力對豬流行性腹瀉病毒進行研究并加以了解，要想能夠?qū)υ擃惒《具M行研究，首先做的就是學(xué)會一些方法對豬流行性腹瀉病毒進行分離和間接檢側(cè)ELISA的建立

參考文獻：

[1]韋顯凱，侯繼波，姜平 表達豬流行性腹瀉病毒S基因片段重組腺病毒的構(gòu)建與免疫特性口 中國獸醫(yī)學(xué)報 2008

[2]董麗娜，高鳳山，許崇波，等.表達豬流行性腹瀉病毒CO「基因的重組乳酸茵的構(gòu)建與鑒定 司.畜牧獸醫(yī)學(xué)報 2008

（作者單位：150030東北農(nóng)業(yè)大學(xué)）