摘要：目的 通過對(duì)原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）患者血清中抗線粒體抗體（AMA）及其亞型和抗核抗體（ANA）的檢測(cè)，來探討AMA及其亞型和ANA與原發(fā)性膽汁性肝硬化之間的相關(guān)性[1]。方法 選取我院AMA和ANA呈陽(yáng)性的患者20例，同時(shí)以20例非PBC患者作為對(duì)照組，利用血清樣本免疫印跡技術(shù)檢查AMA及其亞型與ANA情況，并開展相關(guān)性的統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 研究組AMA與M2亞型均為陽(yáng)性，M4亞型陽(yáng)性2例，M9亞型陽(yáng)性1例；對(duì)照組AMA結(jié)果均為陽(yáng)性，M2亞型呈弱陽(yáng)性5例，M4亞型與M9亞型無(wú)陽(yáng)性；研究組ANA檢測(cè)陽(yáng)性率為85.0%，對(duì)照組為45.0%。結(jié)論 通過AMA及其亞型與ANA的檢測(cè)可以有效對(duì)PBC疑似患者進(jìn)行早期診斷，及早發(fā)現(xiàn)病情并提高治療的有效性，具有較高的臨床診斷價(jià)值。

關(guān)鍵詞：抗線粒體抗體及其亞型；抗核抗體；原發(fā)性膽汁性肝硬化

1資料與方法

1.1一般資料選取我院體檢人群、門診患者及住院患者中AMA和ANA呈陽(yáng)性的20例患者作為研究組，所有患者的肝功能生化指標(biāo)均存在改變，肝炎標(biāo)志物檢驗(yàn)呈陰性。其中，男性2例，女性18例，年齡36～64歲，平均（51.4±9.4）歲。選取20例非PBC樣本20例作為對(duì)照組，兩組間年齡、性別等基本情況無(wú)顯著差異（P>0.05），具有可比性。

1.2方法對(duì)40例樣本運(yùn)用免疫印跡技術(shù)對(duì)血清樣本中的AMA及其亞型（M2，M4與M9）行定性檢測(cè)，包括抗可溶性肝抗原/肝胰抗原、抗肝腎微粒抗體Ⅰ型、抗肝特異性胞漿抗原Ⅰ型和純化的5種不同相對(duì)分子質(zhì)量的AMA及其亞型抗原[2]。依照試劑說明來判斷結(jié)果。運(yùn)用免疫熒光技術(shù)對(duì)血清樣本中的ANA行定性和半定量檢測(cè)，依照試劑說明開展操作，細(xì)胞與組織顯現(xiàn)綠色熒光且血清稀釋度≥1：100為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有資料采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 40例樣本的AMA及其亞型檢測(cè)結(jié)果如表1所示，研究組AMA與M2亞型均為陽(yáng)性，M4亞型陽(yáng)性2例，M9亞型陽(yáng)性1例；對(duì)照組AMA結(jié)果均為陽(yáng)性，M2亞型呈弱陽(yáng)性5例，M4亞型與M9亞型無(wú)陽(yáng)性。

2.2 40例樣本的ANA檢測(cè)結(jié)果如表2所示，研究組ANA檢測(cè)陽(yáng)性率為85.0%，對(duì)照組為45.0%。

3討論

原發(fā)性膽汁性肝硬化是一種慢性進(jìn)展性膽汁淤積性疾病，主要累及中年婦女，最后發(fā)展為肝硬化、肝衰竭。1851年Addison首次報(bào)道該病，1950年Ahrens將其命名為PBC。本病主要見于中年女性，約占90%，發(fā)病年齡40~60歲多見。PBC起病隱匿，病程早期可無(wú)癥狀或僅有乏力、皮膚搔癢等不適，血清堿性磷酸酶（ALP）、γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）升高，到病程的后期，出現(xiàn)黃疸和肝、脾腫大等表現(xiàn)。臨床上PBC分為4期：肝功能正常的無(wú)癥狀期、肝功能異常期、癥狀期及失代償期。美國(guó)Mayo Clinic Center通過對(duì)PBC患者數(shù)10年的追蹤隨訪資料認(rèn)為可將前3期合稱為穩(wěn)定期，出現(xiàn)黃疸的失代償期稱為加速期。穩(wěn)定期癥狀多隱匿，有些患者可持續(xù)20年。一旦進(jìn)入加速期出現(xiàn)黃疸，病情急轉(zhuǎn)直下，從入期到死亡或需肝移植時(shí)間平均為4年，此期藥物治療遠(yuǎn)不如穩(wěn)定期。因此應(yīng)盡可能在PBC病程早期得到診斷，及時(shí)用藥，以延緩或阻滯患者進(jìn)入加速期。PBC在我國(guó)肝病患者中的檢出比例逐漸增多。

隨著對(duì)PBC研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)在90%~95%的PBC患者的血清中存在著抗線粒體抗體（AMA）。AMA分9個(gè)亞型，其中與AMA關(guān)系密切的主要是M2、M4和M9型，而M2亞型診斷PBC的特異性最高[3]，M2抗體的檢出對(duì)于PBC的診斷有一定的指導(dǎo)性意義。M4在原發(fā)性膽汁性肝硬化中的陽(yáng)性率也高達(dá)55%，有研究顯示M4可能是PBC疾病發(fā)展迅速的一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)。另外，單獨(dú)出現(xiàn)M9可能是原發(fā)性膽汁性肝硬化早期階段的指標(biāo)。本次研究對(duì)20例AMA與ANA均呈現(xiàn)陽(yáng)性患者與非PBC患者開展了免疫印跡與免疫熒光的相關(guān)檢測(cè)，結(jié)果顯示研究組AMA與M2亞型均為陽(yáng)性，M4亞型陽(yáng)性2例，M9亞型陽(yáng)性1例；對(duì)照組AMA結(jié)果均為陽(yáng)性，M2亞型呈弱陽(yáng)性5例，M4亞型與M9亞型無(wú)陽(yáng)性；研究組ANA檢測(cè)陽(yáng)性率為85.0%，對(duì)照組為45.0%。提示AMA M2型對(duì)該病的檢測(cè)具有指導(dǎo)性意義，而ANA具有輔助診斷價(jià)值。

綜上所述，PBC疾病與患者自身免疫情況具有相關(guān)性，通過對(duì)AMA及其亞型與ANA的檢測(cè)可以有效對(duì)疑似患者進(jìn)行早期診斷，能夠及早發(fā)現(xiàn)病情提高治療的有效性，具有較高的臨床診斷價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]張曉峰，劉玉平.環(huán)磷酰胺治療原發(fā)性膽汁性肝硬化的療效觀察[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013(7):2549-2550.

[2]陳飛龍，房國(guó)祥.抗線粒體抗體及相關(guān)檢測(cè)在診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化中的應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，24(3):146-147.

[3]張利方，鄭山根，閻有功，等.58例原發(fā)性膽汁性肝硬化患者自身抗體特征分析[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志，2007，23(5):471-473.編輯/哈濤