【摘要】鹽都、建湖兩養(yǎng)殖戶雞群大批死亡，有呼吸道癥狀，拉稀。剖檢喉、氣管內(nèi)有大量黏液，盲腸扁桃體出血，腺胃乳頭出血，脂肪肝，脾臟腫大，卵子明顯變性，胰臟出血，疑似新城疫病例。采集病雞的肝，腸道等病變組織。經(jīng)處理后接種10日齡非免疫雞胚，致死雞胚。取雞胚尿囊液，做HA 試驗，兩樣品均有血凝性，再用抗H5亞型禽流感病毒陽性血清、抗H9亞型禽流感病毒陽性血清和抗新城疫病毒陽性血清進行HI試驗，結(jié)果顯示僅抗新城疫病毒陽性血清對兩樣品有血凝抑制作用，說明分離到的病毒均為新城疫病毒。通過MDT實驗發(fā)現(xiàn)兩地雞群感染的新城疫病毒均為強毒株。

【關(guān)鍵詞】雞；新城疫病毒；分離；鑒定；血凝試驗；血凝抑制試驗

綜述

新城疫（ND），也稱亞洲雞瘟或偽雞瘟，是由新城疫病毒引起的一種高度接觸性傳染病，常呈敗血癥經(jīng)過，主要特征是呼吸困難，下痢，神經(jīng)癥狀，黏膜和漿膜出血，腺胃黏膜出血具有診斷意義[1]。感染雞的呼吸道、循環(huán)系統(tǒng)、胃腸道紊亂及神經(jīng)癥狀都很明顯，蛋雞可有突發(fā)性產(chǎn)蛋下降、產(chǎn)薄殼蛋或雞蛋白蛋。臨床表現(xiàn)取決于宿主的年齡及其免疫狀態(tài)、感染毒株的毒力及嗜性；一般潛伏期為5天[2]。

世界范圍內(nèi)曾經(jīng)發(fā)生過4次大規(guī)模的流行。首次大爆發(fā)源于東南亞和英國，從1926年到1960年，經(jīng)過30多年的時間，從印泥和英國傳遍了全世界。第二次大流行始于20世紀60年代，從中東迅速傳播到世界大部分國家，此次流行傳播速度較快，原因是養(yǎng)禽業(yè)已經(jīng)拓展為國際貿(mào)易，空中運輸禽類及珍禽類是此次流行的重要傳媒。第三次流行始于1974年前后，疫源地尚無定論，但由于疫苗的推廣使用，使得引起疫病流行的病毒更加復(fù)雜[3]。第四次流行始于20世紀70年代晚期，源于中東，傳染源是鴿副黏病毒I型，1981年傳至歐洲，然后迅速傳遍世界，并流傳至今[4]。特別是20世紀90年代后，該病在歐洲、亞洲許多國家發(fā)生，對養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的損失。

特別值得關(guān)注的是鵝的NDV感染，在1997年以前，幾乎沒有鵝感染NDV發(fā)病的報導(dǎo)，即使人工攻毒，水禽的發(fā)病率和致死率也較低。但自1997年以后，NDV對鵝的感染率、發(fā)病率及病死率明顯升高，造成了嚴重的經(jīng)濟損失。對于鵝NDV來源，究竟是在鵝體內(nèi)長期試用的結(jié)果，還是雞源NDV的演化，目前沒有定論，但從水禽上分離的NDV毒力變化已引起人們的關(guān)注。國外學(xué)者Rosenberger和Sbortridge分別在加拿大、香港分離出了鵝副黏病毒，國內(nèi)學(xué)者王永坤1997年在江蘇的揚州也分離到鵝副黏病毒[5]。這種最近才發(fā)生的新病，對小鵝的發(fā)病率和死亡率幾乎100%，對成年鵝的發(fā)病率也達到50%～70%，死亡率達到10%～50%。

1、病原及流行病學(xué)

新城疫病毒屬于副黏病毒科腮腺炎病毒屬，完整病毒粒子近圓形，直徑為120～130nm，有不同長度的細絲。有囊膜，在囊膜的外層呈放射狀排列的突起物或稱纖突，具有能刺激宿主產(chǎn)生抑制紅細胞凝集素和病毒中和抗體的抗原成分，病毒核酸類型為單股、負鏈、不分階段的RNA。新城疫是目前我國最常見、最普遍、危害最嚴重的禽類傳染病，歸納本病的流行趨勢有以下特點：

1）主要發(fā)生于小規(guī)模、大群體、密集型的農(nóng)戶散養(yǎng)雞群，通常雞舍簡陋、環(huán)境條件差，由于防疫意識不強、飼養(yǎng)管理不善、墊料替換不勤，在冬、春陰雨寒冷季節(jié)或夏季高溫天氣，易造成大面積流行。

2）從發(fā)病日齡來看，各種日齡的家禽都可發(fā)病，臨床病例以在15～40日齡、60～120日齡、170～330日齡等三個階段較為多見。

3）經(jīng)過多次免疫接種、抗體水平較高的雞群仍可發(fā)病，且發(fā)病率和死亡率與發(fā)病日期、新城疫毒力的強弱、飼養(yǎng)管理的優(yōu)劣、有無并發(fā)癥以及診療是否及時有關(guān)。

4）本病主要通過呼吸道和消化道感染發(fā)病，健康雞通過接觸病死雞的排泄物、分泌物、病死雞污染的飼料、飲水、墊料、空氣等傳播，病死雞是本病的主要傳染源（目前國內(nèi)大部分養(yǎng)雞場對病死雞不作科學(xué)處理是造成疾病不斷發(fā)生的重要因素）。

5）目前雖然我國各地所有雞群對新城疫采取了強化的免疫預(yù)防措施，但新城疫仍然以不同的形式在流行，因此可以說，幾乎很難說有哪一個雞群真正消滅了新城疫病毒的感染，然而，在不同類型的雞群，NDV感染發(fā)生和流行的特點各不相同。在臨床上，一般都是以非典型新城疫流行的，在成年雞群中多表現(xiàn)為一時性產(chǎn)蛋下降（特別是產(chǎn)蛋高峰期）[6]。

2、診斷

由于急性、典型新城疫的癥狀和病變與高致病性禽流感十分相似，因此，僅憑癥狀與病變很難作出準確的判斷?？蓞⒖茧u群的免疫程序和血凝抑制抗體滴度作出判斷，如已有明顯的新城疫臨床癥狀和病理變化。至于非典型新城疫，由于其呼吸道癥狀與傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、支原體感染和非高致病性禽流感相似，而減蛋綜合征、禽流感等多種疾病均可引起產(chǎn)蛋下降，所以憑臨床癥狀和病理變化很難作出非典型性新城疫的初步診斷，必須進行病毒分離鑒定和其他的實驗室診斷才能確診。

1）病毒分離與初步鑒定：病料接種9～11日齡的非免疫雞胚，37℃恒溫箱培養(yǎng)，觀察雞胚的死亡情況。

2）病毒的進一步鑒定：因禽流感病毒、減蛋綜合征等其他一些病毒也具有凝集雞紅細胞的活性，所以在HA呈陽性后，還必須用新城疫抗血清對分離的病毒進行紅細胞凝集抑制試驗（HI試驗），最好同時分別用新城疫、禽流感和減蛋綜合征的抗血清與分離物做HI試驗。如果新城疫抗血清能抑制被分離物的HA活性，而其他血清不能將其抑制，則被分離的病毒為新城疫病毒；如病毒的HA活性分別能被新城疫及禽流感的抗血清所抑制，則提示分離物中在感染了新城疫的同時還合并感染了禽流感。在確定為新城疫病毒后，還必須進行病毒的毒力測定，以確定被分離的病毒是野外強毒還是疫苗株病毒。作為一般生產(chǎn)性診斷，可將分離的病毒接種非免疫雞或SPF雞，如果病毒能致死敏感雞，則可確診。必要時也可進一步作致病指數(shù)的測定，包括雞胚平均死亡時間（MDT）、腦內(nèi)接種指數(shù)（ICPI）、靜脈接種指數(shù)（IVPI）、已凝集的紅細胞洗脫速度、蝕斑形成特點、病毒基因序列分析等[7]。

3）其他診斷方法：主要包括免疫熒光抗體、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、單克隆抗體技術(shù)、核酸探針等分子生物學(xué)技術(shù)等。由于目前雞群已普遍接種新城疫疫苗，血清學(xué)方法如未能區(qū)分抗體來自疫苗還是野外病毒之前，必須比較感染前后的抗體滴度是否有明顯上升，才具有診斷意義。

4）與禽流感的鑒別診斷：H5亞型高致病性禽流感很少感染30日齡以內(nèi)的雛雞，其發(fā)病急、潛伏期和病程短，頭腫、腿鱗出血，短時間內(nèi)大批死亡，但無腸道棗核樣壞死。發(fā)生H9亞型低致病性禽流感時，有頭腫、拉稀和呼吸道癥狀，但病程較ND長，死亡也沒有ND集中，也無神經(jīng)癥狀和棗核樣壞死，且死亡雞通常有卵黃性腹膜炎和輸卵管內(nèi)分泌物。

3、綜合防治

新城疫常以散發(fā)存在，對養(yǎng)殖業(yè)危害很大，必須嚴格按國家有關(guān)法令和規(guī)定，對疫情進行嚴格處理，必須認真地執(zhí)行預(yù)防傳染病的總體衛(wèi)生防疫措施，以便減少爆發(fā)的危險，尤其是在每年的冬季，養(yǎng)雞場均應(yīng)采取嚴格的防范措施。

1）把好疫苗質(zhì)量關(guān)：選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)的疫苗，嚴格遵守疫苗的運輸、貯存規(guī)定，按照疫苗使用說明書進行操作。

2）排除母源抗體的干擾：有條件的用戶（場）可監(jiān)測其母源抗體水平，根據(jù)母源抗體水平的高低，利用“最佳首免日齡=（1日齡測得母源抗體滴度-4）×4.5+5，如果無法測得母源抗體時，可在1日齡用新城疫油乳劑滅火苗注射，同時IV系苗點眼或滴鼻，即可排除母源抗體的干擾，及早產(chǎn)生較強的免疫力。

3）合理制定和調(diào)整免疫程序：根據(jù)當?shù)匾咔?，按先主后次的原則，合理制定免疫程序，尤其感染了法氏囊病后，應(yīng)在雞群恢復(fù)后對ND進行補免。

4）選擇最佳的免疫途徑：對個體免疫時，皮下注射或肌肉注射效果最好，點眼次之，滴鼻再次。對群體免疫而言，氣霧免疫好于飲水免疫。

5）加強飼養(yǎng)管理，飼喂優(yōu)質(zhì)全價的飼料，使其內(nèi)臟器官及免疫系統(tǒng)能正常發(fā)育。同時給雞群創(chuàng)造安定、舒適的環(huán)境，使免疫雞群處在健康狀態(tài)。

6）切忌濫用藥物：在免疫期間，禁止使用氯霉素、磺胺、呋喃、激素類藥物，在免疫前后三天內(nèi)更不可帶雞消毒，當然也并非任何藥物都不能用，可適當用青霉素、喹諾酮等藥物，以防繼發(fā)感染。

7）如雞群發(fā)病，要盡早隔離、并銷毀病死雞，同時對雞群進行緊急接種。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，強毒污染時有發(fā)生，而疫苗接種只能減少病毒侵入雞群時帶來的損失，不能消滅雞群內(nèi)存在的強毒。因此，一定要加強飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫措施，嚴格消毒，切斷每個可能傳播的途徑，盡可能給雞群一個清潔、舒適的環(huán)境，以利于其生長[8，9]。

4、材料與方法

4.1 試驗材料

4.1.1 病料來源

病例一：2013年3月2日，鹽都某養(yǎng)殖場雞群發(fā)病，病死雞日齡為300d，共養(yǎng)殖1000只，死亡200多只，剖檢多呈現(xiàn)腹膜炎癥狀，喉、氣管內(nèi)有大量黏液，腺胃乳頭出血，拉稀，脾臟腫大，卵子變性，2月齡通過飲水的方式用過副黏病毒疫苗，呼吸道、氣管都有出血現(xiàn)象，無明顯的神經(jīng)癥狀，編號為YDND。

病例二：2013年5月20日，建湖某養(yǎng)殖場的2000只育成雞，18周齡突然發(fā)病，每天死亡30-40只，且死亡有日漸增多的趨勢。部分雞精神沉郁，羽毛蓬亂，擠在一起或獨處，縮于陰暗角落，極度衰弱，食欲減退或廢絕，腹瀉，排黃綠色糞便，剖檢肌胃角質(zhì)層下有點狀或片狀出血，腺胃乳頭出血，部分腸管出血，編號JHND。

4.1.2 實驗動物

10日齡非免疫雞胚（購于山東家禽所SPF雞場）。

4.1.3 制備1%雞的紅細胞

4.1.3.1 PBS的制備：氯化鈉8g；磷酸氫二鈉3.63g；蒸餾水100ml。

4.1.3.2 抗凝劑的制備：檸檬酸三鈉5g，氯化鈉0.9g，蒸餾水100 ml。

4.1.3.3 1%雞紅細胞的制備：采集三只健康公雞的混合血，抗凝劑與雞血比為1：4。加入PBS洗滌紅細胞，每次洗滌在2000r/m離心15min，連續(xù)洗滌4～5次，最后紅血球壓積，1體積紅血球加入99體積 PBS，混勻，4℃保存?zhèn)溆?～3天。

4.1.4 普通瓊脂平板

將10g蛋白胨，3ml牛肉膏，5g氯化鈉溶解于100ml蒸餾水中，加入15%氫氧化鈉溶液約2ml調(diào)PH到7.2～7.4，加入瓊脂2g，加熱至使瓊脂完全溶解，分裝、高壓滅菌（121℃，15min），澆平板，待用。

4.1.5 陽性血清

NDV陽性抗血清，H9亞型禽流感病毒的陽性抗血清，H5亞型禽流感病毒的陽性抗血清，（均由江蘇省流行病學(xué)研究中心實驗室提供）。

4.2 試驗方法

4.2.1 細菌學(xué)檢查

為區(qū)分是細菌病還是病毒病進行鑒別診斷：取肝、脾按常規(guī)觸片染色鏡檢，同時接種普通瓊脂平板，37℃培養(yǎng)48h后觀察。

4.2.2 病毒分離

以無菌法取病死雞的肝、脾、泄殖腔、氣管等臟器。將病料按1：5加入雙抗PBS（含慶大霉素與鏈霉素）于高壓過的研缽中研磨，收集研磨液，反復(fù)凍融三次。以7000r/m，離心10min，再次用雙抗PBS1：2稀釋，離心同上。置4℃冰箱，備用。

4.2.3 雞胚接種

1.用照蛋器照蛋，棄去死胚、未受精胚及不健康的雞胚。畫出氣室邊緣和無毛細血管處。

2.氣室端先用碘酊消毒，然后用75%的酒精脫碘，再用消毒過的鑷子在各雞胚上打一小孔。

3.用消毒的注射器吸取處理好的病毒樣品，按每只0.1～0.2ml，接種于雞胚的尿囊腔，用石蠟熔融封口。

4.置35～37℃恒溫箱培養(yǎng)，24h死亡雞胚棄去，收集24～96h內(nèi)死亡雞胚的尿囊液。

5.收胚前將雞胚轉(zhuǎn)移至4℃冷藏6h。用75%的酒精消毒雞胚氣室部分，用無菌鑷子將消毒過的蛋殼打碎，再用另一把無菌鑷子將殼膜和尿囊膜撕開，并將雞胚輕輕推向一側(cè)，壓住，用吸管收取尿囊液。

4.2.4 血凝試驗（HA）和血凝抑制試驗（HI）

4.2.4.1 HA試驗

按常規(guī)微量法進行，結(jié)果以出現(xiàn)100%凝集的病毒的最大稀釋度為該樣品的HA效價。試驗操作方法：將25μl PBS或生理鹽水加入96孔V型微量反應(yīng)板A～H行的1～12孔。被檢病毒病料各25μl分別加入A～H行的第一孔，然后倍比稀釋至第11孔，棄去25μl，12孔為陰性對照。沒空再加入25μl PBS或生理鹽水，最后懸空加入25μl的1%雞紅細胞于每一孔?；靹?，室溫靜置，觀察試驗結(jié)果，確定HA滴度。

4.2.4.2 HI試驗

按常規(guī)微量法進行，結(jié)果按完全抑制紅細胞凝集的血清最高稀釋度為血凝抑制價。試驗操作方法：將25μl PBS或生理鹽水加入96孔V型微量反應(yīng)板A～H行的1～12孔；在第一行、第二行和第三行的第一孔依次加入NDV、H5亞型禽流感、H9亞型禽流感病毒標準陽性抗血清；用移液器對血清進行倍比稀釋至第10孔，然后每排棄去25μl；在每排1～11孔加入25μl 4單位病毒，置振蕩器上混勻，放入37℃恒溫箱中作用10min；在每排各孔加入1%雞紅細胞50μl，第12孔補加50μl PBS保證總體積一致，振蕩混勻后，室溫或置37℃恒溫箱中作用15～30min，觀察試驗結(jié)果。

4.2.5 雞胚平均死亡時間（MDT）的測定

用滅菌生理鹽水連續(xù)10倍稀釋病毒（10-1….10-9），每一稀釋度接種5枚非免疫雞胚，每胚0.2ml，同時設(shè)置5枚接種生理鹽水的雞作為對照組。37℃恒溫孵育，棄取24小時內(nèi)死亡的雞胚，之后每隔6小時觀察一次，直至120小時。能夠使所有雞胚致死的病毒的最大稀釋倍數(shù)即為病毒的最小致死量（MLD），MDT是MLD致死雞胚的平均死亡時間。經(jīng)試驗得知這兩樣品的最小致死量均為10-7稀釋度，取該稀釋度接種5個10日齡的非免疫雞胚，每個尿囊腔接種0.2ml。同時設(shè)置5枚接種生理鹽水的雞作為對照組，接種后的雞胚在37℃孵育7天，每天早晚各照胚一次，記錄每組雞胚中各個胚死亡的時間。

5、結(jié)果

5.1 細菌學(xué)檢查

37℃培養(yǎng)48h后，觀察平板，瓊脂平板上無任何細菌生長，表明該樣品的病原不是細菌。

5.2 病毒分離

將處理的病料接種10日齡非免疫雞胚后，于24h～96h內(nèi)死亡，雞胚呈全身出血性病變，尤其是頭部和四肢出血嚴重。取死亡的雞胚置4℃過夜（不超過24h）后無菌采集尿囊液，尿囊液清亮。

5.3 HA和HI試驗結(jié)果

通過HA試驗，可知兩樣品的血凝價分別為7log2、6log2（見表1）；通過血凝抑制試驗可知：這兩病毒樣品都既不能被H5亞型禽流感抗血清抑制，也不能被H9亞型禽流感抗血清抑制，只能被NDV陽性抗血清抑制，其HI效價分別為1：4log2、1：3log2（見表2），結(jié)果顯示從兩地病雞中分離出的病原都為新城疫病毒。

表1 HA試驗結(jié)果

樣品號123456789101112

YDND#######—————

JHND######++++++———

注：#為完全凝集；++為不完全凝集；—為不凝集

表2 HI試驗結(jié)果

樣品陽性血清123456789101112

YDNDNDV抗血清————#######—

YDNDH5亞型禽流感抗血清###########—

YDNDH9亞型禽流感抗血清###########—

JHNDNDV抗血清———########—

JHNDH5亞型禽流感抗血清###########—

JHNDH9亞型禽流感抗血清###########—

注：# 為完全凝集；++ 為不完全凝集；— 為不凝集

5.4 MDT的測定

通過該試驗可知，雞胚平均死亡時間（MDT）分別為 47.6 h、44.4 h（見表3），表明這兩個樣品中分離出來的NDV的毒力均為強毒。

表3 MDT實驗結(jié)果

毒株最小致死量雞胚死亡時間（h）MDT（h）

12345

YDND10-7/0.2ml444250534747.6

JHND10-7/0.2ml424738455044.4

6、小結(jié)與討論

鹽都、建湖兩養(yǎng)殖戶的雞群大批死亡，根據(jù)臨床癥狀和病理變化，初步懷疑為新城疫病毒感染，采集病料進行血凝試驗和血凝抑制試驗，結(jié)果顯示兩地雞群感染的病原均為新城疫病毒，接著通過MDT試驗表明這兩個樣品中分離出來的NDV的毒力均為強毒。

仔細分析病例，我們不難得出：盡管病例一的雞群在二月齡已注射過雞副黏病毒疫苗和禽流感疫苗，但仍發(fā)生的了新城疫，而且發(fā)病率及病死率都較高，其原因可能有：

1）首免時間不準確：如果首免時間過早，則疫苗被中和；而過晚則母源抗體降低，不能保護雛雞；

2）機體免疫功能下降：傳染性法氏囊病、馬立克氏病等的病毒和球蟲、組織滴蟲等感染都能侵害免疫系統(tǒng)而造成免疫抑制，導(dǎo)致肌體免疫功能降低，對疫苗的應(yīng)答能力減弱，對疾病易感性增加；

3）缺乏綜合防治觀念：部分養(yǎng)雞戶認為接種疫苗就有了保證，而忽略了平時的飼養(yǎng)管理、必需的營養(yǎng)添加和經(jīng)常的消毒衛(wèi)生。

4）疫苗保存不當引起失效：養(yǎng)雞戶對疫苗運輸、保管和使用不當，如取回疫苗后無冰箱設(shè)備、長期放在高溫或直射陽光下或稀釋后長時間未用等，造成疫苗失效而使免疫失敗。

另外新城疫毒力的變異，野毒的侵襲，各種應(yīng)激因素等其他方面也可以造成新城疫的流行。

從結(jié)果上看，YDND、JHND的MDT值分別為47.6h、44.4h，即表明分離到的毒株符合強毒株的特征。新城疫病毒只有一個血清型，其抗原性一致，但毒力差異很大，一般認為強毒株MDT為40～60小時，ICPI≥1.6。但近年來，發(fā)生更多的則是關(guān)于非典型新城疫的報導(dǎo)：它主要發(fā)生在免疫雞群中，臨床癥狀及剖檢變化都因不表現(xiàn)典型新城疫的特征而往往被忽視，發(fā)病時間多在30日齡以后，一般以呼吸道和消化道癥狀為主，病雞主要表現(xiàn)為呼吸困難、咳嗽和氣喘，采食、飲水無明顯變化或逐漸減少，嗉囊少食或空虛，初期排黃綠色稀糞，后期排黃色糞便，用藥物治療效果不明顯。

在采集病例及基層實際工作中，我們發(fā)現(xiàn)并不是所有的養(yǎng)殖戶對新城疫病毒都有清晰的理解，在不同方面還存在不少誤區(qū)，主要表現(xiàn)在：

1）雞群中出現(xiàn)綠色糞便就認為是新城疫：雞群感染新城疫后會出現(xiàn)腹瀉，拉黃綠色或黃白色稀糞等，但禽流感、傳染性法氏囊病、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、禽霍亂、大腸桿菌病等都會出現(xiàn)黃白色或黃綠色糞便。

2）雞群中出現(xiàn)有神經(jīng)癥狀的雞就認為是新城疫：雞在患慢性新城疫后會出現(xiàn)扭頭、頭向后仰、腿翅麻痹、運動失調(diào)、抽搐、兩腳向后伸等神經(jīng)癥狀。但其他的許多疾病也可出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如神經(jīng)型馬立克氏病、禽腦脊髓炎、維生素缺乏等。

3）疫苗免疫的越早越好：雛雞出殼后體內(nèi)有來自種蛋的母源抗體，這種母源抗體可保護雛雞約1～2周，因此，沒有抗體檢測條件的養(yǎng)雞戶，可在一周齡進行首免比較合適，有條件的最好是檢測一下母源抗體，然后再確定首免時間。

4）疫苗免疫的劑量越大越好：根據(jù)雞群的情況、疫苗的種類及免疫方法，適當加大疫苗的劑量是可以增強免疫效果的，但用量過大就會造成雞群強烈的應(yīng)激，反而會使免疫應(yīng)答能力減弱而影響免疫效果，特別是活疫苗，用量過大還會造成嚴重的疫苗接種反應(yīng)。

5）免疫的次數(shù)越多越好：任何一種疫苗都有一定的免疫期，如果在疫苗的有效免疫期內(nèi)，免疫抗體水平較高的時候再進行免疫，疫苗就會與原有的抗體發(fā)生中和反應(yīng)，使兩次的免疫都起不到應(yīng)有的效果，過于頻繁的免疫會使機體的免疫應(yīng)答能力降低而出現(xiàn)免疫麻痹。最好的方法是對免疫抗體水平進行定期檢測，根據(jù)抗體水平的高低確定免疫次數(shù)和時間。

致謝

本人衷心感謝包匯慧老師的悉心指導(dǎo)。本論文從選題、課題設(shè)計、實施到論文寫作無不凝結(jié)著指導(dǎo)老師的一片心血，感謝王濤、劉金彪等老師在試驗和論文寫作的過程中的幫助。