王業(yè)社，段林東，周雙

(邵陽學(xué)院城市建設(shè)系，湖南邵陽422000)

粗葉懸鉤子(Rubus alceaefolius)為薔薇科(Rosaceae)懸鉤子屬(Rubus)多年生常綠攀援灌木［1］。單葉，花為白色，果熟時紅色。常生于村邊、路旁、灌叢中，分布于福建、廣東、廣西、湖南、貴州等地［2］。粗葉懸鉤子含有人體所需的多種氨基酸，可作為中草藥治療多種疾病，其根和葉入藥，有活血祛瘀、清熱止血之效［3］。同時，其葉形別致，果色艷麗，生長迅速，繁殖容易，覆蓋力強(qiáng)，具有較強(qiáng)的適應(yīng)性和抗性。作為新優(yōu)地被植物植于樹下、林緣、綠化隔離帶、假山巖石旁、溪邊、岸邊、池塘邊陰濕處等，頗具景觀價值。因此，粗葉懸鉤子不僅是藥用價值較高的藥用藤本植物，而且還是觀賞價值較高的園林地被植物，綜合效益顯著，發(fā)展?jié)摿薮蟆?/p>

近年來，我國越來越重視對地被植物的研究與應(yīng)用，其中新優(yōu)地被植物的引種和鄉(xiāng)土地被植物的馴化已成為當(dāng)前研究的熱潮［4-8］。作為一種藥用價值和觀賞價值較高的鄉(xiāng)土地被植物粗葉懸鉤子。藥用成分和藥用功效方面目前國內(nèi)有較多的研究［9-13］，而在生物特性、栽培育種［14］和園林應(yīng)用等方面相關(guān)研究甚少，還未見其無性繁殖方面的報道。為優(yōu)化粗葉懸鉤子無性繁殖技術(shù)，進(jìn)一步提高粗葉懸鉤子無性繁殖的成活率，改善生根質(zhì)量，推動粗葉懸鉤子產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，本研究于2012年對粗葉懸鉤子的無性繁殖進(jìn)行多因子正交試驗研究，探索其人工繁育的可行性技術(shù)和措施。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

采用4因素3水平的L9(34)正交試驗設(shè)計方案，以影響粗葉懸鉤子無性扦插繁殖生根質(zhì)量的4個主要因子為試驗因子:A(NAA濃度)、B(扦插基質(zhì))、C(插穗類型)、D(處理時間)。各因子的水平分別為:A1為 100 mg·L－1，A2為 200 mg·L－1，A3為300 mg·L－1;B1為紅黃壤，B2為河沙，B3為菜園土;C1為一年生帶頂芽莖段，C2為一、二年生莖段，C3為一年生帶葉莖段;D1為1 h，D2為2 h，D3為4 h。正交方案設(shè)計見表1。

表1 L 9(34)正交試驗Table 1 L 9(34)orthogonal experiment

1.2 試驗材料

試驗于2012年3月3日在邵陽學(xué)院園林實踐教學(xué)基地苗圃進(jìn)行。扦插材料采自湖南云山森林公園仙人橋附近的自然居群，并放入裝有苔蘚的塑料袋內(nèi)噴水保濕帶回。扦插基質(zhì):紅黃壤采集于邵陽市大祥區(qū)城南鄉(xiāng)深耕塘，菜園土采集于邵陽市大祥區(qū)邵陽學(xué)院七里坪校區(qū)附近，河沙采集于邵陽市大祥區(qū)城南鄉(xiāng)采沙場。

1.3 試驗方法

試驗前用5%的KMnO4溶液對3種扦插基質(zhì)進(jìn)行消毒，并按試驗設(shè)計要求填入各扦插床(高20 cm、內(nèi)空80 cm、長5 m)，基質(zhì)厚度為18 cm，整平，澆透水，準(zhǔn)備扦插繁殖。從生長健壯、無損傷、無病蟲害的粗葉懸鉤子植株上剪取一年生和一、二年生粗葉懸鉤子枝條，分別剪取以下3種插穗。1)帶頂芽莖段:選取一年生嫩枝頂芽段，按保留4～5個節(jié)、長7 cm左右的標(biāo)準(zhǔn)剪取插穗，且每個插穗保留頂芽，保留成熟小葉1～2片。2)一年生帶葉莖段:選取一年生枝條(取帶頂芽莖段后的枝條)，按保留3個節(jié)、長8 cm左右的標(biāo)準(zhǔn)剪取插穗，且保留插穗上芽處1個腋芽、半個或1個小葉片，插穗上切口距插穗上芽約1 cm處剪成平角。3)一、二年生莖段:選取一年生和二年生交界處的枝條進(jìn)行修剪，按保留3～4個節(jié)(最下方的節(jié)點(diǎn)為二年生節(jié)點(diǎn))、長8 cm左右的標(biāo)準(zhǔn)剪取插穗，且每個插穗保留生長前端的1個腋芽，插穗上切口距插穗腋芽約1 cm處剪成平角。3種插穗下切口一般在插穗最下芽下部1～1.5 cm處剪成銳角斜面，除去倒鉤刺，50枚一扎。用不同NAA濃度的溶液浸泡處理，按10 cm×10 cm株行距插入各扦插床，每處理50條插穗，用木棍打孔法，將插穗置于孔內(nèi)，插穗以2/3沒入土中為宜，然后用手壓實，使基部與基質(zhì)密切接觸，然后澆透水，并在床面上安放拱形支架，上覆農(nóng)用塑料薄膜，再加蓋透光度率為40%遮陽網(wǎng)。根據(jù)天氣狀況，每天向床內(nèi)噴霧2～3次，以保持床內(nèi)相對濕度。在高溫高濕的條件下，注意適當(dāng)通風(fēng)。在日常管理上，經(jīng)常檢查并記錄生根狀況，隨時除草，及時防治病蟲害并拔除病株。

于2012年6月11日統(tǒng)計生根數(shù)量、生根長度、生根率等生根情況，進(jìn)行極差分析和方差分析，確定各試驗因素對生根率、平均生根數(shù)、平均根長的影響。綜合評價粗葉懸鉤子無性繁殖生根質(zhì)量Q值［15］。Q=生根率×50%+平均生根數(shù)×25%+平均根長×25%。

試驗數(shù)據(jù)用SAS8.1統(tǒng)計軟件進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 各試驗因素對生根率的影響

極差的大小反映了各因素對試驗結(jié)果影響的主次。各試驗因素對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖生根率影響效應(yīng)的大小排序為B(108)＞D(54)＞A(32)＞C(26)，扦插基質(zhì)對生根率影響最大，其中以菜園土最佳，紅黃壤和河沙稍差;處理時間對生根率影響次之，以處理時間為2 h的影響最大，處理時間為1和4 h的影響較小;NAA濃度對生根率的影響排第3，當(dāng) NAA 濃度為 100 mg·L－1時，生根率較好，而其他兩種NAA濃度對生根率的影響較小;插穗類型對生根率影響最小，其中以帶頂芽莖段插穗影響最大，一、二年生莖段和一年生帶葉莖段插穗的影響較小(表2)。經(jīng)方差分析(表3)，各試驗因素對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖生根率的影響均未達(dá)到顯著水平(P ＞0.05)。

2.2 各試驗因素對平均生根數(shù)的影響

極差分析結(jié)果表明，各試驗因素對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖平均生根數(shù)影響效應(yīng)的大小排序為A(18.5)＞B(17.62)＞D(10.29)＞C(9.32)，NAA 濃度對平均生根數(shù)的影響最大，以濃度為100 mg·L－1時其平均生根數(shù)最佳;扦插基質(zhì)對平均生根數(shù)的影響次之，其中以河沙影響最顯著，菜園土和紅黃壤影響偏小;處理時間和插穗類型對平均生根數(shù)的影響較小，分別以處理時間為2 h和一、二年生莖段插穗時其平均生根數(shù)最大(表2)。方差分析表明(表3)，各試驗因素對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖平均生根數(shù)的影響均未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。

表2 正交試驗結(jié)果Table 2 Results of Orthogonal Tests

2.3 各試驗因素對平均根長的影響

極差分析結(jié)果表明，各試驗因素對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖平均根長影響效應(yīng)的大小排序為B(19.95)＞ A(16.21)＞ D(4.54)＞ C(2.39)，扦插基質(zhì)對平均根長的影響最大，其中以菜園土最好，河沙和紅黃壤稍差;NAA濃度對平均根長的影響次之，以濃度為400 mg·L－1時影響最大，濃度為100 mg·L－1和濃度為 200 mg·L－1時影響較小;處理時間排第3，以處理時間為1 h其平均根長最大 ，處理時間為2和4 h時，其平均根大較小;插穗類型對平均根長的影響最小，其中以帶頂芽莖段插穗影響最大，一、二年生莖段和一年生帶葉莖段插穗的影響較小(表2)。方差分析表明(表3)，在各試驗因素中，NAA濃度和扦插基質(zhì)對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖平均根長的影響均達(dá)到顯著水平(P＜0.05)，而插穗類型和處理時間對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖平均根長的影響均未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。

2.4 各試驗因素對生根質(zhì)量的影響

極差分析表明各試驗因素對粗葉懸鉤子無性扦插繁殖生根質(zhì)量影響效應(yīng)的大小排序為B(58.05)＞D(28.98)＞ A(18.00)＞ C(11.10)，說明扦插基質(zhì)對粗葉懸鉤子無性繁殖生根質(zhì)量的影響最大，其次為處理時間，NAA濃度排第3，插穗類型的影響最小。經(jīng)方差分析(表3)，結(jié)果表明扦插基質(zhì)對粗葉懸鉤子生根質(zhì)量的影響達(dá)到顯著水平(P＜0.05)，其他各試驗因素對粗葉懸鉤子生根質(zhì)量的影響均未達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。

9種組合中，A2B3C1D2的生根質(zhì)量最好，Q平均值為52.17。綜合各因素對生根質(zhì)量的影響，當(dāng)NAA濃度為100 mg·L－1、扦插基質(zhì)為菜園土、插穗類型為一年生帶頂芽莖段、處理時間為2 h時，粗葉懸鉤子生根質(zhì)量效果的最佳，用該組合(A1B3C1D2)進(jìn)行扦插驗證試驗，結(jié)果表明，粗葉懸鉤子生根質(zhì)量平均Q值為63.88，明顯高于正交試驗表中的9種組合試驗，從而驗證了組合A1B3C1D2為粗葉懸鉤子無性扦插繁殖處理的適宜方法。

3 討論與結(jié)論

開展無性繁殖特別是扦插無性繁殖技術(shù)研究，不僅是加速粗葉懸鉤子種苗繁殖，建立遷地保護(hù)基地的重要舉措和有效途徑，也是實施早花、矮化技術(shù)的重要措施，對粗葉懸鉤子種質(zhì)資源的保存、發(fā)展和利用具有重要的意義［16］。

表3 各試驗因素對生根率、平均根數(shù)、平均根長和生根質(zhì)量的影響Table 3 Effects of each testing factors on rooting rates，average amount of roots，average length of roots and rooting quality

在NAA濃度、扦插基質(zhì)、插穗類型和處理時間4個因素中，扦插基質(zhì)對粗葉懸鉤子生根質(zhì)量的影響最大，處理時間次之，NAA濃度排第3，插穗類型的影響最小，其中扦插基質(zhì)對粗葉懸鉤子生根質(zhì)量的影響達(dá)到顯著水平。從總的生根質(zhì)量來看，A1B3C1D2為最優(yōu)組合，即當(dāng) NAA濃度為 100 mg·L－1、扦插基質(zhì)為菜園土、插穗類型為一年生帶頂芽莖段、處理時間為2 h時，粗葉懸鉤子無性扦插繁殖的生根效果最好。在本試驗的3種扦插基質(zhì)中，以菜園土最好，其生根數(shù)量最多，生根長度最長，生根率最高;其次是黃紅壤;最差的是河沙。因為河沙透氣性最好但保水性最差，紅黃壤基質(zhì)的保水性較好但透氣性較差，而菜園土有機(jī)質(zhì)較多，呈酸性，與其自然居群的土壤pH相似，且保水性和透氣性較平衡，從而更適宜粗葉懸鉤子的生根生長。

在本試驗中，從NAA不同的浸泡時間對粗葉懸鉤子生根質(zhì)量指數(shù)的影響效果來看，當(dāng)NAA濃度處理時間為2 h時，粗葉懸鉤子無性扦插繁殖的生根效果最好，生根率最高，平均生根數(shù)較高和平均根長較長。處理時間超過2 h時，生根效果、生根率、平均生根數(shù)等各項指標(biāo)沒有隨時間延長而明顯提高。這可能與粗葉懸鉤子的生理特性、扦穗所處的生理狀態(tài)以及激素的特性有關(guān)［17］。一般情況下，激素濃度大浸泡時間短，激素濃度小浸泡時間長。因此，在使用不同濃度NAA處理粗葉懸鉤子插穗時，其浸泡的時間范圍應(yīng)合理控制在一個最佳時間節(jié)點(diǎn)。NAA激素濃度對粗葉懸鉤子生根質(zhì)量有較大的影響作用。在本試驗中，當(dāng)NAA濃度由100 mg·L－1增大到200 mg·L－1時，生根率隨濃度的增加而降低，NAA 濃度由200 mg·L－1增大到300 mg·L－1時，生根率隨濃度的增加而提高，說明NAA具有促進(jìn)生長和抑制根生長的二重作用。因此，在使用NAA處理粗葉懸鉤子插穗時，其溶液濃度應(yīng)合理控制在一個最佳數(shù)值。帶頂芽莖段插穗對粗葉懸鉤子生根效果最好，去除頂芽后的插穗其生根質(zhì)量明顯降低，表明頂葉在插條生根中起著非常重要的作用，這可能是由于頂葉能進(jìn)行光合作用，產(chǎn)生營養(yǎng)物質(zhì)——糖，積累于枝下部有利于生根。此外，頂芽的存在加速了蒸騰作用，也促進(jìn)了枝條從基質(zhì)中吸收水分和營養(yǎng)物質(zhì)，從而促進(jìn)了插條生根及根的生長［18］。

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