徐元廠，王洪光，王璐，于海峰

(青島科技大學 藥學院，山東 青島 266042)

硝酸異山梨酯(ISDN)是一種用于治療和預防心絞痛和充血性心力衰竭的常用藥物［1］。ISDN 口服肝臟首過效應強烈，在體內迅速代謝為兩個活性產(chǎn)物2-單硝酸異山梨酯和5-單硝酸異山梨酯［2］。以緩釋微丸制劑為代表的多單元型給藥系統(tǒng)，以其特有的優(yōu)越性，目前成為緩控釋制劑的研究熱點之一。其中以包衣為主的膜控型緩釋微丸通常由含藥丸芯和外層聚合物衣膜組成，可以利用滲透壓原理或衣膜材料的溶脹爆破特性，設計出各種微丸衣層結構，也可利用聚合物材料功能特性不同，制備不同釋藥規(guī)律的微丸制劑［3］。

目前國內在微丸的研究主要集中在用流化床法包衣制備膜控型微丸，以擠出-滾圓法制備骨架型微丸這兩個方面，對離心包衣這一工藝研究不夠充分。該包衣方法具有節(jié)約包衣時間和成本，操作靈活，效率高并適合工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)點［4-5］。

本文主要研究膜控型緩釋微丸，以Eudragit RL PO 為包衣材料，采用離心包衣法對含藥微丸進行緩釋包衣，制備了釋藥性能良好的ISDN 膜控型緩釋微丸，以期減少患者給藥次數(shù)，提高治療順應性。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

硝酸異山梨酯(含量99.9%);微晶纖維素、乳糖、淀粉、羧甲基纖維素鈉均為醫(yī)藥級;甲醇，色譜純;癸二酸二丁酯，分析純;滑石粉，食品級;丙烯酸樹脂Eudragit RLPO。

BZJ-360 離心造粒包衣鍋;Ultimate3000 高效液相色譜;YP202N 電子天平;KH250DB 型超聲波清洗器;BT00-100M 型恒流蠕動泵;標準分樣篩;RCZ-8A 智能溶出儀。

1.2 標準曲線的建立

參照硝酸異山梨酯國家藥品標準中含量測定方法，精密稱定干燥至恒重的硝酸異山梨酯對照品約50.9 mg，置50 mL 容量瓶中，加入25 mL 甲醇，超聲振蕩5 min，使之溶解，用流動相稀釋并定容至刻度作為貯備液。分別精密吸取貯備液0.5，1.0，1.5，2.5，3.0，4.0，5.0，6.0 mL，至25 mL 容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻，得到系列標準液，經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜過濾。取濾液20 μL 進樣，參照高效液相色譜法(《中華人民共和國藥典》2010 年版)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇∶水(體積比為54∶46)為流動相，在254 nm 處測定，記錄峰面積，以硝酸異山梨酯的峰面積(A)對濃度(C)進行線性回歸，得標準曲線回歸方程A =0.018 8C－0.036 0(r=0.999 1)。

1.3 實驗方法

1.3.1 含藥丸芯的制備 將ISDN 原料藥粉碎過120 目篩，與微晶纖維素、乳糖、淀粉按(4∶3∶2∶1，w/w)的比例過篩混勻，置于包衣造粒機的供粉室中，以300 g 微晶纖維素空白丸核為母核，2%羧甲基纖維素鈉為黏合劑，機器參數(shù)設為:噴漿流量25 mL/min，供粉速度25 g/min，主機轉速頻率10 Hz，鼓風頻率10 Hz，噴氣壓力0.12 MPa。供粉結束后，丸芯鍋中拋光5 min 后于40 ℃烘干12 h，制得含藥丸芯，收取15 ～20 目丸芯備用。

1.3.2 緩釋微丸的制備 稱取含藥丸芯300 g，置于離心造粒機內，包衣前進風溫度設置為35 ℃，對微丸進行預熱3 min，調整噴液流量、霧化氣壓力，調節(jié)噴槍高度，使霧化扇面達到最大，擋板的位置應使微丸在噴液區(qū)域充分鋪展，待包衣結束后取出緩釋微丸。將此微丸與適量的微粉硅膠混勻，置40 ℃恒溫干燥箱中老化12 h，即得成品。

1.4 體外釋放度測定

取本品適量(相當于ISDN 20 mg)按照釋放度測定法(《中國藥典》2010 年版二部附錄XD 第一法)，采用溶出度測定法(《中國藥典》2010 年版二部附錄XC)中的第二法裝置，轉速為100 r/min，釋放介質體積為1 000 mL，溫度37.0 ℃，依法操作，在不同時間分別取溶液5 mL 濾過，并及時在操作容器中補充等溫新鮮介質5 mL，照標準曲線項下的色譜條件，分別取續(xù)濾液20 μL 在254 nm 波長處測定峰面積。另精密稱取硝酸異山梨酯對照品適量，制成每1 mL 中約含20 μg 的溶液，同法測定，計算不同時間累計釋放量。

2 結果與討論

2.1 微丸的制備工藝

實驗采用離心-造粒粉末層積法制備ISDN 素丸。應用包衣造粒機能完成藥物和輔料的混合、起模、成丸、干燥和包衣的全過程［5］。操作較擠出-滾圓成丸法使用機器少、較簡便。以微晶纖維素、乳糖、淀粉(3∶2∶1，w/w)為輔料進行稀釋，2%羧甲基纖維素鈉水溶液為黏合劑，制備的丸圓整度較好，15～20 目丸芯收率大于87%，適合作為緩釋包衣的丸芯。

2.2 包衣材料的選擇

曾用Eudragit NE30D 水分散體作為包衣材料，成膜溫度很低(24 ℃左右)，粘性較大，在包衣過程中要加入較大量的滑石粉，滑石粉在包衣液中極易沉降，即使不停攪拌也會沉降在管路中，甚至導致噴槍堵塞;同時，水分揮發(fā)較乙醇慢，延長了操作時間，降低包衣效率。故本實驗選擇醇溶媒的包衣材料作為緩釋衣材。

2.3 處方篩選

2.3.1 包衣增重的選擇 Eudragit RLPO 屬于滲透性緩釋材料，溶脹性較大，改變其用量就可以按照預期設置的速率控制藥物釋放［6］。對含藥丸芯分別進行增重為4%，8%，12%，16%的緩釋包衣操作，考察增重對釋放度的影響，結果見圖1。

圖1 包衣增重對釋放度的影響Fig.1 Release profile from coated pellets with coating level

由圖1 可知，藥物的釋放速率隨包衣增重的增加而減小，并且從包衣增重12%開始，前期釋藥的停滯時間也隨包衣增重的增加而延長，所以優(yōu)選包衣增重為8%。

2.3.2 增塑劑的用量 增塑劑可以顯著提高薄膜的柔韌性，降低聚合物的最低成膜溫度，有助于噴液霧滴在丸芯表面充分鋪展，提高包衣效率。以包衣增重8%，癸二酸二丁酯分別占聚合物量的10%，15%，20%，25%配制包衣液，制備包衣微丸后測定累積釋放率，結果見圖2。

圖2 增塑劑用量對釋放度的影響Fig.2 Release profile from coated pellets with the amount of plasticizer

由圖2 可知，藥物的釋放速率隨著增塑劑用量的增加而減緩，主要由于增塑劑提高了包衣膜的致密性和柔韌性，阻擋了藥物的釋放，且增塑劑用量的增加，丸芯之間的粘連現(xiàn)象顯著，影響包衣效果，尤其是在20%以后。綜合考慮，增塑劑用量為15%。

2.3.3 抗粘劑用量的考察 包衣液中加入一定比例的抗粘劑，可以防止在包衣過程中微丸之間的粘連，使包衣操作順利進行，以提高包衣效率，滑石粉是最常用的抗粘劑。以包衣增重8%，癸二酸二丁酯占聚合物量的15%，滑石粉占聚合物用量的20%，30%，40%，50%的包衣液對含藥微丸進行包衣，測定微丸的累積釋放率，結果見圖3。

圖3 抗粘劑用量對釋放度的影響Fig.3 Release profile from coated pellets with the amount of talcum powder

由圖3 可知，當滑石粉用量比例增加時，微丸釋藥速率變快。這可能因為滑石粉在衣材中起到部分致孔劑的作用，故用量不宜過多，滑石粉用量占包衣材料量的40%時，微丸釋藥曲線具有較好的緩釋性。

2.3.4 聚合物濃度的考察 以包衣增重8%，癸二酸二丁酯占聚合物用量的15%，聚合物濃度分別為4%，6%，8%配制包衣液，進行緩釋包衣操作，測定微丸的累積釋放率，結果見圖4。

圖4 包衣液濃度對釋放度的影響Fig.4 Release profile from coated pellets with different coating concentration

由圖4 可知，隨著聚合物濃度的增加，藥物的釋放速率呈逐漸加快的趨勢，但這種趨勢不是很明顯，當濃度達到8%時，釋放曲線在2 ～4 h 之間存在突釋現(xiàn)象，此時存在丸芯粘連現(xiàn)象，導致包衣不均勻，需降低流速才能繼續(xù)完成包衣，浪費時間，重復性差;但當濃度較小時，包衣液量過大，也需要較長操作時間，降低了包衣效率。綜合考慮，聚合物濃度為6%。

2.4 工藝優(yōu)化及驗證

在單因素實驗基礎上，以理論包衣增重為8%，增塑劑用量為聚合物的15%，抗黏劑用量40%，聚合物濃度為6%的乙醇溶液為包衣液，對包衣過程中鼓風頻率、溫度、霧化壓力、噴液流速4 個工藝參數(shù)進行正交實驗，以優(yōu)化參數(shù)。因素-水平見表1。

表1 正交實驗因素水平表Table 1 The factors and levels of the orthogonal experiment

膜控丸的性能以收率Y 和體外釋放度指標E=︱P0.5－0. 3︱+︱P2－0. 5︱+︱P8－0. 8︱(P0.5、P2、P8分別為微丸0.5，2，8 h 累積釋放度)來表征。采用Z=Y－E 為綜合指標來評價離心法制備膜控緩釋微丸，Z 值越大，說明丸的性能越好。正交實驗結果見表2。

由表2 可知，各因素為膜控釋微丸釋放度和收率的影響順序為:C ＞A ＞D ＞B，優(yōu)化工藝為A1B1C3D2，即鼓風頻率8 Hz，溫度為28 ℃，霧化壓力為0.1 MPa，噴漿速度為10 mL/min。

表2 正交實驗結果Table 2 The result of orthogonal experiment

按上述優(yōu)化的處方及工藝條件試制3 批ISDN樣品，并進行體外釋放度實驗，結果見圖5。

圖5 三批ISDN 樣品體外釋放度Fig.5 The three batch of samples of ISDN release in vitro

由圖5 可知，按已優(yōu)化的包衣處方和工藝制備的ISDN 緩釋微丸，其體外釋放度均符合要求，說明此工藝穩(wěn)定可靠，質量可控。

3 結論

利用離心法分別制備了含藥丸芯和緩釋微丸，優(yōu)化的工藝參數(shù)為:鼓風頻率8 Hz，溫度為28 ℃，霧化壓力為0.1 MPa，噴漿速度為10 mL/min。在此工藝和處方條件下制備的硝酸異山梨酯緩釋微丸外觀美觀，體外溶出度符合要求，適合規(guī)?；a(chǎn)。

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