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        不同加工方法對(duì)中藥溪黃草主要化學(xué)成分的影響

        2014-12-22 11:47:01潘雪峰張慧曄林建云徐小飛李明
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年21期
        關(guān)鍵詞:黃酮方法

        潘雪峰+張慧曄+林建云+徐小飛+李明+鄧喬華

        摘要:為比較不同加工方法對(duì)3個(gè)品種溪黃草[Rabdosia serra (Maxim.) Hara]藥材中迷迭香酸、總二萜、總黃酮含量的影響,以尋找出溪黃草藥材的最適加工方法,為溪黃草藥材GAP基地的建設(shè)提供一定的參考,以溪黃草、線紋香茶菜[Rabdosia lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don)Hara]、纖花香茶菜[Rabdosia lophanthoides (Buch.-Ham.ex D.Don)Hara var.graciliflora (Benth.)Hara]為材料,分別采用不同的加工方法處理,采用HPLC測(cè)定樣品中迷迭香酸含量,采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定樣品中總二萜和總黃酮的含量。結(jié)果表明,不同加工方法對(duì)迷迭香酸的含量影響較大,而對(duì)總二萜和總黃酮的含量影響不顯著,經(jīng)遠(yuǎn)紅外干燥和烘干工藝處理的樣品中3種成分的含量普遍偏低,而經(jīng)陰干工藝處理的樣品中3種成分含量普遍偏高。說(shuō)明不同加工方法對(duì)中藥溪黃草中3種成分含量有影響,從活性成分的損失和節(jié)約生產(chǎn)成本等方面綜合考慮,建議對(duì)溪黃草品種采用鮮切段后再陰干的加工方法,線紋香茶菜和纖花香茶菜采用陰干后再干切段的方法質(zhì)量較好。

        關(guān)鍵詞:溪黃草[Rabdosia serra (Maxim.) Hara];加工方法;迷迭香酸;總二萜;總黃酮

        中圖分類號(hào):R284.1 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A ? ? ? ?文章編號(hào):0439-8114(2014)21-5217-04

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.21.043

        Effects of Different Processing Methods on the Main Chemical Compositions of Linearstripe Rabdosia Herb

        PAN Xue-feng1,2, ZHANG Hui-ye2, LIN Jian-yun2, XU Xiao-fei2, LI Ming1, DENG Qiao-hua2

        (1.School of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China;

        2.Hutchison Whampoa Guangzhou Baiyunshan Chinese Medicine Company Limited, Guangzhou 510515, China)

        Abstract: To find out the optimal processing method of Linearstripe Rabdosia Herb and further provide a reference for building the GAP planting base of Linearstripe Rabdosia Herb, the effects of different processing methods on the content of rosmarinic acid, total diterpenoids and total flavonoids were studied. The materials included Rabdosia serra (Maxim.) H.Hara, Rabdosia lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don) H.Hara, Rabdosia lophanthoides (Buch.-Ham.ex D.Don) H.Hara var.graciliflora (Benth.) H.Hara. The content of rosmarinic acid was analyzed by HPLC. The content of total diterpenoids and total flavonoids were determined by UV spectrophotometry. The results showed that the effect of different processing on the content of rosmarinic acid were higher. The influence on the content of total diterpenoids and total flavonoids was not significant by different processing methods. The contents of three kinds of chemical component were generally lower when treated by far-infrared dryer and stoving. The contents of the three components were generally higher when dried in shade. It is indicated that processing method had influence on the contents of chemical component in Linearstripe Rabdosia Herb. It is advised that the Rabdosia serra (Maxim.) H.Hara should be fresh-cut first and then dried in the shade. Rabdosia lophanthoides (Buch.-Ham.ex D.Don) H.Hara var.graciliflora (Benth.) H.Hara should be dried in the shade first and then drily cut considering the comprehensive evaluation of active constituents and cost of production.

        Key words: Rabdosia serra (Maxim.) Hara; processing method; rosmarinic acid; total diterpenoids; total flavonoids

        溪黃草[Rabdosia serra (Maxim.) Hara]為民間習(xí)用草藥,具有清熱解毒、利濕退黃、散瘀消腫的功效,主治濕熱黃疸、膽囊炎等疾病,主產(chǎn)于長(zhǎng)江以南的廣東、廣西、江西、福建等省區(qū),俗稱熊膽草、黃汁草、手擦黃等,因喜生山谷溪旁潮濕處,新鮮葉片揉搓有棕黃色液汁而得名[1,2]。廣東省作為藥用的溪黃草品種主要有:線紋香茶菜[Rabdosia lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don)Hara]及其變種纖花(細(xì)花)香茶菜[Rabdosia lophanthoides (Buch.-Ham.ex D.Don)Hara var.graciliflora (Benth.)Hara][3,4],另外,溪黃草[Rabdosia serra (Maxim.)Hara]在部分藥材市場(chǎng)上也被用作溪黃草藥材流通?!吨兴幋筠o典》(下冊(cè))[5]中記載:溪黃草地上部分主要含有的二萜類化合物具有抗腫瘤活性,其黃酮類物質(zhì)對(duì)羥自由基和氧自由基具有清除作用。近年來(lái),有研究發(fā)現(xiàn)溪黃草中含有迷迭香酸成分[6],迷迭香酸為天然抗氧化劑[7],而溪黃草藥材治療肝炎的物質(zhì)基礎(chǔ),即涉及抑制乙肝病毒的有效部位和活性成分,可能與高效抗氧化物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用有關(guān)[8]。

        中藥材在采收后,一般都須進(jìn)行產(chǎn)地加工,產(chǎn)地加工是保證藥材質(zhì)量的重要環(huán)節(jié),對(duì)于藥材進(jìn)一步加工炮制起著決定性作用。早在唐代孫思邈的《千金翼方》就有“夫藥采取不知時(shí)節(jié),不知陰干曝干,雖有藥名,終無(wú)藥實(shí)”的論述,闡明了正確的采收加工對(duì)中藥質(zhì)量的重要意義。目前,文獻(xiàn)關(guān)于溪黃草藥材的產(chǎn)地加工研究較少,筆者經(jīng)多年產(chǎn)地調(diào)研發(fā)現(xiàn)各地種植戶采用的基本是采收后直接曬干的方法。鑒于其他草本類中藥材,如穿心蓮[9]、馬齒莧[10]、黃花蒿[11]等在經(jīng)過(guò)不同加工方法后其主要有效成分含量變化顯著。為了提高溪黃草藥材的質(zhì)量及為GAP基地的建設(shè)提供參考資料,有必要對(duì)溪黃草藥材的加工方法進(jìn)行探索。本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定經(jīng)不同加工方法處理后的溪黃草藥材中迷迭香酸、總二萜、總黃酮3種活性成分的含量,以期為確定溪黃草藥材最佳產(chǎn)地加工方法提供科學(xué)依據(jù),為按中藥材GAP原則制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)并實(shí)施推廣應(yīng)用提供基礎(chǔ)研究資料。

        1 ?材料與方法

        1.1 ?材料

        儀器和試劑:Agilent1260型高效液相色譜儀(包括四元泵、DAD二極管陣列檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器,安捷倫科技有限公司);UV-2550型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津);H.H.S6型電熱恒溫水浴鍋(上海浦東榮豐科學(xué)儀器有限公司);DHG-9240A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司);766-OAT型遠(yuǎn)紅外輻射干燥箱(上海錦屏儀器儀表有限公司通州分公司);BT214D和CP225D型電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)等。迷迭香酸對(duì)照品(純度≥98%)購(gòu)自成都曼思特生物科技有限公司,冬凌草甲素和蘆丁對(duì)照品(批號(hào)111721-200602,100080-200306)均購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。甲醇為色譜純,水為去離子水,其他試劑均為分析純。

        樣品:本試驗(yàn)所用3個(gè)品種溪黃草藥材均采自廣州白云山和記黃埔中藥有限公司溪黃草基地,經(jīng)廣東藥學(xué)院中藥學(xué)院李明教授鑒定為線紋香茶菜[Rabdosia lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don) Hara]、纖花香茶菜[Rabdosia lophanthoides (Buch.-Ham.ex D.Don) H.Hara var.graciliflora (Benth.) Hara]、溪黃草[Rabdosia serra (Maxim.) Hara]。

        1.2 ?方法

        1.2.1 ?樣品加工方法 ?3個(gè)品種藥材采收后隨機(jī)分組,采用不同的加工方法處理(表1)后粉碎并過(guò)60目篩,備用。

        1.2.2 ?迷迭香酸的含量測(cè)定

        1)色譜條件:Dikma Diamonsil(2)C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相為甲醇-0.2%磷酸水溶液(43∶57);柱溫25 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng)330 nm;流速1.0 mL/min,進(jìn)樣量10 μL。理論塔板數(shù)按迷迭香酸計(jì)應(yīng)不低于5 000,分離度大于1.5。

        2)對(duì)照品溶液的制備:精密稱取迷迭香酸對(duì)照品2.00 mg,置100 mL容量瓶中,加70%乙醇溶液稀釋制成0.02 mg/mL的溶液,搖勻,即得。

        3)供試品溶液的制備:取樣品粉末約0.1 g,精密稱定,置150 mL具塞錐形瓶中,加入70%乙醇溶液20 mL,搖勻,置85 ℃水浴加熱回流1 h,放冷,濾過(guò),用溶劑洗滌殘?jiān)?~3次,合并濾液,再用溶劑定容至25 mL容量瓶中。進(jìn)樣前過(guò)0.45 μm微孔濾膜,取續(xù)濾液供HPLC分析。按以上色譜條件得到對(duì)照品迷迭香酸和3個(gè)品種樣品色譜圖(圖1、圖2)。

        4)方法學(xué)驗(yàn)證:迷迭香酸進(jìn)樣量在0.04~0.60 μg時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為Y=2 801.8X+ 12.395(R2=0.999 9,n=6);精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.46%、1.07%、2.91%;平均回收率為100.9%,RSD為2.38%。

        1.2.3 ?總二萜、總黃酮的含量測(cè)定

        1)方法與條件:本試驗(yàn)采用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定總二萜和總黃酮的含量,以冬凌草甲素為對(duì)照品,在238 nm處測(cè)定總二萜的含量,以蘆丁為對(duì)照品,在257 nm處測(cè)定總黃酮的含量。

        2)對(duì)照品溶液的制備:①冬凌草甲素對(duì)照品溶液制備:精密稱取冬凌草甲素對(duì)照品5.07 mg,置于20 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得0.253 5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。②蘆丁對(duì)照品溶液制備:精密稱取蘆丁對(duì)照品15.08 mg,置于50 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得0.301 6 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        3)供試品溶液的制備:取本品粉末約1.0 g,精密稱定,置250 mL具塞錐形瓶中,加入50%乙醇溶液40 mL,搖勻,水浴回流45 min,放冷,濾過(guò),用溶劑洗滌殘?jiān)?~3次,合并濾液,用溶劑定容至50 mL容量瓶中,搖勻,精密吸取0.5 mL溶液,置于25 mL容量瓶中,再加溶劑稀釋至刻度,搖勻,即得。

        4)方法學(xué)驗(yàn)證:冬凌草甲素質(zhì)量濃度在 0.005 07~0.050 70 mg/mL時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為A1=25.032C1-0.000 2,R2=0.999 8;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.97%、2.36%、2.38%;平均回收率為99.89%,RSD為2.54%。蘆丁質(zhì)量濃度在0.003 77~0.060 32 mg/mL時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為A2=29.755C2-0.002 3,R2=0.999 9;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.34%、1.27%、1.82%;平均回收率為100.94%,RSD為2.09%。

        2 ?結(jié)果與分析

        不同加工方法的3個(gè)品種溪黃草藥材主要化學(xué)成分含量(以干燥品計(jì))測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn),不同加工方法對(duì)所有樣品3種化學(xué)成分的含量均有一定的影響,其中對(duì)迷迭香酸的含量影響較大,而對(duì)總二萜和總黃酮的含量影響不顯著。溪黃草品種所含迷迭香酸的量較其他兩個(gè)品種偏低,而3個(gè)品種所含總二萜和總黃酮的量差異較小。經(jīng)遠(yuǎn)紅外干燥和烘干工藝處理的樣品中3種成分的含量普遍偏低,經(jīng)陰干工藝處理的樣品中3種成分含量普遍偏高,這可能與高溫易破壞成分的結(jié)構(gòu)有關(guān),故陰干有助于提高溪黃草藥材的質(zhì)量,干燥前是否切段對(duì)成分的含量會(huì)產(chǎn)生一定的影響。

        溪黃草品種經(jīng)方法9處理的樣品3種成分的含量均最低,總含量為5.424%,其中迷迭香酸的含量?jī)H為0.034%,與最高含量組(方法8)0.554%相差近16倍,而總二萜和總黃酮的含量差異較小;經(jīng)方法3處理的樣品3種成分總含量最高,為9.425%,且總二萜和總黃酮含量均最高。線紋香茶菜品種經(jīng)方法1處理的樣品3種成分的含量均最低,總含量為7.184%,經(jīng)方法11處理的樣品3種成分的含量均最高,總含量為16.229%,兩種方法所得迷迭香酸的含量相差近11倍,而總二萜和總黃酮的含量相差1倍左右。纖花香茶菜品種經(jīng)方法9處理的樣品迷迭香酸含量最低,僅為0.064%,與最高組(方法11)1.124%相差近17倍,而經(jīng)方法2處理的樣品總二萜和總黃酮的含量均最低;經(jīng)方法11處理的樣品3種成分總含量最高,為11.299%。由此說(shuō)明,溪黃草藥材的產(chǎn)地前處理在一定程度上會(huì)影響該藥材的質(zhì)量。

        3 ?小結(jié)與討論

        干燥是中藥材生產(chǎn)與品質(zhì)形成的重要環(huán)節(jié),除少數(shù)需鮮用的藥材外,絕大多數(shù)新采的藥材均需經(jīng)過(guò)干燥才能成為合格的商品藥材。曬干是最常用、最簡(jiǎn)便、最經(jīng)濟(jì)的藥材干燥方法,多數(shù)藥材可用此法;陰干適用于不宜久曬或暴曬的藥材,如薄荷[12]、當(dāng)歸等;烘干由于溫度可控,不受天氣影響,效率高而被廣泛應(yīng)用,但熱風(fēng)干燥會(huì)使藥材的有效成分損失,甚至嚴(yán)重降低藥材品質(zhì);遠(yuǎn)紅外干燥適用于含水量大、有效成分對(duì)熱不穩(wěn)定、易腐爛變質(zhì)或貴重藥材及飲片的快速干燥,如鹿茸、西洋參等;微波干燥具有穿透力強(qiáng)、加熱均勻、反應(yīng)靈敏、熱效率高、有效成分破壞少等優(yōu)點(diǎn),但不適用于熱敏類成分的中藥,如人參、杭白菊[13]等;真空冷凍干燥能很好地保持中藥材的色、香、味,可最大程度地保留物料原有的天然品質(zhì),揮發(fā)性成分丟失少,但設(shè)備投資和運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用高、凍干時(shí)間長(zhǎng)、缺少在線快速檢測(cè)水分的手段;高壓電場(chǎng)干燥法干燥過(guò)程物料不升溫,干燥條件靈活可調(diào),伴有殺菌作用,設(shè)備造價(jià)低,節(jié)能,如赤芍、知母、厚樸[14]等的干燥可采用。中藥干燥技術(shù)各有優(yōu)劣,在具體應(yīng)用中要針對(duì)所干燥藥材的要求,采用最合適的加工方法。

        為了充分發(fā)揮中藥多成分性、多靶向性及多效應(yīng)性的特色和優(yōu)勢(shì),本試驗(yàn)依據(jù)溪黃草藥材中主要有效成分迷迭香酸、總二萜、總黃酮的收率進(jìn)行加工方法綜合評(píng)價(jià)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合產(chǎn)地加工條件的可行性、方法的簡(jiǎn)便性、經(jīng)濟(jì)性,筆者建議中藥溪黃草的產(chǎn)地加工方法如下:溪黃草品種采用鮮切段后再陰干的方法處理其品質(zhì)較佳;線紋香茶菜和纖花香茶菜采用陰干后再干切段的方法處理其品質(zhì)較佳。同屬藥材出現(xiàn)不同的最佳加工方法的結(jié)果可能與不同種的原因有關(guān)。本試驗(yàn)為尋找中藥溪黃草的最佳產(chǎn)地加工方法提供了數(shù)據(jù)支持,對(duì)于溪黃草藥材的產(chǎn)地加工和GAP基地的建設(shè)具有一定的指導(dǎo)意義,但溪黃草藥材加工方法的改變對(duì)其化學(xué)成分和藥效作用的影響的相關(guān)性還有待進(jìn)一步研究。

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        2)對(duì)照品溶液的制備:①冬凌草甲素對(duì)照品溶液制備:精密稱取冬凌草甲素對(duì)照品5.07 mg,置于20 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得0.253 5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。②蘆丁對(duì)照品溶液制備:精密稱取蘆丁對(duì)照品15.08 mg,置于50 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得0.301 6 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        3)供試品溶液的制備:取本品粉末約1.0 g,精密稱定,置250 mL具塞錐形瓶中,加入50%乙醇溶液40 mL,搖勻,水浴回流45 min,放冷,濾過(guò),用溶劑洗滌殘?jiān)?~3次,合并濾液,用溶劑定容至50 mL容量瓶中,搖勻,精密吸取0.5 mL溶液,置于25 mL容量瓶中,再加溶劑稀釋至刻度,搖勻,即得。

        4)方法學(xué)驗(yàn)證:冬凌草甲素質(zhì)量濃度在 0.005 07~0.050 70 mg/mL時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為A1=25.032C1-0.000 2,R2=0.999 8;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.97%、2.36%、2.38%;平均回收率為99.89%,RSD為2.54%。蘆丁質(zhì)量濃度在0.003 77~0.060 32 mg/mL時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為A2=29.755C2-0.002 3,R2=0.999 9;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.34%、1.27%、1.82%;平均回收率為100.94%,RSD為2.09%。

        2 ?結(jié)果與分析

        不同加工方法的3個(gè)品種溪黃草藥材主要化學(xué)成分含量(以干燥品計(jì))測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn),不同加工方法對(duì)所有樣品3種化學(xué)成分的含量均有一定的影響,其中對(duì)迷迭香酸的含量影響較大,而對(duì)總二萜和總黃酮的含量影響不顯著。溪黃草品種所含迷迭香酸的量較其他兩個(gè)品種偏低,而3個(gè)品種所含總二萜和總黃酮的量差異較小。經(jīng)遠(yuǎn)紅外干燥和烘干工藝處理的樣品中3種成分的含量普遍偏低,經(jīng)陰干工藝處理的樣品中3種成分含量普遍偏高,這可能與高溫易破壞成分的結(jié)構(gòu)有關(guān),故陰干有助于提高溪黃草藥材的質(zhì)量,干燥前是否切段對(duì)成分的含量會(huì)產(chǎn)生一定的影響。

        溪黃草品種經(jīng)方法9處理的樣品3種成分的含量均最低,總含量為5.424%,其中迷迭香酸的含量?jī)H為0.034%,與最高含量組(方法8)0.554%相差近16倍,而總二萜和總黃酮的含量差異較小;經(jīng)方法3處理的樣品3種成分總含量最高,為9.425%,且總二萜和總黃酮含量均最高。線紋香茶菜品種經(jīng)方法1處理的樣品3種成分的含量均最低,總含量為7.184%,經(jīng)方法11處理的樣品3種成分的含量均最高,總含量為16.229%,兩種方法所得迷迭香酸的含量相差近11倍,而總二萜和總黃酮的含量相差1倍左右。纖花香茶菜品種經(jīng)方法9處理的樣品迷迭香酸含量最低,僅為0.064%,與最高組(方法11)1.124%相差近17倍,而經(jīng)方法2處理的樣品總二萜和總黃酮的含量均最低;經(jīng)方法11處理的樣品3種成分總含量最高,為11.299%。由此說(shuō)明,溪黃草藥材的產(chǎn)地前處理在一定程度上會(huì)影響該藥材的質(zhì)量。

        3 ?小結(jié)與討論

        干燥是中藥材生產(chǎn)與品質(zhì)形成的重要環(huán)節(jié),除少數(shù)需鮮用的藥材外,絕大多數(shù)新采的藥材均需經(jīng)過(guò)干燥才能成為合格的商品藥材。曬干是最常用、最簡(jiǎn)便、最經(jīng)濟(jì)的藥材干燥方法,多數(shù)藥材可用此法;陰干適用于不宜久曬或暴曬的藥材,如薄荷[12]、當(dāng)歸等;烘干由于溫度可控,不受天氣影響,效率高而被廣泛應(yīng)用,但熱風(fēng)干燥會(huì)使藥材的有效成分損失,甚至嚴(yán)重降低藥材品質(zhì);遠(yuǎn)紅外干燥適用于含水量大、有效成分對(duì)熱不穩(wěn)定、易腐爛變質(zhì)或貴重藥材及飲片的快速干燥,如鹿茸、西洋參等;微波干燥具有穿透力強(qiáng)、加熱均勻、反應(yīng)靈敏、熱效率高、有效成分破壞少等優(yōu)點(diǎn),但不適用于熱敏類成分的中藥,如人參、杭白菊[13]等;真空冷凍干燥能很好地保持中藥材的色、香、味,可最大程度地保留物料原有的天然品質(zhì),揮發(fā)性成分丟失少,但設(shè)備投資和運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用高、凍干時(shí)間長(zhǎng)、缺少在線快速檢測(cè)水分的手段;高壓電場(chǎng)干燥法干燥過(guò)程物料不升溫,干燥條件靈活可調(diào),伴有殺菌作用,設(shè)備造價(jià)低,節(jié)能,如赤芍、知母、厚樸[14]等的干燥可采用。中藥干燥技術(shù)各有優(yōu)劣,在具體應(yīng)用中要針對(duì)所干燥藥材的要求,采用最合適的加工方法。

        為了充分發(fā)揮中藥多成分性、多靶向性及多效應(yīng)性的特色和優(yōu)勢(shì),本試驗(yàn)依據(jù)溪黃草藥材中主要有效成分迷迭香酸、總二萜、總黃酮的收率進(jìn)行加工方法綜合評(píng)價(jià)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合產(chǎn)地加工條件的可行性、方法的簡(jiǎn)便性、經(jīng)濟(jì)性,筆者建議中藥溪黃草的產(chǎn)地加工方法如下:溪黃草品種采用鮮切段后再陰干的方法處理其品質(zhì)較佳;線紋香茶菜和纖花香茶菜采用陰干后再干切段的方法處理其品質(zhì)較佳。同屬藥材出現(xiàn)不同的最佳加工方法的結(jié)果可能與不同種的原因有關(guān)。本試驗(yàn)為尋找中藥溪黃草的最佳產(chǎn)地加工方法提供了數(shù)據(jù)支持,對(duì)于溪黃草藥材的產(chǎn)地加工和GAP基地的建設(shè)具有一定的指導(dǎo)意義,但溪黃草藥材加工方法的改變對(duì)其化學(xué)成分和藥效作用的影響的相關(guān)性還有待進(jìn)一步研究。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 肖樹(shù)雄,楊啟存,呂 ?紅.溪黃草的來(lái)源及與混淆品的鑒別[J].中藥材,1993,16(6):24.

        [2] 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳.廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)(第二冊(cè))[M].南寧:廣西科學(xué)技術(shù)出版社,1996.279.

        [3] 吳德鄰.廣東植物志(第三卷)[M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社,1995.

        [4] 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志.第66卷[M].北京:科學(xué)出版社,1977.479.

        [5] 南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典(下冊(cè))[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2006.3541-3542.

        [6] 朱德全,黃 ?松,陳建南,等.不同品種、不同產(chǎn)地溪黃草咖啡酸與迷迭香酸的含量測(cè)定[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(2):114-117.

        [7] 王 ?虹,劉 ?敏,顧建祥,等.迷迭香酸對(duì)D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2009(5):549-551.

        [8] 胡英杰,賴小平,劉中秋,等.狹基線紋香茶菜(溪黃草)的化學(xué)成分與抗乙肝病毒作用研究[J].中草藥,2005,36(11):1612-1615.

        [9] ?曾令杰,梁 ?暉,謝曉萍.穿心蓮藥材干燥前后穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量變化研究[J].中成藥,2009,31(9):1399-1401.

        [10] 劉淑梅,孫濟(jì)平,彭小冰,等.不同產(chǎn)地加工方法對(duì)馬齒莧質(zhì)量影響的研究[J].貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,32(1):24-26.

        [11] 馮世鑫,馬小軍,閆志剛,等.加工方法對(duì)黃花蒿提取青蒿素含量的影響[J].廣西植物,2009,29(6):857-859.

        [12] 李培林,高學(xué)禮.淺談薄荷的采集和藥用[J].醫(yī)學(xué)信息,2010(9):2625-2626.

        [13] 楊秀偉,韓美華,陶海燕,等.微波加工和蒸制杭白菊揮發(fā)油成分的GC-MS分析[J].中國(guó)中藥雜志,2007,32(3):227-231.

        [14] 丁昌江,盧靜莉,梁運(yùn)章.高壓電場(chǎng)干燥中藥飲片的試驗(yàn)研究[J].內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2008,27(2):95-99.

        2)對(duì)照品溶液的制備:①冬凌草甲素對(duì)照品溶液制備:精密稱取冬凌草甲素對(duì)照品5.07 mg,置于20 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得0.253 5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。②蘆丁對(duì)照品溶液制備:精密稱取蘆丁對(duì)照品15.08 mg,置于50 mL容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得0.301 6 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        3)供試品溶液的制備:取本品粉末約1.0 g,精密稱定,置250 mL具塞錐形瓶中,加入50%乙醇溶液40 mL,搖勻,水浴回流45 min,放冷,濾過(guò),用溶劑洗滌殘?jiān)?~3次,合并濾液,用溶劑定容至50 mL容量瓶中,搖勻,精密吸取0.5 mL溶液,置于25 mL容量瓶中,再加溶劑稀釋至刻度,搖勻,即得。

        4)方法學(xué)驗(yàn)證:冬凌草甲素質(zhì)量濃度在 0.005 07~0.050 70 mg/mL時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為A1=25.032C1-0.000 2,R2=0.999 8;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.97%、2.36%、2.38%;平均回收率為99.89%,RSD為2.54%。蘆丁質(zhì)量濃度在0.003 77~0.060 32 mg/mL時(shí)線性關(guān)系良好,其回歸方程為A2=29.755C2-0.002 3,R2=0.999 9;精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性RSD分別為0.34%、1.27%、1.82%;平均回收率為100.94%,RSD為2.09%。

        2 ?結(jié)果與分析

        不同加工方法的3個(gè)品種溪黃草藥材主要化學(xué)成分含量(以干燥品計(jì))測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn),不同加工方法對(duì)所有樣品3種化學(xué)成分的含量均有一定的影響,其中對(duì)迷迭香酸的含量影響較大,而對(duì)總二萜和總黃酮的含量影響不顯著。溪黃草品種所含迷迭香酸的量較其他兩個(gè)品種偏低,而3個(gè)品種所含總二萜和總黃酮的量差異較小。經(jīng)遠(yuǎn)紅外干燥和烘干工藝處理的樣品中3種成分的含量普遍偏低,經(jīng)陰干工藝處理的樣品中3種成分含量普遍偏高,這可能與高溫易破壞成分的結(jié)構(gòu)有關(guān),故陰干有助于提高溪黃草藥材的質(zhì)量,干燥前是否切段對(duì)成分的含量會(huì)產(chǎn)生一定的影響。

        溪黃草品種經(jīng)方法9處理的樣品3種成分的含量均最低,總含量為5.424%,其中迷迭香酸的含量?jī)H為0.034%,與最高含量組(方法8)0.554%相差近16倍,而總二萜和總黃酮的含量差異較小;經(jīng)方法3處理的樣品3種成分總含量最高,為9.425%,且總二萜和總黃酮含量均最高。線紋香茶菜品種經(jīng)方法1處理的樣品3種成分的含量均最低,總含量為7.184%,經(jīng)方法11處理的樣品3種成分的含量均最高,總含量為16.229%,兩種方法所得迷迭香酸的含量相差近11倍,而總二萜和總黃酮的含量相差1倍左右。纖花香茶菜品種經(jīng)方法9處理的樣品迷迭香酸含量最低,僅為0.064%,與最高組(方法11)1.124%相差近17倍,而經(jīng)方法2處理的樣品總二萜和總黃酮的含量均最低;經(jīng)方法11處理的樣品3種成分總含量最高,為11.299%。由此說(shuō)明,溪黃草藥材的產(chǎn)地前處理在一定程度上會(huì)影響該藥材的質(zhì)量。

        3 ?小結(jié)與討論

        干燥是中藥材生產(chǎn)與品質(zhì)形成的重要環(huán)節(jié),除少數(shù)需鮮用的藥材外,絕大多數(shù)新采的藥材均需經(jīng)過(guò)干燥才能成為合格的商品藥材。曬干是最常用、最簡(jiǎn)便、最經(jīng)濟(jì)的藥材干燥方法,多數(shù)藥材可用此法;陰干適用于不宜久曬或暴曬的藥材,如薄荷[12]、當(dāng)歸等;烘干由于溫度可控,不受天氣影響,效率高而被廣泛應(yīng)用,但熱風(fēng)干燥會(huì)使藥材的有效成分損失,甚至嚴(yán)重降低藥材品質(zhì);遠(yuǎn)紅外干燥適用于含水量大、有效成分對(duì)熱不穩(wěn)定、易腐爛變質(zhì)或貴重藥材及飲片的快速干燥,如鹿茸、西洋參等;微波干燥具有穿透力強(qiáng)、加熱均勻、反應(yīng)靈敏、熱效率高、有效成分破壞少等優(yōu)點(diǎn),但不適用于熱敏類成分的中藥,如人參、杭白菊[13]等;真空冷凍干燥能很好地保持中藥材的色、香、味,可最大程度地保留物料原有的天然品質(zhì),揮發(fā)性成分丟失少,但設(shè)備投資和運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用高、凍干時(shí)間長(zhǎng)、缺少在線快速檢測(cè)水分的手段;高壓電場(chǎng)干燥法干燥過(guò)程物料不升溫,干燥條件靈活可調(diào),伴有殺菌作用,設(shè)備造價(jià)低,節(jié)能,如赤芍、知母、厚樸[14]等的干燥可采用。中藥干燥技術(shù)各有優(yōu)劣,在具體應(yīng)用中要針對(duì)所干燥藥材的要求,采用最合適的加工方法。

        為了充分發(fā)揮中藥多成分性、多靶向性及多效應(yīng)性的特色和優(yōu)勢(shì),本試驗(yàn)依據(jù)溪黃草藥材中主要有效成分迷迭香酸、總二萜、總黃酮的收率進(jìn)行加工方法綜合評(píng)價(jià)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合產(chǎn)地加工條件的可行性、方法的簡(jiǎn)便性、經(jīng)濟(jì)性,筆者建議中藥溪黃草的產(chǎn)地加工方法如下:溪黃草品種采用鮮切段后再陰干的方法處理其品質(zhì)較佳;線紋香茶菜和纖花香茶菜采用陰干后再干切段的方法處理其品質(zhì)較佳。同屬藥材出現(xiàn)不同的最佳加工方法的結(jié)果可能與不同種的原因有關(guān)。本試驗(yàn)為尋找中藥溪黃草的最佳產(chǎn)地加工方法提供了數(shù)據(jù)支持,對(duì)于溪黃草藥材的產(chǎn)地加工和GAP基地的建設(shè)具有一定的指導(dǎo)意義,但溪黃草藥材加工方法的改變對(duì)其化學(xué)成分和藥效作用的影響的相關(guān)性還有待進(jìn)一步研究。

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        [3] 吳德鄰.廣東植物志(第三卷)[M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社,1995.

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        [9] ?曾令杰,梁 ?暉,謝曉萍.穿心蓮藥材干燥前后穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量變化研究[J].中成藥,2009,31(9):1399-1401.

        [10] 劉淑梅,孫濟(jì)平,彭小冰,等.不同產(chǎn)地加工方法對(duì)馬齒莧質(zhì)量影響的研究[J].貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,32(1):24-26.

        [11] 馮世鑫,馬小軍,閆志剛,等.加工方法對(duì)黃花蒿提取青蒿素含量的影響[J].廣西植物,2009,29(6):857-859.

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        [14] 丁昌江,盧靜莉,梁運(yùn)章.高壓電場(chǎng)干燥中藥飲片的試驗(yàn)研究[J].內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2008,27(2):95-99.

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