王凱英 鮑 坤 徐 超 劉晗璐 劉學慶 李光玉*

(1.中國農業(yè)科學院特產研究所，長春 130112;2.特種經濟動物分子生物學國家重點實驗室，長春 130112)

烏蘇里貉(Nyctereutes procyonoides gtray)為雜食動物，人工養(yǎng)殖條件下多以海雜魚、碎肉、動物下雜等與谷物混合配制鮮料飼喂。鮮料有利于貉消化吸收，但是夏季氣溫較高，易發(fā)生飼料酸敗，引起采食量下降、營養(yǎng)吸收利用率降低、動物免疫機能減弱和疾病頻發(fā)，使生長發(fā)育、皮張質量等生產性能受到嚴重影響。傳統(tǒng)解決方法是添加抗氧化劑和抗生素等獸藥，然而藥物濫用不僅增加養(yǎng)殖成本，還會在畜體殘留累積，誘發(fā)細菌產生抗藥性，對環(huán)境污染、動物福利及生物安全隱患極大，已被漸漸叫停。飼料酸化技術能夠調節(jié)飼料pH，改善其適口性，調控消化道pH，提高消化酶活性，實現(xiàn)營養(yǎng)物質利用率提高;且能夠降低飼料氧化酸敗程度，促進消化道有益微生物生長，抑制有害細菌增殖，改善動物機體免疫狀況，提高畜禽生產性能，是替代傳統(tǒng)方式進行動物健康養(yǎng)殖的首選［1－6］。野生烏蘇里貉分布于中國東北、俄羅斯遠東和北朝鮮，人工養(yǎng)殖主要在我國且馴養(yǎng)歷史較短，貉飼料酸化技術尚屬空白，有待深入研究。本試驗以磷酸、檸檬酸、乳酸為研究對象，研究酸化劑對烏蘇里貉生產性能及血清生化指標的影響，篩選酸化劑的適宜添加種類及水平，為飼料酸化技術在養(yǎng)貉業(yè)中的應用提供支持。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

飼養(yǎng)試驗于2011年7月13日至2011年11月15日進行，在中國農業(yè)科學院特產研究所毛皮動物試驗基地進行。試驗期125 d。

1.2 試驗動物

選擇健康、體重相近、60日齡的雄性烏蘇里貉100 只，體重平均為(2 585.34±419.19)g，隨機分成10組，每組10只，組間體重無顯著差異(P＞0.05)，單籠飼養(yǎng)。

1.3 試驗設計

以膨化玉米、海雜魚、雞肝、雞腺胃、食鹽、預混料等配制基礎飼糧，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎飼糧;Ⅱ～Ⅹ組為試驗組，分別飼喂在基礎飼糧中添加 0.4%、0.6%、0.8%磷酸(濃度≥85%)，0.5%、1.0%、1.5%檸檬酸(濃度≥99.5%)，0.5%、1.0%、1.5%乳酸(濃度≥85%)的試驗飼糧。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

1.4 飼養(yǎng)管理

鮮飼料每日07:00統(tǒng)一加工，試驗動物由專人飼養(yǎng)，08:00、15:00各投喂1次，自由采食，保證飲水。

1.5 樣本收集

采集剛配制好的鮮料，30 min內帶回實驗室進行pH測定;在貉生長發(fā)育旺盛期于2011年9月10—13日進行消化代謝試驗，依據消化代謝試驗期干物質采食量(DMI)分析飼糧適口性;2011年11月8日進行空腹、靜脈無菌采血，14℃下4 000 r/min離心獲得血清，－20℃保存以備血清指標檢測;結合11月18日屠宰取皮獲得體長、皮長、體重、皮重、胴體重等生產性能指標。

1.6 測定指標及方法

采集好樣本30 min內應用Sartorius PB－10 pH計精確測定各組水貂飼料及胃、腸道食糜pH。應用相關血清生化指標測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)測定水貂血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、葡萄糖(GLU)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、免疫球蛋白 G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量。體重按空腹體重計算;胴體重按剝皮后包括內臟尸體重量計;鮮皮重為剛剝下未烘干皮張凈重，應用精確到0.1 g電子天平精確測量;體長、皮長均按鼻尖至尾根長度，用直尺精確測量，精確到毫米。

1.7 數據整理和分析

試驗結果以平均值±標準差表示，用Excel 2010對試驗數據進行整理，用SAS 6.12軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 酸化劑對貉飼料、胃液、腸液 pH及DMI的影響

由表2可見，與對照組相比，添加磷酸、檸檬酸、乳酸對貉飼料、胃液pH影響極顯著(P＜0.01)，Ⅳ組飼料pH最低，Ⅶ組胃液pH最低;添加磷酸、檸檬酸、乳酸對貉腸液pH無顯著影響(P＞0.05);貉DMI隨酸化劑添加水平增加呈先上升后下降趨勢，但與對照組相比酸化劑促進DMI增加明顯。

表2 酸化劑對貉飼料、胃液、腸液pH及干物質采食量的影響Table 2 Effects of acidifier on the pH of diet，gastric juice and intestine juice and dry matter intake of racoon dogs

2.2 酸化劑對貉生產性能的影響

由表3可見，與對照組相比，添加磷酸、檸檬酸、乳酸對貉體重、平均日增重、胴體重、體長、皮長及皮重無顯著影響(P＞0.05)，但酸化促進生產性能提高作用明顯，各生產性能指標均伴隨酸化劑添加水平增加呈先上升后下降的變化趨勢。

表3 酸化劑對貉生產性能的影響Table 3 Effects acidifier on performance of racoon dogs

2.3 酸化劑對貉血清生化指標的影響

由表4可見，血清TP含量與磷酸添加水平呈負相關，隨檸檬酸和乳酸添加水平增加則呈先下降后升高趨勢，Ⅳ組極顯著低于對照組(P＜0.01)，Ⅲ組顯著低于對照組(P＜0.05)。血清ALB含量隨檸檬酸和乳酸添加水平增加呈而下降趨勢，Ⅲ、Ⅳ組極顯著高于對照組(P＜0.01)。各組血清UN和GLU含量無顯著差異(P＞0.05)，但隨酸化劑添加水平升高而呈先升高后降低趨勢。血清IgG含量與磷酸和檸檬酸添加水平呈負相關，隨著乳酸添加水平增長呈現(xiàn)先升高后下降趨勢。各組血清IgM、T3、T4含量無顯著差異(P＞0.05)，血清 T3、T4含量變化趨勢一致，均隨磷酸添加水平增加呈先升高后降低趨勢，隨檸檬酸添加水平增加呈升高趨勢，隨乳酸添加水平增加呈先降低再升高趨勢。

表4 酸化劑對貉血清生化指標的影響Table 4 Effects of acidifier on serum biochemical indices of racoon dogs

3 討論

3.1 酸化劑對貉飼料、胃液、腸液 pH及DMI的影響

酸化劑給飼料帶來酸性物質，隨著其添加水平的增長，酸濃度也直線提高，這就使得飼料pH與酸化劑添加水平呈負相關，且與酸化劑添加水平及酸本身特點如強度成正比，所以1.5%乳酸組pH為各組最低;胃內容物pH受到食物因素和動物胃液分泌水平的雙重影響，本試驗1.5%乳酸組飼料pH最低，而胃液pH不是最低，可能是因為乳酸除具有酸化劑的特征外，還直接參加機體營養(yǎng)物質循環(huán)，更容易被吸收利用，導致濃度降低，而檸檬酸是3種酸化劑中唯一的固態(tài)酸，緩慢溶解延后釋放，可能是其胃液pH最低的另一原因。腸道是機體進行營養(yǎng)物質吸收的主要場所，其基本環(huán)境為堿性，如其基本平衡未被打破，其對外界影響的緩沖作用是強大的，所以各組間腸液pH均為近中性，組間差異不顯著。DMI是動物狀態(tài)、環(huán)境和飼糧條件綜合作用的結果，本研究中動物體況無差異并在相同環(huán)境下養(yǎng)殖，所以DMI差異是由飼糧條件即適口性造成的，適宜水平酸化劑使飼料適口性更佳，刺激動物味蕾，促進采食，而酸化劑添加水平過高，則影響適口性，DMI隨之下降。以上結果與王凱英等［7］在水貂、Zhu等［8］和兔上的研究結果一致。

3.2 酸化劑對貉生產性能的影響

體重、平均日增重、胴體重、體長、皮長、皮重等是貉生產性能的主要考核指標，本試驗結果顯示酸化劑促進貉體重增長，獲得更大尺碼皮張趨勢明顯，這可能是因為酸化劑改善飼料適口性，提高了采食量;另外，適宜的酸化劑水平可優(yōu)化消化道酶活性，提高營養(yǎng)物質消化利用率;研究表明酸性環(huán)境可有效抑制飼料中有害微生物生長，機體健康狀況得以改善［9］。因此可確認酸化劑可促進生產性能提高，同時酸化劑水平超過機體適宜范圍就會導致飼料適口性降低、采食量及營養(yǎng)物質消化利用率下降等一系列副作用，這與Gunal等［10］、Valencia 等［11］、王凱英等［12－13］之前在肉雞、仔豬、貂上研究的變化趨勢一致?？梢娝峄瘎焉a性能提高作用是明顯的，而無論磷酸、檸檬酸還是乳酸，均有其適宜使用范圍。

3.3 酸化劑對貉血清生化指標的影響

血清生化指標是動物關鍵的指標體系，是機體對營養(yǎng)狀況、健康水平、生產性能的反饋，是以上關鍵指標的有力印證。TP、ALB含量升高可能是飼糧蛋白質水平或利用率提高的結果，也可能是動物健康狀況惡化，如機體大量失水導致的，綜合分析本試驗飼料營養(yǎng)水平、營養(yǎng)動物健康狀況等，可知本研究結果的直接原因是營養(yǎng)利用率提高。Borg 等［14］和 Malmlof［15］研究指出，UN 含量可以準確反映動物體內蛋白質代謝和氨基酸之間的平衡狀況，較低的UN含量表明氨基酸平衡良好，機體蛋白質合成率較高，本研究中UN含量隨酸化劑添加水平增加呈先降低后升高的變化趨勢，正好印證了在適宜的添加范圍內酸化劑能夠促進蛋白質的消化率用，超過適宜水平則會影響機體消化、代謝機能，導致機體蛋白質合成下降。GLU含量可反映營養(yǎng)物質轉化吸收及合成代謝水平，酸化劑水平適宜時GLU含量升高，超過適宜水平時合成代謝下降，GLU含量降低，這與TP、ALB、UN含量變化特點是相符的。T3、T4是甲狀腺主要分泌成分，能促進機體生長發(fā)育，適宜水平的酸化劑能提高采食量，促進營養(yǎng)消化利用，改善機體營養(yǎng)狀況，促進甲狀腺素分泌水平提高，但當酸化劑添加水平過高造成不良影響時，T3、T4含量隨之下降，印證了刁慧等［16］在仔豬上的研究結果。本研究中IgG、IgM含量結果表明，適宜水平的酸化劑有益機體健康水平的提高，其變化規(guī)律有效的印證了Griminge［17］關于血清中高球蛋白含量意味著機體具有更強的疾病抵抗能力和免疫應答功能的論述。

4 結 論

酸化劑可顯著降低貉飼料及胃液pH，對腸液pH無顯著影響;可明顯改善貉飼料適口性，促進DMI增長;可顯著提高貉生產性能，提高機體免疫力。分析可知，貉飼糧添加1.0%乳酸綜合效果最佳。

［1］ LIU ST，HOU W X，CHENG SY，et al.Effects of dietary citric acid on performance，digestibility of calcium and phosphorus，milk composition and immunoglobulin in sows during late gestation and lactation［J］.Animal Feed Science and Technology，2014，191:67－75.

［2］ LEE D N，LIU S R，CHEN Y T，et al.Effects of diets supplemented with organic acids and nucleotides on growth，immune responses and digestive tract development in weaned pigs［J］.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，2007，91(11/12):508－518.

［3］ NAMKUNG H，LI M，GONG J，et al.Impact of feeding blends of organic acids and herbal extracts on growth performance，gut microbiota and digestive function in newly weaned pigs［J］.Canadian Journal of Animal Science，2004，84(4):697－704.

［4］ GERRITSEN R，VAN DIJK A J，RETHY K，et al.The effect of blends of organic acids on apparent faecal digestibility in piglets［J］.Livestock Science，2010，134(1/2/3):246－248.

［5］ HANSEN C F，RIIS A L，BRESSON S，et al.Feeding organic acids enhances the barrier function against pathogenic bacteria of the piglet stomach［J］.Livestock Science，2007，108(1/2/3):206－209.

［6］ 王淑琴.檸檬酸對肉仔雞生長、免疫、消化道及血液相關指標的影響［D］.碩士學位論文.呼和浩特:內蒙古農業(yè)大學，2010.

［7］ 王凱英，李光玉，鮑坤，等.琥珀酸對水貂胃蛋白酶活性、營養(yǎng)物質消化率及生產性能的影響［J］.東北農業(yè)大學學報，2011，42(9):67－71.

［8］ ZHU K H，XU X R，SUN D F，et al.Effects of drinking water acidification by organic acidifier on growth performance，digestive enzyme activity and caecal bacteria in growing rabbits［J］.Animal Feed Science and Technology，2014，190:87－94.

［9］ LUCKSTADT C.Synergistic acidifiers to fight salmonella［J］.Feed Mix，2005，13(1):28－30.

［10］ GUNAL M，YAYLI G，KAYA O，et al.The effects of antibiotic growth promoter，probiotic or organic acid supplementation on performance，intestinal microflora and tissue of broilers［J］.International Journal of Poultry Science，2006，5(2):149－155.

［11］ VALENCIA Z，SC M，CHAVEZ E R，et al.Phytase and acetic acid supplementation in the diet of early weaned piglets:effect on performance and apparent nutrient digestibility［J］.Nutrition Research，2002，22(5):623－632.

［12］ 王凱英，李光玉，畢世丹，等.琥珀酸對水貂冬毛生長期生長發(fā)育性狀和某些血液生化指標影響的研究［J］.特產研究，2009(4):9－12，15.

［13］ 王凱英，鮑坤，徐超，等.飼料酸化劑對冬毛期水貂生產性能和血清生化指標的影響［J］.東北農業(yè)大學學報，2012，43(12):78－85.

［14］ BORG B S，LIBAL G W，WAHLSTROM R C.Tryptophan and threonine requirements of young pigs and their effects on serum calcium，phosphorus and zinc concentrations［J］.Journal of Animal Science，1987，64(4):1070－1078.

［15］ MALMLOF K.Amino acid in farm animal nutrition metabolism，partition and consequences of imbalance［J］.Swedish Journal of Agriculture Research，1988，18(4):191－193.

［16］ 刁慧，鄭萍，余冰，等.苯甲酸對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標、養(yǎng)分消化率和空腸食糜消化酶活性的影響［J］.動物營養(yǎng)學報，2013，25(4):768－777.

［17］ GRIMINGER P.Lipid metabolism［M］//STURKIE P D.Avian physiology.New York:Springer-Verlag，1986.