賈秋紅

摘 要：2013年7月，陜西省漢中某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生以大鯢體表和四肢多處潰爛并伴有出血為特征的疾病，染病大鯢大量死亡。經(jīng)臨床觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最后確診病原為大鯢虹彩病毒。通過(guò)采取綜合防治措施，養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢疫情得到有效控制。

關(guān)鍵詞：大鯢虹彩病毒；診斷；防治

大鯢（Andrias davidianus），俗稱娃娃魚(yú)，屬兩棲綱有尾目隱鰓鯢科，是我國(guó)特有的珍稀有尾兩棲動(dòng)物，為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，有很重要的科研價(jià)值及藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近年來(lái)，隨著大鯢人工養(yǎng)殖不斷發(fā)展，各種疾病也不斷暴發(fā)，尤其是病毒性疾病，給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。2013年7月，陜西省商洛市洛南縣某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了以大鯢體表和四肢多處潰爛、充血及出血為特征的疾病，經(jīng)過(guò)臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，診斷病原為大鯢虹彩病毒。現(xiàn)將診治結(jié)果報(bào)道如下。

1 基本情況及臨床癥狀

2013年7月，陜西省商洛某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢突發(fā)異常，行動(dòng)緩慢，攝食減少，前、后肢嚴(yán)重腫脹、潰爛且局部出血，采用肌肉注射青霉素和慶大霉素、頭孢噻吩以及中藥浸泡等治療措施均無(wú)效，并在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡，且隨著時(shí)間的推移，死亡數(shù)量越來(lái)越大。

2 病理剖檢

對(duì)病死大鯢進(jìn)行病理剖檢，其結(jié)果如下：病死大鯢頭部、前、后肢、尾部嚴(yán)重潰爛、腫脹，頸部、腹部、下頜均有大量出血點(diǎn)，腹腔內(nèi)有淡黃色的積水，肝臟腫大且松軟無(wú)彈性，膽囊充盈，脾臟、腎臟腫大有白點(diǎn)。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

3.1 患病大鯢虹彩病毒的細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)

取病死大鯢的肝、腎組織各0.5 g于研磨器中加入2 mL無(wú)菌水在低溫下研磨制成懸液，轉(zhuǎn)移至15 mL離心管，放入-80 ℃反復(fù)凍融3次，然后轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中，12 000 r/min離心5 min，取上清液作為病毒提取液備用。取一瓶已培養(yǎng)了48 h的EPC細(xì)胞，棄去培養(yǎng)液，吸取0.2 mL病毒提取液接種到此培養(yǎng)瓶中，吸附1 h，加入含2%胎牛血清的MEM培養(yǎng)液于25 ℃培養(yǎng)，同時(shí)做空白對(duì)照，24 h有CPE反應(yīng)，72 h后CPE反應(yīng)強(qiáng)烈，細(xì)胞已完全脫落，確定患病大鯢為病毒感染，見(jiàn)圖1和圖2。

3.2 患病大鯢虹彩病毒的PCR檢測(cè)

取前面已經(jīng)制備的病毒提取液和陽(yáng)性對(duì)照病毒株（陽(yáng)性對(duì)照病毒株選用本實(shí)驗(yàn)室分離的大鯢虹彩病毒（Chinese giant salamander iridovirus，CGSIV））。按照病毒DNA小劑量抽提試劑盒的說(shuō)明書提取組織和細(xì)胞分離病毒的DNA。

根據(jù)GenBank已發(fā)表的蛙病毒屬的代表種FV3主衣殼蛋白（MCP）基因高度保守區(qū)序列（登錄號(hào)：AY548484）設(shè)計(jì)引物用于檢測(cè)，引物由寶生物工程（大連）有限公司合成。序列如下：

CGS-T-F：5′-GACTTGGCCACTTATGAC-3′；

CGS-T-R：5′-GTCTCTGGAGAAGAAGAA-3′；

總體積為25 μL的反應(yīng)體系為：0.25 μL TaKaRa Ex Taq（5U/μL），2.5 μL 10×Ex Taq Buffer（Mg2+ Plus），0.25 nmol/L dNTPs 1 μL，引物 （50 pmol/L）各0.5 μL，DNA模板3 μL，反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)處理3 min，進(jìn)行30個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)反應(yīng)包括 95 ℃ 30 s，52 ℃ 30 s，72 ℃ 1.5 min，循環(huán)完成后，72 ℃充分延伸10 min。

PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳，用Gene-Genius凝膠成像系統(tǒng)拍照，病鯢病毒提取液檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，確定患病大鯢為虹彩病毒（CGSIV）感染，見(jiàn)圖3。

經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生的以大鯢體表和四肢腫大、多處潰爛、充血、出血為特征的疾病，診斷為大鯢虹彩病毒（CGSIV）感染的病毒病。

1：標(biāo)準(zhǔn)病毒擴(kuò)增結(jié)果；2：陰性對(duì)照；3：病鯢病毒提取液擴(kuò)增結(jié)果。4 診斷結(jié)果圖3 結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)病毒株P(guān)CR檢測(cè)對(duì)比

5 防治措施

確診后，將患病大鯢與健康大鯢進(jìn)行嚴(yán)格隔離，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖用具等用聚維酮碘和高錳酸鉀徹底消毒。對(duì)餌料魚(yú)用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡，對(duì)未患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗0.2 mL/kg，每隔2周注射一次，連續(xù)注射3次。對(duì)患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗，注射量為0.2 mL/kg·次，每隔2周注射一次，連續(xù)注射3次，期間再注射我們自制的中西藥結(jié)合的抗病毒藥物，注射量為2 mL/kg·次，連續(xù)注射三天。用藥一周后死亡數(shù)量逐漸減少。兩周后，已無(wú)死亡現(xiàn)象，發(fā)病的大鯢部分開(kāi)始攝食，疫情得到了有效的遏制。

6 討論

該養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢被確診為大鯢虹彩病毒感染，大鯢虹彩病毒（CGS1V）是虹彩病毒科Iridoviridae蛙病毒屬Ranavirus中的一種，為雙鏈DNA 病毒，其感染率和死亡率都很高；一旦發(fā)病，只能通過(guò)注射一些增強(qiáng)免疫和消炎的藥物，治標(biāo)不治本，往往會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的損失。要想遏制病毒病的發(fā)生最有效的方法是提前注射疫苗。目前我們已經(jīng)研制成功針對(duì)大鯢虹彩病毒的滅活疫苗。通過(guò)注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗，可以有效預(yù)防大鯢虹彩病毒病的發(fā)生，降低養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

在對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病大鯢進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí)，我們選用的檢測(cè)方法有細(xì)胞擴(kuò)增和PCR檢測(cè)兩種。通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)，即使很微量的病毒量也可以檢測(cè)出，但此方法只能確定是病毒感染而不能確定是那種病毒感染，而PCR檢測(cè)方法通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)病毒進(jìn)行對(duì)照，可以確定感染病毒的具體種類，但此方法由于檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣，常會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”或“假陰性”結(jié)果。通過(guò)兩種方法的結(jié)合使用，揚(yáng)長(zhǎng)辟短可以大大提高檢測(cè)虹彩病毒的準(zhǔn)確性。

摘 要：2013年7月，陜西省漢中某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生以大鯢體表和四肢多處潰爛并伴有出血為特征的疾病，染病大鯢大量死亡。經(jīng)臨床觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最后確診病原為大鯢虹彩病毒。通過(guò)采取綜合防治措施，養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢疫情得到有效控制。

關(guān)鍵詞：大鯢虹彩病毒；診斷；防治

大鯢（Andrias davidianus），俗稱娃娃魚(yú)，屬兩棲綱有尾目隱鰓鯢科，是我國(guó)特有的珍稀有尾兩棲動(dòng)物，為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，有很重要的科研價(jià)值及藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近年來(lái)，隨著大鯢人工養(yǎng)殖不斷發(fā)展，各種疾病也不斷暴發(fā)，尤其是病毒性疾病，給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。2013年7月，陜西省商洛市洛南縣某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了以大鯢體表和四肢多處潰爛、充血及出血為特征的疾病，經(jīng)過(guò)臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，診斷病原為大鯢虹彩病毒?，F(xiàn)將診治結(jié)果報(bào)道如下。

1 基本情況及臨床癥狀

2013年7月，陜西省商洛某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢突發(fā)異常，行動(dòng)緩慢，攝食減少，前、后肢嚴(yán)重腫脹、潰爛且局部出血，采用肌肉注射青霉素和慶大霉素、頭孢噻吩以及中藥浸泡等治療措施均無(wú)效，并在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡，且隨著時(shí)間的推移，死亡數(shù)量越來(lái)越大。

2 病理剖檢

對(duì)病死大鯢進(jìn)行病理剖檢，其結(jié)果如下：病死大鯢頭部、前、后肢、尾部嚴(yán)重潰爛、腫脹，頸部、腹部、下頜均有大量出血點(diǎn)，腹腔內(nèi)有淡黃色的積水，肝臟腫大且松軟無(wú)彈性，膽囊充盈，脾臟、腎臟腫大有白點(diǎn)。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

3.1 患病大鯢虹彩病毒的細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)

取病死大鯢的肝、腎組織各0.5 g于研磨器中加入2 mL無(wú)菌水在低溫下研磨制成懸液，轉(zhuǎn)移至15 mL離心管，放入-80 ℃反復(fù)凍融3次，然后轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中，12 000 r/min離心5 min，取上清液作為病毒提取液備用。取一瓶已培養(yǎng)了48 h的EPC細(xì)胞，棄去培養(yǎng)液，吸取0.2 mL病毒提取液接種到此培養(yǎng)瓶中，吸附1 h，加入含2%胎牛血清的MEM培養(yǎng)液于25 ℃培養(yǎng)，同時(shí)做空白對(duì)照，24 h有CPE反應(yīng)，72 h后CPE反應(yīng)強(qiáng)烈，細(xì)胞已完全脫落，確定患病大鯢為病毒感染，見(jiàn)圖1和圖2。

3.2 患病大鯢虹彩病毒的PCR檢測(cè)

取前面已經(jīng)制備的病毒提取液和陽(yáng)性對(duì)照病毒株（陽(yáng)性對(duì)照病毒株選用本實(shí)驗(yàn)室分離的大鯢虹彩病毒（Chinese giant salamander iridovirus，CGSIV））。按照病毒DNA小劑量抽提試劑盒的說(shuō)明書提取組織和細(xì)胞分離病毒的DNA。

根據(jù)GenBank已發(fā)表的蛙病毒屬的代表種FV3主衣殼蛋白（MCP）基因高度保守區(qū)序列（登錄號(hào)：AY548484）設(shè)計(jì)引物用于檢測(cè)，引物由寶生物工程（大連）有限公司合成。序列如下：

CGS-T-F：5′-GACTTGGCCACTTATGAC-3′；

CGS-T-R：5′-GTCTCTGGAGAAGAAGAA-3′；

總體積為25 μL的反應(yīng)體系為：0.25 μL TaKaRa Ex Taq（5U/μL），2.5 μL 10×Ex Taq Buffer（Mg2+ Plus），0.25 nmol/L dNTPs 1 μL，引物 （50 pmol/L）各0.5 μL，DNA模板3 μL，反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)處理3 min，進(jìn)行30個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)反應(yīng)包括 95 ℃ 30 s，52 ℃ 30 s，72 ℃ 1.5 min，循環(huán)完成后，72 ℃充分延伸10 min。

PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳，用Gene-Genius凝膠成像系統(tǒng)拍照，病鯢病毒提取液檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，確定患病大鯢為虹彩病毒（CGSIV）感染，見(jiàn)圖3。

經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生的以大鯢體表和四肢腫大、多處潰爛、充血、出血為特征的疾病，診斷為大鯢虹彩病毒（CGSIV）感染的病毒病。

1：標(biāo)準(zhǔn)病毒擴(kuò)增結(jié)果；2：陰性對(duì)照；3：病鯢病毒提取液擴(kuò)增結(jié)果。4 診斷結(jié)果圖3 結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)病毒株P(guān)CR檢測(cè)對(duì)比

5 防治措施

確診后，將患病大鯢與健康大鯢進(jìn)行嚴(yán)格隔離，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖用具等用聚維酮碘和高錳酸鉀徹底消毒。對(duì)餌料魚(yú)用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡，對(duì)未患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗0.2 mL/kg，每隔2周注射一次，連續(xù)注射3次。對(duì)患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗，注射量為0.2 mL/kg·次，每隔2周注射一次，連續(xù)注射3次，期間再注射我們自制的中西藥結(jié)合的抗病毒藥物，注射量為2 mL/kg·次，連續(xù)注射三天。用藥一周后死亡數(shù)量逐漸減少。兩周后，已無(wú)死亡現(xiàn)象，發(fā)病的大鯢部分開(kāi)始攝食，疫情得到了有效的遏制。

6 討論

該養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢被確診為大鯢虹彩病毒感染，大鯢虹彩病毒（CGS1V）是虹彩病毒科Iridoviridae蛙病毒屬Ranavirus中的一種，為雙鏈DNA 病毒，其感染率和死亡率都很高；一旦發(fā)病，只能通過(guò)注射一些增強(qiáng)免疫和消炎的藥物，治標(biāo)不治本，往往會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的損失。要想遏制病毒病的發(fā)生最有效的方法是提前注射疫苗。目前我們已經(jīng)研制成功針對(duì)大鯢虹彩病毒的滅活疫苗。通過(guò)注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗，可以有效預(yù)防大鯢虹彩病毒病的發(fā)生，降低養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

在對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病大鯢進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí)，我們選用的檢測(cè)方法有細(xì)胞擴(kuò)增和PCR檢測(cè)兩種。通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)，即使很微量的病毒量也可以檢測(cè)出，但此方法只能確定是病毒感染而不能確定是那種病毒感染，而PCR檢測(cè)方法通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)病毒進(jìn)行對(duì)照，可以確定感染病毒的具體種類，但此方法由于檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣，常會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”或“假陰性”結(jié)果。通過(guò)兩種方法的結(jié)合使用，揚(yáng)長(zhǎng)辟短可以大大提高檢測(cè)虹彩病毒的準(zhǔn)確性。

摘 要：2013年7月，陜西省漢中某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生以大鯢體表和四肢多處潰爛并伴有出血為特征的疾病，染病大鯢大量死亡。經(jīng)臨床觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最后確診病原為大鯢虹彩病毒。通過(guò)采取綜合防治措施，養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢疫情得到有效控制。

關(guān)鍵詞：大鯢虹彩病毒；診斷；防治

大鯢（Andrias davidianus），俗稱娃娃魚(yú)，屬兩棲綱有尾目隱鰓鯢科，是我國(guó)特有的珍稀有尾兩棲動(dòng)物，為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物，有很重要的科研價(jià)值及藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近年來(lái)，隨著大鯢人工養(yǎng)殖不斷發(fā)展，各種疾病也不斷暴發(fā)，尤其是病毒性疾病，給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。2013年7月，陜西省商洛市洛南縣某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了以大鯢體表和四肢多處潰爛、充血及出血為特征的疾病，經(jīng)過(guò)臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，診斷病原為大鯢虹彩病毒?，F(xiàn)將診治結(jié)果報(bào)道如下。

1 基本情況及臨床癥狀

2013年7月，陜西省商洛某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢突發(fā)異常，行動(dòng)緩慢，攝食減少，前、后肢嚴(yán)重腫脹、潰爛且局部出血，采用肌肉注射青霉素和慶大霉素、頭孢噻吩以及中藥浸泡等治療措施均無(wú)效，并在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡，且隨著時(shí)間的推移，死亡數(shù)量越來(lái)越大。

2 病理剖檢

對(duì)病死大鯢進(jìn)行病理剖檢，其結(jié)果如下：病死大鯢頭部、前、后肢、尾部嚴(yán)重潰爛、腫脹，頸部、腹部、下頜均有大量出血點(diǎn)，腹腔內(nèi)有淡黃色的積水，肝臟腫大且松軟無(wú)彈性，膽囊充盈，脾臟、腎臟腫大有白點(diǎn)。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

3.1 患病大鯢虹彩病毒的細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)

取病死大鯢的肝、腎組織各0.5 g于研磨器中加入2 mL無(wú)菌水在低溫下研磨制成懸液，轉(zhuǎn)移至15 mL離心管，放入-80 ℃反復(fù)凍融3次，然后轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中，12 000 r/min離心5 min，取上清液作為病毒提取液備用。取一瓶已培養(yǎng)了48 h的EPC細(xì)胞，棄去培養(yǎng)液，吸取0.2 mL病毒提取液接種到此培養(yǎng)瓶中，吸附1 h，加入含2%胎牛血清的MEM培養(yǎng)液于25 ℃培養(yǎng)，同時(shí)做空白對(duì)照，24 h有CPE反應(yīng)，72 h后CPE反應(yīng)強(qiáng)烈，細(xì)胞已完全脫落，確定患病大鯢為病毒感染，見(jiàn)圖1和圖2。

3.2 患病大鯢虹彩病毒的PCR檢測(cè)

取前面已經(jīng)制備的病毒提取液和陽(yáng)性對(duì)照病毒株（陽(yáng)性對(duì)照病毒株選用本實(shí)驗(yàn)室分離的大鯢虹彩病毒（Chinese giant salamander iridovirus，CGSIV））。按照病毒DNA小劑量抽提試劑盒的說(shuō)明書提取組織和細(xì)胞分離病毒的DNA。

根據(jù)GenBank已發(fā)表的蛙病毒屬的代表種FV3主衣殼蛋白（MCP）基因高度保守區(qū)序列（登錄號(hào)：AY548484）設(shè)計(jì)引物用于檢測(cè)，引物由寶生物工程（大連）有限公司合成。序列如下：

CGS-T-F：5′-GACTTGGCCACTTATGAC-3′；

CGS-T-R：5′-GTCTCTGGAGAAGAAGAA-3′；

總體積為25 μL的反應(yīng)體系為：0.25 μL TaKaRa Ex Taq（5U/μL），2.5 μL 10×Ex Taq Buffer（Mg2+ Plus），0.25 nmol/L dNTPs 1 μL，引物 （50 pmol/L）各0.5 μL，DNA模板3 μL，反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)處理3 min，進(jìn)行30個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)反應(yīng)包括 95 ℃ 30 s，52 ℃ 30 s，72 ℃ 1.5 min，循環(huán)完成后，72 ℃充分延伸10 min。

PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳，用Gene-Genius凝膠成像系統(tǒng)拍照，病鯢病毒提取液檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，確定患病大鯢為虹彩病毒（CGSIV）感染，見(jiàn)圖3。

經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生的以大鯢體表和四肢腫大、多處潰爛、充血、出血為特征的疾病，診斷為大鯢虹彩病毒（CGSIV）感染的病毒病。

1：標(biāo)準(zhǔn)病毒擴(kuò)增結(jié)果；2：陰性對(duì)照；3：病鯢病毒提取液擴(kuò)增結(jié)果。4 診斷結(jié)果圖3 結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)病毒株P(guān)CR檢測(cè)對(duì)比

5 防治措施

確診后，將患病大鯢與健康大鯢進(jìn)行嚴(yán)格隔離，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖用具等用聚維酮碘和高錳酸鉀徹底消毒。對(duì)餌料魚(yú)用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡，對(duì)未患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗0.2 mL/kg，每隔2周注射一次，連續(xù)注射3次。對(duì)患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗，注射量為0.2 mL/kg·次，每隔2周注射一次，連續(xù)注射3次，期間再注射我們自制的中西藥結(jié)合的抗病毒藥物，注射量為2 mL/kg·次，連續(xù)注射三天。用藥一周后死亡數(shù)量逐漸減少。兩周后，已無(wú)死亡現(xiàn)象，發(fā)病的大鯢部分開(kāi)始攝食，疫情得到了有效的遏制。

6 討論

該養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢被確診為大鯢虹彩病毒感染，大鯢虹彩病毒（CGS1V）是虹彩病毒科Iridoviridae蛙病毒屬Ranavirus中的一種，為雙鏈DNA 病毒，其感染率和死亡率都很高；一旦發(fā)病，只能通過(guò)注射一些增強(qiáng)免疫和消炎的藥物，治標(biāo)不治本，往往會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的損失。要想遏制病毒病的發(fā)生最有效的方法是提前注射疫苗。目前我們已經(jīng)研制成功針對(duì)大鯢虹彩病毒的滅活疫苗。通過(guò)注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗，可以有效預(yù)防大鯢虹彩病毒病的發(fā)生，降低養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

在對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病大鯢進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí)，我們選用的檢測(cè)方法有細(xì)胞擴(kuò)增和PCR檢測(cè)兩種。通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)，即使很微量的病毒量也可以檢測(cè)出，但此方法只能確定是病毒感染而不能確定是那種病毒感染，而PCR檢測(cè)方法通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)病毒進(jìn)行對(duì)照，可以確定感染病毒的具體種類，但此方法由于檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣，常會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”或“假陰性”結(jié)果。通過(guò)兩種方法的結(jié)合使用，揚(yáng)長(zhǎng)辟短可以大大提高檢測(cè)虹彩病毒的準(zhǔn)確性。