周建華，馮娜，高敏

（山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東濟南250014）

金銀花為忍冬科多年生半常綠纏繞植物忍冬的花蕾，味甘、性寒，金銀花提取物的主要化學(xué)成分之一綠原酸能夠促進膽汁分泌，金銀花提取物中的三萜皂苷對小鼠肝損傷有顯著保護作用，忍冬總皂苷能夠抑制肝中毒后血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的升高[1]，具有清熱解毒、保肝利膽[2]，清除自由基等多種功效，是我國的傳統(tǒng)用藥，金銀花在食用之初即被認為是一種“藥食同源”的綠色天然植物[3]。

葛花為豆科蝶形花亞科植物野葛的干燥花蕾?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，葛花中的異黃酮能通過調(diào)節(jié)代謝和內(nèi)分泌系統(tǒng)來改善酒精引起的異常癥狀[4]，能改善急性酒精中毒癥狀，減少酒精依賴性動物的自發(fā)性酒精攝入量，對酒精和四氯化碳致肝損傷均具有一定的保護作用[5]，是傳統(tǒng)的解酒中藥。

蜂蜜是昆蟲蜜蜂從開花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中釀制的蜜。蜂蜜的糖類包括葡萄糖（24.73%～46.40%）、果糖（24.35%～48.16%）、蔗糖（0～11.00%）和麥芽糖（0～6.00%）等，總含量為75%～80%；灰分0.03%～0.09%左右；還有微量的維生素、氨基酸類、酶類、酵母、花粉粒和蠟質(zhì)等物質(zhì)。傳統(tǒng)中醫(yī)認為蜂蜜有很好的解酒功效。

論文根據(jù)中藥金銀花、葛花及蜂蜜的藥理性質(zhì)[4-9]，研制出復(fù)合口服液，通過對小白鼠進行“翻正反射實驗”觀察金銀花、葛花和蜂蜜復(fù)合口服液對小白鼠的解酒作用。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 原料

金銀花：選用市售藥用一級品金銀花；葛花：選用市售藥用一級品葛花；洋槐蜂蜜：上海冠生園蜂制品有限公司；實驗用酒56°二鍋頭：北京紅星股份有限公司。

1.1.2 實驗動物及分組

健康兩月齡SPF級昆明種雄性小鼠50只，體重23 g～26 g，隨機分為5個實驗小組，即模型對照組、口服液1組、口服液2組、口服液3組、口服液4組。每組10只，所需實驗動物均由山東大學(xué)動物實驗中心提供。

1.1.3 儀器

電子天平：北京賽多利斯天平有限公司；JYL-390九陽料理機：九陽股份有限公司；DK-450B型電熱恒溫?zé)崴?、DGG-9070B型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海森信實驗儀器有限公司；SHB-III循環(huán)水式多用真空泵：鄭州長城科工貿(mào)有限公司；RE-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海榮亞生化儀器廠。

1.2 方法

1.2.1 金銀花提取液的制備

選用質(zhì)地優(yōu)良的金銀花→洗凈→60℃烘3 h→粉碎40目過篩→加12倍去離子水，75℃恒溫浸提1 h，將浸出液過濾出，重復(fù)浸提三次→80℃下減壓濃縮至原浸提液體積的1/2→封口備用。

1.2.2 葛花提取液的制備

選擇質(zhì)地優(yōu)良的葛花→洗凈→60℃烘3 h→粉碎40目過篩→加14倍量的40%乙醇溶液浸提1.5 h→過濾出浸提液→加12倍體積量的40%乙醇溶液浸提1 h→過濾出浸提液→75℃下減壓濃縮至無乙醇味→封口備用。

1.2.3 動物實驗溶液的配置

A液：生理鹽水；

B 液：金銀花提取液∶葛花提取液∶蜂蜜=5∶5∶0.15；

C 液：金銀花提取液∶葛花提取液∶蜂蜜=3∶7∶0.15；

D 液：金銀花提取液∶葛花提取液∶蜂蜜=1∶9∶0.15；

E 液：去離子水∶葛花提取液∶蜂蜜=3∶7∶0.15。

1.2.4 模型設(shè)計

小白鼠進入實驗室后，飼養(yǎng)3 d禁食12 h后開始進行醉酒實驗。先對各組小白鼠分別灌胃A液、B液、C液、D液、E液0.25 mL/10 g體重，30 min后每10克體重灌胃0.15 mL 56°二鍋頭酒，每1 min觀察一次，統(tǒng)計各組實驗小白鼠的醉酒拖尾時間、潛伏時間和醒酒時間。

1.2.5 小白鼠醉酒醒酒的判斷

利用“翻正反射”動物實驗來判斷醉酒、醒酒狀態(tài)[10-11]：給小白鼠灌酒后，將其背向下放在實驗臺上，若此姿勢保持30 s以上則認為翻正反射消失，即為醉酒，否則為未醉。拖尾現(xiàn)象為小白鼠給酒后過段時間會出現(xiàn)走路不穩(wěn)，尾巴拖地現(xiàn)象。醉酒潛伏時間為酒后動物出現(xiàn)翻正反射消失的時間，醒酒時間為灌酒后翻正反射消失到恢復(fù)的時間。

1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

實驗數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS11.0軟件來進行單因素方差分析處理，采用t檢驗比較各實驗組之間的差異性。

2 結(jié)果與分析

2.1 對小白鼠醉酒率的影響

對小白鼠灌胃后，通過“翻正反射實驗”來判斷小白鼠的醉酒與醒酒狀態(tài)，每1 min觀察一次，連續(xù)觀察30 min，記錄每組小白鼠的醉酒只數(shù)，研究各組溶液對小白鼠醉酒率的影響。結(jié)果見表1。

結(jié)果顯示，口服液實驗2組（即金銀花提取液：葛花提取液：蜂蜜的比例為3∶7∶0.1）防醉效果明顯，而口服液1組、口服液3組的小白鼠醉酒率與對照組相比沒有顯著差異。口服液4組的小白鼠醉酒率與口服液1組、口服液3組及對照組的小白鼠醉酒率相比較沒有顯著差異，說明在口服液2組中金銀花提取液在小白鼠防醉作用中起到了很重要的作用。

表1 各處理對小白鼠醉酒率的影響Table 1 Effects of each treatment on drunken rate of mice

2.2 對小白鼠醉酒潛伏時間、醒酒時間的影響

對小白鼠灌酒后，立刻進行“翻正反射實驗”，來判斷醉酒與醒酒狀態(tài)，每1分鐘觀察一次，統(tǒng)計各組實驗小白鼠的醉酒潛伏時間和醒酒時間。實驗結(jié)果見表2。

表2 各處理對小白鼠醉酒潛伏時間、醒酒時間的影響Table 2 Effects of each treatment on drunken latent time and sober up time of mice

結(jié)果顯示，口服液2組的小白鼠在給酒后均出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，出現(xiàn)拖尾的時間與對照組相比達到顯著性差異?？诜?組、3組、4組的小白鼠與對照組的相比醉酒潛伏時間與對照組的相比雖有延長，但沒有顯著性差異；醒酒時間也有縮短，但沒有達到顯著性差異。

3 小結(jié)

1）金銀花葛花和蜂蜜復(fù)合口服液起到醒酒防醉效果的最佳配比為3∶7∶0.1，該復(fù)合口服液能有效延長小白鼠的醉酒潛伏時間，縮短小白鼠醉酒后的醒酒時間，增加小白鼠對酒精的耐受力，有效降低小白鼠的醉酒率，對小白鼠的醉酒具有顯著的解酒作用。

2）過度飲酒會造成人體機能下降，嚴(yán)重者會造成脂肪肝、酒精性肝炎等，更嚴(yán)重者會造成休克、腦死亡等。臨床實驗已證實，葛花可以用于茶飲，達到緩解酒后嘔吐等癥狀，用于解酒護肝等[12]。蜂蜜中含有一種多數(shù)水果所不含的果糖，可以促進酒精的分解吸收，有利于縮短醒酒時間。動物實驗表明金銀花提取液在降低小白鼠醉酒率的過程中與葛花、蜂蜜可起到協(xié)同增效作用。

3）考慮到給小白鼠灌胃服白酒醉酒后影響給藥的問題，實驗采用先給藥后給酒的灌胃方式，實驗結(jié)果除了體現(xiàn)所研制口服液的解酒效果外，很大程度上還體現(xiàn)了其防醉效果，因此金銀花葛花和蜂蜜復(fù)合口服液的研制具有一定的社會適用價值。

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